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細(xì)胞衰老檢測(cè)——β-半乳糖苷酶染色
閱讀：837 發(fā)布時(shí)間：2024-4-1 β-半乳糖苷酶屬于糖苷水解酶，存在多種微生物來(lái)源，除了水解活性，某些來(lái)源的 β-半乳糖苷酶也具有轉(zhuǎn)糖基活性。β-半乳糖苷酶不僅在食品工業(yè)中的用途越來(lái)越廣泛，在生物技術(shù)領(lǐng)域如基因工程、酶工程、蛋白質(zhì)工程等方面也都發(fā)揮著重要作用，并開(kāi)始廣泛應(yīng)用于醫(yī)藥等領(lǐng)域。
實(shí)驗(yàn)原理：
β-半乳糖苷酶染色試劑盒是一種基于衰老時(shí)衰老相關(guān)半乳糖甘酶活性水平上調(diào)而對(duì)衰老細(xì)胞或組織進(jìn)行染色檢測(cè)的試劑盒。在普通光學(xué)顯微鏡下就可以觀察到細(xì)胞或組織的衰老情況。細(xì)胞衰老被認(rèn)為是生物體抑制腫瘤的一種方式，同時(shí)也是生物體老化的一種潛在原因。
β-半乳糖苷酶染色試劑盒以X-Gal為底物，在衰老特異性的β-半乳糖苷酶催化下會(huì)生成深藍(lán)色產(chǎn)物，光學(xué)顯微鏡下可觀察到變成藍(lán)色的表達(dá)β-半乳糖苷酶的細(xì)胞或組織。試劑盒僅染色衰老細(xì)胞，對(duì)正常培養(yǎng)的衰老前的細(xì)胞、靜止期細(xì)胞、永生細(xì)胞或腫瘤細(xì)胞等不會(huì)染色。
注意事項(xiàng)：
1. β-Gal固定液有一定的腐蝕性和毒性，操作時(shí)請(qǐng)注意防護(hù)。
2. β-半乳糖苷酶染色反應(yīng)依賴(lài)于特定的pH條件，不能在二氧化碳培養(yǎng)箱中進(jìn)行染色反應(yīng)。較高濃度的二氧化碳會(huì)影響染色工作液的pH值，從而導(dǎo)致染色失敗。
3. 加入染色液后，可以用封板膜或者保鮮膜封住培養(yǎng)板防止蒸發(fā)。
