首先檢查色譜柱與儀器的連接和管道是否匹配。使用色譜柱測(cè)試程序中建議的過濾和脫氣流動(dòng)相沖洗您的 HPLC 泵和管路。確保系統(tǒng)中沒有氣泡。將流速設(shè)置為0.1mL/min 并連接到色譜柱入口，確保流速沿色譜柱上箭頭指示的方向。擰緊進(jìn)入色譜柱的末端接頭，將流速增加到 1mL/min（僅適用于4.6mm ID 色譜柱）持續(xù)5分鐘。在連接到流通池之前，停止流動(dòng)并擦拭色譜柱的出口端以去除其他任何的顆粒。將色譜柱出口連接到流通池，以1 mL/min 的速度將大約10個(gè)色譜柱體積通過系統(tǒng)（僅適用于 4.6 mm ID 色譜柱），同時(shí)觀察背壓。穩(wěn)定的背壓表明流量恒定，而出現(xiàn)波動(dòng)可能表明系統(tǒng)中有空氣，大幅波動(dòng)可能會(huì)沖擊和損壞色譜柱。當(dāng)壓力穩(wěn)定在規(guī)定的范圍內(nèi)時(shí)，色譜柱就可以使用了。
同時(shí)在更換溶劑時(shí)重新平衡系統(tǒng)時(shí)，切勿將一種溶劑換成另一種不混溶的溶劑，無需通過與兩者混溶的中間溶劑，否則會(huì)損壞色譜分析柱的性能。如果緩沖液/鹽不溶于第二種溶劑，切勿換成（或換出）緩沖液/鹽溶液。這也是會(huì)損壞色譜柱的性能的。對(duì)于更復(fù)雜的樣品和延長(zhǎng)液相色譜柱的使用壽命，建議在色譜柱前安裝保護(hù)柱。
對(duì)于需要多久檢查一次色譜柱的性能，沒有一般的經(jīng)驗(yàn)法則，這取決于使用情況和應(yīng)用。建議在新色譜柱上運(yùn)行測(cè)試樣品并將其作為參考。隨著時(shí)間的推移，將您自己的測(cè)試色譜圖與此原始色譜圖進(jìn)行比較可以幫助您評(píng)估色譜柱是否失去了柱效，或者是否有其他影響性能的變化。可以通過定量分析效率、選擇性、分離度和壓力等參數(shù)了解色譜柱的比較性能。
1.選擇合適的液相保護(hù)柱，免受非揮發(fā)性材料的損壞和污染，保護(hù)柱填料的粒徑應(yīng)盡可能與色譜柱填料的粒徑相同。
2.留意色譜柱的pH范圍。
3.避免猛烈撞擊或掉落色譜柱，因?yàn)槲锢頉_擊會(huì)在色譜柱中產(chǎn)生空隙和通道，從而導(dǎo)致峰拖尾和柱效損失。
4.確保色譜柱末端接頭、管螺母和套圈兼容。連接不兼容的接頭會(huì)導(dǎo)致泄漏、增加死體積和損壞色譜柱螺紋。
5.如果色譜柱上刻有箭頭，請(qǐng)安裝色譜柱，使流向與箭頭一致。大多數(shù)色譜柱都有一個(gè)優(yōu)選的流動(dòng)方向，旨在避免色譜柱出現(xiàn)問題和故障。
今天恒譜生分享的知識(shí)先到這啦，希望對(duì)您的工作有所幫助！
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