HPLC系統(tǒng)能否有效運(yùn)行取決于流動相和樣品不受化學(xué)雜質(zhì)或固體懸浮液的影響。對于HPLC流動相的處理和使用注意事項(xiàng)討論主要圍繞在流動相的制備和使用中應(yīng)采取的措施。對于樣品過濾的重要性討論主要圍繞在進(jìn)樣時清潔樣品的好處。
HPLC色譜柱是HPLC系統(tǒng)中的重要組成部分，使用時需要細(xì)心使用，用完后要維護(hù)避免下次使用發(fā)生問題。經(jīng)常更換色譜柱是很昂貴的，因此為了節(jié)約成本，需要較大程度地延長色譜柱的使用壽命。同時也要細(xì)心維護(hù)色譜柱，以便每次獲得結(jié)果保持準(zhǔn)確性和一致性。
由于經(jīng)常使用色譜柱，化學(xué)雜質(zhì)和固體懸浮液顆粒等會逐漸積累，色譜性能在使用過程中開始下降。流動相或樣品中存在的大顆粒雜質(zhì)開始沉積在色譜柱的入口上，從而干擾流動的均勻性。較小的顆粒會導(dǎo)致背壓增加，導(dǎo)致阻塞固定相中的流路。
污染物有哪些？
1、反相分離中高度保留的化合物，例如脂肪酸。
2、不可逆地保留的化合物，如殘留的蛋白物質(zhì)，在樣品提取時并未*去除。解決這個問題可以在HPLC分析之前對樣品中的蛋白質(zhì)進(jìn)行去蛋白化。
3、顆粒雜質(zhì)，可能是樣品未過濾，系統(tǒng)組件（例如泵或進(jìn)樣器中的密封件）的磨損導(dǎo)致產(chǎn)生顆粒雜質(zhì)。又或者是進(jìn)樣時溶劑中本身還有顆粒物雜質(zhì)，沒有過濾導(dǎo)致顆粒物質(zhì)進(jìn)入系統(tǒng)。建議使用溶劑進(jìn)樣口過濾器，過濾掉微小顆粒物質(zhì)，避免進(jìn)入到HPLC系統(tǒng)中。
恒譜生2μ,5μ,10μ,20μm液相色譜儀流動相入口溶劑過濾器，保護(hù)泵、單向止回閥 、進(jìn)樣器 、色譜柱免受有害顆粒污染物的損壞；吸濾阻力較小，較大的圓柱形篩板表面積，幾乎沒有背壓；吸濾頭尺寸較小，可用于多種小瓶口的存儲池容器；不會將空氣引入系統(tǒng)，無氣泡進(jìn)入流動相管路，儲液瓶溶劑抽取利用率可達(dá)99%以上，大大減少瓶底溶劑因無法凈真空吸取而造成的浪費(fèi)；設(shè)有多階管路接頭，兼容多種內(nèi)徑溶劑流動相管路，不需要更換吸濾頭即可匹配不同規(guī)格的吸管；產(chǎn)品兼 容性高，適用于各種品牌的HPLC系統(tǒng)。
4、柱內(nèi)殘留緩沖液，干燥后導(dǎo)致結(jié)晶沉淀。使用色譜柱后用HPLC級純水或緩沖溶液洗滌色譜柱可防止此類鹽沉淀的形成。
什么是保護(hù)柱？
保護(hù)柱是安裝在進(jìn)樣器和分析柱之間的，截留導(dǎo)致色譜柱篩板堵塞、柱頭塌陷和柱效下降的化學(xué)物質(zhì)和顆粒物。化學(xué)物質(zhì)和顆粒物會污染、堵塞色譜柱，給分析帶來不良影響等。這時通過在色譜柱前安裝分析保護(hù)柱可以防止其產(chǎn)生，能起保護(hù)色譜柱的作用。保護(hù)柱最好與分析柱具有相同的填料，以消除分離的復(fù)雜性。保護(hù)柱的內(nèi)部ID應(yīng)與分析柱相當(dāng) ，以最小化背壓。保護(hù)柱需要定期更換，可根據(jù)例如背壓增加，峰展寬和峰保留時間的變化來決定更換的周期。
恒譜生建議您可以有效地利用、定期更換色譜保護(hù)柱，以延長色譜柱的壽命。
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