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Celetrix電轉(zhuǎn)儀操作步驟介紹
閱讀：3269 發(fā)布時(shí)間：2021-4-21
Celetrix電轉(zhuǎn)儀適用所有真核細(xì)胞；可以電轉(zhuǎn)DNA、RNA、siRNA、蛋白質(zhì)等。擁有示波器功能，顯示實(shí)際通過樣品的電流波形，可視化掌控實(shí)驗(yàn)質(zhì)量。電脈沖參數(shù)設(shè)定方便，內(nèi)部電路反應(yīng)迅速，設(shè)定完成即可啟動(dòng)，瞬間完成電轉(zhuǎn)。
操作步驟：
1、懸浮細(xì)胞（貼壁細(xì)胞先消化成單細(xì)胞狀態(tài)）1000rpm離心3min。
2、無血清細(xì)胞培養(yǎng)液洗一遍、1000rpm離心1min。
3、重懸細(xì)胞在電轉(zhuǎn)液中，加入DNA，將細(xì)胞轉(zhuǎn)移至電擊管蓋好并放入儀器中。
4、設(shè)定參數(shù)進(jìn)行電擊，大部分細(xì)胞系可以使用30ms單脈沖，只需改變一個(gè)電壓參數(shù)。
5、取出細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)。
細(xì)胞電轉(zhuǎn)效率影響因素：
1.實(shí)驗(yàn)操作細(xì)節(jié)很關(guān)鍵，具體操作中注意混勻的時(shí)候切勿產(chǎn)生氣泡；加質(zhì)粒的時(shí)候槍頭液體務(wù)必打干凈，勿殘留液體；吹打不能太用力，避免細(xì)胞損傷；細(xì)胞量必須達(dá)到電轉(zhuǎn)的細(xì)胞數(shù)量要求；細(xì)胞吹散；上清吸干凈，體積準(zhǔn)確。
2.細(xì)胞本身的性質(zhì)，分子的性質(zhì)，直徑的大小和均勻度是影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的關(guān)鍵因素，選擇合適的電轉(zhuǎn)時(shí)機(jī)很重要。
3.電轉(zhuǎn)樣品容器的選擇也很關(guān)鍵，選擇一個(gè)密閉的承壓容器，可以有效的減免氣泡對(duì)電轉(zhuǎn)的負(fù)面影響。
4.使用專門的電轉(zhuǎn)液能更加有效的提高電轉(zhuǎn)效率。