每個(gè)實(shí)驗(yàn)室的色譜分析工作者都很清楚，HPLC 分析使用液體作為載體，它將注入的樣品溶液輸送到色譜柱然后輸送到檢測(cè)器。這種載體可以是緩沖液與有機(jī)溶劑的水-有機(jī)混合物、有機(jī)-有機(jī)混合物。HPLC 系統(tǒng)的管道和閥門通道非常狹窄，使用未經(jīng)適當(dāng)過濾的溶液可能會(huì)導(dǎo)致堵塞。通過液相色譜儀運(yùn)行清潔、無顆粒的 HPLC 級(jí)溶劑是一項(xiàng)基本維護(hù)方案。
使用過濾流動(dòng)相以去除顆粒物質(zhì)能夠防止導(dǎo)致色譜柱堵塞，色譜柱不僅很昂貴而且被顆粒物堵塞會(huì)導(dǎo)致背壓增加或保留時(shí)間發(fā)生變化；還能最大限度地減少由于 LCMS、UPLC 和 HPLC 等靈敏度高的儀器設(shè)備中的精密閥門和管路堵塞而導(dǎo)致的系統(tǒng)停機(jī)時(shí)間。高級(jí)色譜溶劑/超純水通常通過 0.2 微米過濾器進(jìn)行預(yù)過濾，以滿足其在色譜系統(tǒng)中使用的等級(jí)。但是，有時(shí)您也使用這些溶劑（含或不含化學(xué)試劑和添加劑）制備（混合）自己的流動(dòng)相。當(dāng)您使用這些試劑級(jí)化學(xué)品或添加劑制備流動(dòng)相時(shí)，還應(yīng)該在使用前通過 0.2 微米玻璃或鋼過濾器過濾最終混合物，這可以確保您的流動(dòng)相儲(chǔ)液瓶在使用過程中是沒有污垢和灰塵等雜質(zhì)。
過濾和過濾器（又稱溶劑吸濾頭、流動(dòng)相吸濾頭等）在 LC 系統(tǒng)中是非常重要的，因?yàn)榱鲃?dòng)相流路中如果存在微粒，LC 系統(tǒng)中的許多組件都容易過早失效。例如，從溶劑瓶中抽出的流動(dòng)相中的灰塵或其他微粒會(huì)導(dǎo)致泵止回閥失效（泵根本不產(chǎn)生流量）。所以在選擇流動(dòng)相溶劑進(jìn)行任何分析之前檢查流動(dòng)相溶劑的混溶性很重要，同樣重要的是檢查它們?cè)诨旌蠒r(shí)不會(huì)相互反應(yīng)。否則懸浮顆粒物會(huì)導(dǎo)致柱內(nèi)積聚并產(chǎn)生背壓，從而影響流速和損壞泵的組件。最壞的情況還可以是接頭處可能會(huì)出現(xiàn)流動(dòng)相泄漏并伴隨著分析運(yùn)行停止的情況發(fā)生。還有故障模式涉及進(jìn)樣樣品或儀器組件中的微粒積聚在色譜柱入口處，從而導(dǎo)致色譜柱堵塞。
選擇合適的過濾器需要了解過濾器/溶劑相容性以及過濾器的化學(xué)/物理特性。這些特性包括孔徑、孔分布、過濾器厚度、可提取物、疏水/親水特性、結(jié)合特性、熱原性、氣體和液體流速、爆破強(qiáng)度、高壓滅菌性、孔徑和標(biāo)稱顆粒保留。選擇不正確的過濾器可能會(huì)導(dǎo)致可提取材料危及分析結(jié)果。對(duì)于色譜分析，可萃取材料產(chǎn)生的情況包括樣品吸收、共流出和外來峰。在液相色譜的應(yīng)用中通常選擇孔徑為 0.45μm的在線過濾器，而對(duì)于細(xì)菌去除或超高液相色譜應(yīng)用中則適宜選擇 0.2μm 的在線過濾器。
今天恒譜生分享的知識(shí)先到這啦，希望對(duì)您的工作有所幫助！
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