花菁染料簡(jiǎn)介及相關(guān)產(chǎn)品目錄

Jamry

2020-03-30

花菁染料是在兩個(gè)氮原子之間帶有聚methylamine橋的分子，帶有離域電荷：

由于其結(jié)構(gòu)，花菁具有非常高的消光系數(shù)，通常超過(guò)100,000 Lmol^-1cm^-1。不同的取代基可控制發(fā)色團(tuán)的性質(zhì)，例如吸收波長(zhǎng)，光穩(wěn)定性和熒光。吸光度和熒光波長(zhǎng)可以通過(guò)選擇聚次甲基橋的長(zhǎng)度來(lái)控制：更長(zhǎng)的花菁素具有較高的吸光度和發(fā)射波長(zhǎng)，直至近紅外區(qū)域。

花菁染料有兩種：非磺化花菁和磺化花菁。對(duì)于許多應(yīng)用，它們是可互換的，因?yàn)樗鼈兊墓庾V特性幾乎相同。磺化和非磺化染料均可用于標(biāo)記生物分子，例如DNA和蛋白質(zhì)。染料之間的區(qū)別在于它們的溶解度：硫化染料是水溶性的，并且它們?cè)谒原h(huán)境中不使用有機(jī)助溶劑進(jìn)行標(biāo)記。它們不易在水中聚集。在某些情況下，需要使用一種類(lèi)型的花菁。

非磺化花菁

可用的非磺化染料包括Cy3，Cy3.5，Cy5，Cy5.5，Cy7和Cy7.5。 Cy®代表“花菁”，并且第*位數(shù)字表示吲哚基之間的碳原子數(shù)。 Cy2是惡唑衍生物而不是吲哚洛寧，是該規(guī)則的例外。添加后綴.5表示苯并稠合的花菁。結(jié)構(gòu)的變化允許改變分子的熒光性質(zhì)，并用幾種熒光團(tuán)覆蓋可見(jiàn)光和近紅外光譜的重要部分。

大多數(shù)非磺化花菁的衍生物（酰肼和胺的鹽酸鹽除外）的水溶性低。 當(dāng)這些分子用于生物分子標(biāo)記時(shí)，為了有效反應(yīng)，必須使用有機(jī)助溶劑（5-20％DMF或DMSO）。 首先將花菁染料溶解在有機(jī)溶劑中，然后在適當(dāng)?shù)乃跃彌_液中添加到生物分子（蛋白質(zhì)，肽，氨基標(biāo)記的DNA）溶液中。 當(dāng)有效地進(jìn)行結(jié)合時(shí)，染料在沉淀之前會(huì)發(fā)生反應(yīng)。非磺化花菁的熒光性質(zhì)對(duì)溶劑和周?chē)h(huán)境的依賴性很小。

磺化花菁

磺化花菁包括促進(jìn)染料分子在水相中溶解的其他磺基。帶電的磺酸鹽基團(tuán)減少了染料分子和重度標(biāo)記的結(jié)合物的聚集。當(dāng)前可用的磺化花菁包括磺基-Cy3，磺基-Cy5和磺基-Cy7。

磺化花菁是高度水溶性的。用這些試劑進(jìn)行標(biāo)記不需要有機(jī)助溶劑。

磺化和非磺化花菁顯示出非常相似的熒光性質(zhì)。但是，應(yīng)注意一些差異。非磺化花菁必須在使用前溶解在有機(jī)助溶劑（DMF或DMSO）中，并添加到目標(biāo)分子在水性緩沖液中的溶液中。對(duì)于Cy3，Cy5，Cy7，推薦的助溶劑體積應(yīng)為10％，對(duì)于.5對(duì)應(yīng)物，應(yīng)為15％?；腔ㄝ荚噭┛稍诩兯畻l件下使用。純化也有區(qū)別：當(dāng)使用水或水性緩沖液透析進(jìn)行純化時(shí)，必須使用磺基花菁來(lái)有效去除未反應(yīng)的染料?？梢酝ㄟ^(guò)凝膠過(guò)濾，色譜法（HPLC，F(xiàn)PLC，離子交換）或電泳純化與磺基和非磺基花菁的反應(yīng)。

魅羅科技MeloPEG生產(chǎn)經(jīng)營(yíng)Cyanines系列試劑，可以定制合成Cy-X或Cy-PEG-X類(lèi)產(chǎn)品（X表示各種活性基團(tuán)或靶向基團(tuán)），相關(guān)產(chǎn)品有（但不僅限）：

CY3-COOH

CY3-NHS

CY3-SH

CY3-NH2

CY3-N3

Cy3-Hydrazide

CY3-DBCO

Cy3-Tetrazine

Cy3-TCO

Cy3-PEG-NH2

Cy3-PEG-SH

Cy3-PEG-Biotin

Cy3-PEG-NHS

Cy3-PEG-Mal

Cy3-PEG-DSPE

Cy3-PEG-FA

Cy3-PEG-DBCO

CY5-COOH

CY5-NHS

CY5-SH

CY5-NH2

CY5-N3

Cy5-Hydrazide

CY5-DBCO

Cy5-Tetrazine

Cy5-TCO

Cy5-PEG-NH2

Cy5-PEG-SH

Cy5-PEG-Biotin

Cy5-PEG-NHS

Cy5-PEG-Mal

Cy5-PEG-DSPE

Cy5-PEG-FA

Cy5-PEG-DBCO

CY7-COOH

CY7-NHS

CY7-SH

CY7-NH2

CY7-N7

Cy7-Hydrazide

CY7-DBCO

Cy7-Tetrazine

Cy7-TCO

Cy7-PEG-NH2

Cy7-PEG-SH

Cy7-PEG-Biotin

Cy7-PEG-NHS

Cy7-PEG-Mal

Cy7-PEG-DSPE

Cy7-PEG-FA

Cy7-PEG-DBCO