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目錄:上海牧榮生物科技有限公司>>實(shí)驗(yàn)試劑>>試劑盒>> 游離脂肪酸含量(FFA)測試盒

游離脂肪酸含量(FFA)測試盒
  • 游離脂肪酸含量(FFA)測試盒
參考價(jià) 面議
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)
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更新時(shí)間:2024-05-09 10:04:12瀏覽次數(shù):428評價(jià)

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游離脂肪酸含量(FFA)測試盒 游離脂肪酸(FFA)含量試劑盒(測血清、動(dòng)物組織、微生物、細(xì)胞) 上海牧榮生物科技有限公司專業(yè)實(shí)驗(yàn)室產(chǎn)品.為客戶全面解決實(shí)驗(yàn)、生產(chǎn)、開發(fā)需求,提供方便、快捷的服務(wù)。

游離脂肪酸含量(FFA)測試盒

微量法100管/96樣

正式測定前務(wù)必取2-3個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定

測定意義:

游離脂肪酸,也稱為非酯化脂肪酸,在與白蛋白結(jié)合的血漿中循環(huán)。動(dòng)物血液中的游離脂肪酸 (FFA )含量是一項(xiàng)重要的生理生化指標(biāo)。血清中游離脂肪酸的濃度與脂類代謝、糖代謝、內(nèi)分泌功能有關(guān),游離脂肪酸的濃度會(huì)因?yàn)樘悄虿?、重癥肝障礙、甲狀腺功能亢進(jìn)等疾病而上升。

測定原理:

用有機(jī)溶劑萃取FFA。含有FFA的有機(jī)液與三乙醇胺銅反應(yīng),在有機(jī)相中形成脂肪酸銅 (銅皂) FFA一Cu。Cu離子與顯色液反應(yīng)形成紫紅色絡(luò)合物。反應(yīng)形成的顏色深淺與Cu離子濃度的關(guān)系符合朗伯一比爾定律,因此可利用此反應(yīng)進(jìn)行比色。

自備的儀器和用品:

酶標(biāo)儀、離心機(jī)、可調(diào)式移液器、96孔板、蒸餾水。

試劑的組成和配制:

萃取液:液體 120 mL×1瓶,4℃保存;

試劑一:液體 15 mL×1瓶,4℃保存;

試劑二:液體 15 mL×1瓶,4℃保存;

試劑三:粉劑×1瓶,室溫保存;

試劑四:液體 12 mL×1瓶,4℃保存;

樣本前處理:

1.動(dòng)物組織:按照動(dòng)物組織質(zhì)量(g):萃取液mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL萃取液),進(jìn)行冰浴勻漿。震蕩提取15min,5000 rpm 4℃離心5min,取有機(jī)相待測。

2.血清:吸取50 μL血清樣本,加入1 mL萃取液,震蕩提取15 min后,4℃,5000 rpm離心5 min,取有機(jī)相待測。

3.微生物、細(xì)胞:按照細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):萃取液體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬細(xì)胞加入1 mL萃取液)加入萃取液,冰浴超聲波破碎細(xì)胞(功率300w,超聲2秒,間隔3秒,總時(shí)間3min);震蕩提取15 min,然后5000 rpm 4℃離心5min,取有機(jī)相待測。

注意:有機(jī)相待測液可能存在于上層,也可能存在于下層,注意觀察,體積較多的那一層即為有機(jī)相待測液。

測定步驟:

  1. 酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長至550 nm。

  2. 工作液的配制:臨用前根據(jù)用量按照試劑一(V):試劑二(V):試劑三(m)=1(mL):1(mL):0.66(g)的比例充分混勻。(注意:現(xiàn)用現(xiàn)配,用多少配多少,在空瓶中配制,試劑盒中帶有4個(gè)空瓶,先將試劑一與試劑二混合,最后再加入試劑三粉劑)

3、測定管:吸取600μL樣本,加入200μL工作液,蓋緊后震蕩20 min,4℃,5000 rpm離心5 min,分層后取200μL上層有機(jī)相,加入100μL試劑四,搖勻,10 min后測定550 nm的吸光值,記為A測定。

4、空白管:吸取600μL萃取液,加入200μL工作液,蓋緊后震蕩20 min,4℃,5000 rpm離心5 min,分層后取200μL上層有機(jī)相,加入100μL試劑四,搖勻,10 min后測定550 nm的吸光值,記為A空白。

空白管只需測一次?!鰽=A測定-A空白

注意:1、有機(jī)溶劑易揮發(fā),加入96孔板后應(yīng)盡快檢測。

2、測定管中加入的樣本即樣本前處理中的有機(jī)相待測液。


FFA含量計(jì)算:

標(biāo)準(zhǔn)曲線:y = 0.0161x - 0.0141     R2 = 0.9985   x:棕櫚酸標(biāo)準(zhǔn)品濃度(nmol/mL)

y:吸光值差值△A


1、血清FFA含量計(jì)算:

FFA含量(μmol/mL)=(△A+0.0141)÷0.0161×V1÷(V3×V1÷V2)÷1000

=1.242×(△A+0.0141)

2、動(dòng)物組織、微生物、細(xì)胞中FFA含量計(jì)算:

(1)按樣本蛋白濃度計(jì)算

FFA含量(μmol/g鮮重)=(△A+0.0141)÷0.0161×V1÷(W× V1÷V2)÷1000

=0.062×(△A+0.0141)÷W

(2)按樣本蛋白濃度計(jì)算

FFA含量(μmo/mg prot)= (△A+0.0141)÷0.0161×V1÷(V1×Cpr)÷1000

=0.062×(△A+0.0141)÷Cpr


V1:加入樣本體積,0.6mL;V2:萃取液體積,1mL;V3:加入血清(漿)體積,0.05 mL;Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/mL;W:動(dòng)物組織樣品質(zhì)量,g; 1000:1 μmol=1000 nmol 。

注意事項(xiàng):

蛋白含量不可直接用萃取液提取的有機(jī)相待測液直接測定,可用蒸餾水或緩沖液或生理鹽水選用本公司的BCA法蛋白含量測定試劑盒。

*低檢出限為20 nmol/mL。


上海牧榮生物科技有限公司

  1. 國內(nèi)試劑耗材經(jīng)銷代理。

  2. 國外試劑的訂購??商峁W美實(shí)驗(yàn)室品牌的采購方案。

  3. 提供加急物流處理,進(jìn)口貨物,最快交期1-2周。

  4. 進(jìn)出口貨物代理服務(wù)。

  5. 公司代理眾多有名生命科學(xué)領(lǐng)域的研究試劑、儀器和實(shí)驗(yàn)室消耗品品牌:CELL DATA,Alamanda Polymers, cstti,Click Chemistry tools,Nanoprobes,Ancell,NANOCS,Ambeed, Inc,SPEED BioSystems, LLC,Tulip Biolabs, Inc,Torrey Pines Biolabs,magsphere ,FabGennix International ,paratechs,Medicago,Oraflow,CWE,Wasatch Photonics, alphananote, It4ip, proteoform, Caprico等,重點(diǎn)合作品牌 Lee Biosolutions,chematech,Nanopartz,denovix,Atto tec,macrocyclics等。

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游離脂肪酸含量(FFA)測試盒




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