HPLC和GC是已在化學(xué)實(shí)驗(yàn)室中站穩(wěn)腳跟的分離技術(shù)。這兩種技術(shù)的基本目的是分離和量化有機(jī)混合物的成分。
您有沒有想過為什么HPLC色譜柱比 GC 色譜柱更短更寬。在回答這個(gè)問題之前，您應(yīng)該了解柱長(zhǎng)度的好處。
一、柱長(zhǎng)：
隨著液相色譜柱長(zhǎng)度的增加，洗脫化合物和固定相之間的相互作用時(shí)間也會(huì)增加，從而提高色譜柱效率和分離度。這導(dǎo)致分離良好的峰。然而，由于柱頭壓力增加和分析時(shí)間增加而面臨的實(shí)際問題，不能無限增加柱長(zhǎng)。
HPLC 色譜柱的尺寸要求取決于分離目標(biāo)。通常的分析應(yīng)用要求色譜柱長(zhǎng)度為 15 – 25 cm，內(nèi)徑為 4.6 mm，恒譜生的液相分析柱有2.1、3.0、4.0、4.6、7.8內(nèi)徑可選，長(zhǎng)度20-250mm不等。
如果追求高效率分析，USHA這一系列色譜柱非常適合您。它提高了速度和分辨率。可提供70- 300 ?孔徑，1.8、2、3、5、10粒徑的色譜填料。同時(shí)有許多不同的固定相可供選擇（C18、C8、苯基、C4、C3、C1、氰基 [CN]、PFP、F-C8 和 C30），建議使用這些色譜柱進(jìn)行小分子反相分離，是非常耐用的液相分析柱。
制備色譜柱可以更寬，直徑范圍為 20 – 50 mm。恒譜生制備柱從10-50內(nèi)徑不等，長(zhǎng)度20-250mm不等，幾乎涵蓋了常用的多種尺寸。即使需要更長(zhǎng)的柱管，恒譜生也能提供定制。
二、氣相色譜柱：
氣相色譜柱基本上分為填充柱和毛細(xì)管柱。填充柱通常長(zhǎng)約 1.5 m 或 6ft，外徑為 1/8" 或 3.2mm。另一方面，毛細(xì)管柱長(zhǎng)幾米（10-100m）。填充柱由玻璃或不銹鋼制成，而毛細(xì)管柱由熔融石英軟管制成。柔性管允許將長(zhǎng)柱作為圓形線圈容納到柱溫箱中。現(xiàn)在檢查兩種技術(shù)在分離過程中的差異，以得出關(guān)于 GC 和 HPLC 柱之間長(zhǎng)度差異的基本問題的合乎邏輯的答案。
三、流動(dòng)相：
流動(dòng)相的性質(zhì)——首要的原因是被稱為流動(dòng)相的載液的性質(zhì)。HPLC 使用液體作為樣品通過色譜柱的載體，而在 GC 中，氣流用于攜帶樣品。液體比氣體具有更高的粘度，因此在通過色譜柱時(shí)會(huì)遇到更大的阻力。色譜柱越長(zhǎng)，流動(dòng)相的流動(dòng)阻力越大，因此 HPLC 需要更短的色譜柱長(zhǎng)度。恒譜生小型化液相色譜柱空柱管總成10X20mm就是專門為需要比較短柱長(zhǎng)的客戶研發(fā)。死體積很小，管內(nèi)壁光滑，橫截面均勻呈圓形；保證色譜柱制成品的高性能。
四、樣品：
樣品揮發(fā)性——注入 HPLC 的樣品是液體，而在 GC 中它可以是液體或氣體。但是，在進(jìn)入 GC 色譜柱之前：由于進(jìn)樣器模塊中的高溫，液體會(huì)轉(zhuǎn)化為蒸氣。氣體在 GC 色譜柱中遇到的阻力較小，這允許使用更長(zhǎng)的色譜柱長(zhǎng)度。
五、穩(wěn)定性：
樣品穩(wěn)定性——通過 HPLC 分析的樣品通常是熱不穩(wěn)定的，因此它們?cè)?HPLC 柱中在室溫下處于液相。另一方面，進(jìn)入氣相色譜柱的樣品是具有較低分子量和沸點(diǎn)的氣體。此類化合物在通過色譜柱期間很容易蒸發(fā)并以氣體形式保留。
進(jìn)一步縮短色譜柱長(zhǎng)度，特別是在新的 UHPLC 應(yīng)用中，導(dǎo)致分析速度加快，靈敏度提高。分析應(yīng)用的未來趨勢(shì)必然是將 HPLC 色譜柱長(zhǎng)度和分析時(shí)間從幾分鐘縮短到幾秒鐘。
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