液相色譜對于實驗室分析員來說是容易上手的儀器了，但就算是經(jīng)驗豐富的分析員都會經(jīng)常出現(xiàn)錯誤的操作導致液相色譜儀器發(fā)生故障。而這個時候分析員一般就會選擇把色譜柱進行反沖這個方法，但恒譜生在這里建議分析員在一般情況下還是不要反沖色譜柱，除非色譜柱有特別說明是可以反沖的。
那么，哪些柱子不能反向沖洗呢？其實有兩種，一種是兩端柱篩板不一樣是不適合的，因為入口的那一端柱篩板的孔徑比較大會導致固體顆粒物質(zhì)的堵塞，所以一旦進行反沖就有可能出現(xiàn)造成填料的流失從而導致分析柱的柱效下降的情況；另一種就是色譜分析柱柱頭塌陷或變型是不宜反沖是，因為柱頭塌陷或變型了會在柱頭上留下縫隙，從而在反沖的時候會導致柱床移動和填料松動。
雖然液相色譜柱不應該隨便進行反沖，但如果明確知道來自顆粒物堵塞篩板或柱頭污染時，反沖色譜柱是一種補救措施。但反沖前確認柱子是否能夠進行反沖，反沖的時候要注意以下幾點：
1、在把堵塞在入口那一段端的篩板上的污染物沖出來的同時，柱頭的填料可能也會被沖出來造成柱效的降低，甚至色譜柱的報廢。
2、如果色譜柱出入口篩板孔徑不一致的話，反沖色譜柱就有可能造成填料漏出，柱效降低等
3、根據(jù)自己用的柱子情況分析到底是什么原因堵塞，可以用易溶于污染物的溶劑來清洗。目前較多的是緩沖鹽鹽析造成，可以用大量的水來沖洗。
4、反沖后要把柱子正過來使用，盡量避免長期反復正反使用。
除了反沖，想要延長色譜柱的使用壽命，可以在分析柱前連接液相保護柱。保護柱安裝在HPLC系統(tǒng)的進樣閥和色譜柱之間，目的用于保護色譜柱和延長色譜柱使用壽命。恒譜生液相制備保護柱為色譜柱提供方便、經(jīng)濟和有效的保護，延長了液相色譜柱的壽命，保證分析結(jié)果的重現(xiàn)性。隨著使用時間的增加，高效液相色譜柱分離效能下降，柱壓增高，其原因主要是由于色譜柱進口段的少量填料被污染引起的，而色譜柱整個柱床并未被破壞，使用色譜柱保護柱，相當于在色譜柱前增加了一段額外的填料，起到了保護整個UPLC色譜柱的作用。
今天恒譜生分享的知識先到這啦，希望對您的工作有所幫助！
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