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淺析ODS填料的操作要點(diǎn)及注意事項(xiàng)

閱讀:2371      發(fā)布時(shí)間:2022-9-19
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  ODS填料的粒度主要影響填充柱的兩個(gè)參數(shù),即柱效和背壓。粒度越小,其表面積越大,填充柱的柱效超高;然而粒度越小,柱壓越大,柱壓的增加限制了粒度小于3pm的ODS填料應(yīng)用。在相同選擇性條件下,提高柱效可提高分離度,但不是因素。
  如果固定相選擇是正確,但是分離度不夠,那么選用更小粒度的ODS填料是很有用的。3umODS填料填充柱的柱效比相同條件下的5pmODS填料的柱效提高近30%;然而,3um的色譜柱的背壓卻是5um的2倍。與此同時(shí),柱效提高意味著在相同條件下可以選用更短的色譜柱,即相同的塔板數(shù)或分離能力,但是柱長更短,以縮短分析時(shí)間。另外,可以采用低粘度的溶劑做流動(dòng)相或增加色譜柱的使用溫度,比如用乙睛代替甲醇,以降低色譜柱的壓力。
  ODS填料操作要點(diǎn)
  1.首先對(duì)流動(dòng)相進(jìn)行過濾,根據(jù)需要選擇不同的濾膜,一般為有機(jī)系和水系,常用的孔徑為0.20um和0.45um。
  2.對(duì)抽濾后的流動(dòng)相進(jìn)行超聲脫氣10-20分鐘。
  3.正常情況下,儀器首先用甲醇沖洗10-20分鐘,然后再進(jìn)入測(cè)試用流動(dòng)相(如流動(dòng)相為緩沖試劑,則要二次重蒸水沖洗10-20分鐘,直至色譜柱中有機(jī)相沖凈為止)。
  4.一般情況下,流動(dòng)相沖洗20-30分鐘后,儀器方可穩(wěn)定,重要的是儀器基線走后,方可進(jìn)樣測(cè)試。
  5.同時(shí)進(jìn)兩針標(biāo)樣,將其結(jié)果相比較,其結(jié)果的比值在0.98-1.02之間后,就可以正式進(jìn)行樣品的測(cè)試了。
  6.樣品測(cè)試結(jié)束后,就要進(jìn)行色譜儀及色譜柱的清洗和維護(hù)。如流動(dòng)相為緩沖試劑,同樣也要用重蒸水清洗10-20分鐘,方可用有機(jī)相進(jìn)行保護(hù),否則,有損色譜柱。
  7.關(guān)機(jī)時(shí),先關(guān)計(jì)算機(jī),再關(guān)液相色譜。
  8.填寫登記本,由負(fù)責(zé)人簽字。
  ODS填料注意事項(xiàng)
  1.流動(dòng)相均需色譜純度,水用20M的去離子水。脫氣后的流動(dòng)相要小心振動(dòng)盡量不引起氣泡。
  2.柱子是非常脆弱的,次做的方法,先不要讓液體過柱子。
  3.所有過柱子的液體均需嚴(yán)格的過濾。
  4.壓力不能太大,不要超過150kgf/cm2。
  5.因?yàn)榫彌_試劑遇有機(jī)溶劑,會(huì)結(jié)晶,有損色譜柱,所以,每次由有機(jī)相變流動(dòng)相或流動(dòng)相變有機(jī)相均需用蒸餾水清洗。

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