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固相合成多肽的基本原理

閱讀:3368      發(fā)布時間:2020-6-12
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  多肽是涉及生物體內(nèi)各種細胞功能的生物活性物質(zhì)。它是分子結(jié)構(gòu)介于氨基酸和蛋白質(zhì)之間的一類化合物,由多種氨基酸按照一定的排列順序通過肽鍵結(jié)合而成。到現(xiàn)在,人們已發(fā)現(xiàn)和分離出一百多種存在于人體的肽,對于多肽的研究和利用,出現(xiàn)了一個繁榮景象。
 
  多肽的全合成不僅具有很重要的理論意義,而且具有重要的應(yīng)用價值。通過多肽全合成可以驗證一個新的多肽的結(jié)構(gòu);
 
  設(shè)計新的多肽,用于研究結(jié)構(gòu)與功能的關(guān)系;為多肽生物合成反應(yīng)機制提供重要信息;建立模型酶以及合成新的多肽藥物等。
 
  多肽的化學(xué)合成技術(shù)無論是液相法還是固相法都已成熟。近幾十年來,固相法合成多肽更以其省時、省力、省料、便于計算機控制、便于普及推廣的突出優(yōu)勢而成為肽合成的常規(guī)方法并擴展到核苷酸合成等其它有機物領(lǐng)域。本文概述了固相合成的基本原理、實驗過程,對其現(xiàn)狀進行分析并展望了今后的發(fā)展趨勢。
 
  固相合成多肽的基本原理
 
  多肽合成是一個重復(fù)添加氨基酸的過程,合成一般從C端(羧基端)向N端(氨基端)合成。過去的多肽合成是在溶液中進行的,但自從1963年Merrifield發(fā)展成功了固相多肽合成方法以來,經(jīng)過不斷的改進和完善,到今天固相法已成為多肽和蛋白質(zhì)合成中的一個常用技術(shù),表現(xiàn)出了經(jīng)典液相合成法*的優(yōu)點。
 
  其基本原理是:先將所要合成肽鏈的羥末端氨基酸的羥基以共價鍵的結(jié)構(gòu)同一個不溶性的高分子樹脂相連,然后以此結(jié)合在固相載體上的氨基酸作為氨基組份經(jīng)過脫去氨基保護基并同過量的活化羧基組分反應(yīng),接長肽鏈。
 
  重復(fù)(縮合→洗滌→去保護→中和和洗滌→下一輪縮合)操作,達到所要合成的肽鏈長度,后將肽鏈從樹脂上裂解下來,經(jīng)過純化等處理,即得所要的多肽。其中α-氨基用BOC(叔丁氧羰基)保護的稱為BOC固相合成法,α-氨基用FMOC(9-芴甲氧羰基)保護的稱為FMOC固相合成法,

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