大鼠血清來源于非免疫的大鼠宿主，用脂質提取并用含有NaN3的PBS溶液透析以提高其透明度。建議用PBS將封閉血清原液稀釋5-20倍，配制5%-20%的工作液，直接滴在組織切片或細胞涂片上，37℃孵育10-30分鐘，取出血清無需洗滌，滴加適量稀釋的一抗工作液，37℃孵育1-2h或4℃過夜。注意：封閉血清不能含有目的蛋白，與一抗不同。可以使用與二抗來源相同的封閉血清。
大鼠血清使用注意事項：
1、樣品中不能含有（NaN3），因為（NaN3）是辣根過氧化物酶（HRP）的抑制劑。
2、樣品采集后應盡快提取。提取應根據相關文獻進行。提取后應盡快進行實驗。如不能立即進行試驗，試樣可在-20℃保存，但應避免反復凍融。
3、樣品應充分離心，無溶血和顆粒。
4、實驗應嚴格按照說明書操作進行，實驗結果的判斷必須以酶標儀讀數為準。
5、酶標包被板開封后如未用完，應立即裝入密封袋中，并用干燥劑保存。
6、建議所有標準品、樣品和空白對照均一式兩份檢測，取平均值，以減少實驗誤差。
7、記住樣品已經稀釋了5倍，樣品的實際濃度是通過計算結果乘以5來計算的。
8、本試劑盒的定量范圍為11.25-360pg/ml。超出此范圍，通過標準曲線的延伸計算。這不是一個準確的定量結果。請使用專用稀釋劑稀釋確定準確結果（在11.25-360pg/ml范圍內），再乘以總稀釋倍數即可得到樣品的最終濃度。
9、如果顏色太淺，可適當延長底物孵育時間。
10、為避免交叉污染，每次添加標準品、樣品和空白對照品時都應更換吸頭；酶標工作液、樣品稀釋液、底物等常用組分加懸臂，不得接觸微孔；請勿重復使用密封膜。
11、大鼠血清試劑盒應在保質期內使用，不得混用不同批次的試劑。
12、基材B對光敏感，不宜長時間暴露在光線下。
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