詳細(xì)介紹
豬(3α-HSD)試劑盒(ELISA)
產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
樣本類型:血清、血漿、組織、細(xì)胞上清或其他生物樣本
檢測(cè)方法:雙抗夾心法
儲(chǔ)藏及保存:2-8度,6個(gè)月
檢測(cè)原理:
將目標(biāo)抗體包被于96孔微孔板中,制成固相載體,向微孔中分別加入標(biāo)準(zhǔn)品或標(biāo)本,其中的目標(biāo)連接于固相載體上的抗體結(jié)合,然后加入辣根過氧化物酶標(biāo)記的抗體,將未結(jié)合的抗體洗凈后再次*洗滌后加入TMB底物顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的目標(biāo)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(O.D.值),計(jì)算樣品濃度。
產(chǎn)品內(nèi)容:
實(shí)驗(yàn)所需儀器及設(shè)備:
實(shí)驗(yàn)操作流程:
第一步:試劑盒室溫平衡 30min ,然后從鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
第二步:設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品 50μL。
第三步:樣本孔中加入待測(cè)樣本 50μL;空白孔不加。
第四步:除空白孔外,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測(cè)抗體 100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育 60min。
第五步:棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置 1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板 5 次(也可用洗板機(jī)洗板)。
第六步:每孔加入底物 A、B 各 50μL,37℃避光孵育 15min。
第七步:每孔加入終止液 50μL,15min 內(nèi),在 450nm 波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的 O.D 值。
注:
豬(3α-HSD)試劑盒(ELISA)
僅供體外研究使用,不用于臨床診斷!
為了幫助您更好地解決在實(shí)驗(yàn)中可能碰到的各種問題,我們?cè)O(shè)計(jì)了這些問題指導(dǎo),配以試劑盒內(nèi)的說明書一起供您參考使用。很多因素都將導(dǎo)致免疫測(cè)定實(shí)驗(yàn)的失敗,而大多數(shù)技術(shù)失誤是可以通過全面閱讀和準(zhǔn)確理解說明書以及實(shí)驗(yàn)步驟來避免的。若對(duì)試劑盒內(nèi)的說明書有任何意見和建議,歡迎反饋。我們期待聽到您的聲音,從而完善我們的產(chǎn)品,更好地為您服務(wù)。
◆ 仔細(xì)閱讀說明書
◆ 檢查試劑盒標(biāo)簽上的有效期。如果超過有效期,請(qǐng)勿使用。
◆ 按說明書確定所有試劑齊全(數(shù)量、體積)
◆ 標(biāo)本制備要規(guī)范,每份標(biāo)本體積要按2-3個(gè)復(fù)孔以上的量制備(貯存),盡量分裝做備份。
短期內(nèi)無法實(shí)驗(yàn)者,注意低溫保存
◆ 準(zhǔn)備好所有實(shí)驗(yàn)額外所需物品, (比如移液器,試管,清洗器, 酶標(biāo)儀)
◆ 按說明書將所用試劑平衡至室溫,根據(jù)檢測(cè)標(biāo)本數(shù)量確定所需試劑的量
◆ 檢查試劑盒內(nèi)每種試劑的貯存條件,保證所有試劑均按照試劑盒內(nèi)說明書推薦的條件存儲(chǔ)。
◆ 檢查不穩(wěn)定或者變質(zhì)的試劑溶液(比如沉淀或變色)。有些試劑,比如標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液或者檢測(cè)稀釋液,可能在設(shè)計(jì)時(shí)就含有沉淀物。所有試劑在滴入酶標(biāo)板之前,必需充分混勻。而由于沉淀物的特性,在加入酶標(biāo)板之前,必需不停攪拌。
◆ 保證充分的孵育時(shí)間和溫度。
◆ 切勿使用不同生產(chǎn)批號(hào)的試劑取代現(xiàn)有試劑或混合現(xiàn)有試劑。
◆ 在混合或溶解蛋白溶液時(shí),避免泡沫產(chǎn)生。
◆ 在實(shí)驗(yàn)開始之前,安排好實(shí)驗(yàn)流程。
◆ 在實(shí)驗(yàn)開始之前,清潔工作臺(tái)。
◆ 若有問題,應(yīng)與我公司或代理商進(jìn)行溝通。