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常用緩沖溶液注射級氨丁三醇的配制方法

時間:2023/8/22閱讀:1063
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常用緩沖溶液注射級氨丁三醇在生物化學研究中使用較廣泛的一種緩沖劑,它的常用有效pH范圍是在“中性"范圍,如:Tris緩沖液:pH=7.5~9 Tris-HCl緩沖液:pH=7.5~8.5 Tris-磷酸鹽緩沖液:pH=5.0~9.0

1. 某一特定pH值的0.05mol/L Tris緩沖液的配制:將50ml 0.1mol/L Tris堿溶液與下表所示相應體積(單位:ml)的0.1ml/L HCl混合,加水將體積調至100ml。


圖片1.png


Tris-HCl緩沖液的兩種配置方法

第一種方法是分別配制0.05 mol/L Tris和0.05 mol/L HCl溶液,然后按常用表中所列體積混合即可。

但是由于標準濃度的稀鹽酸不易配制,所以常用另一種方法:以配置1 L 0.1 mol/L的Tris-HCl緩沖液為例:先稱12.11 g Tris堿溶于950 mL~970 mL 去離子水中,邊攪拌邊滴加4 N HCl,用pH計測定溶液pH值至所需的pH值,然后再加水補足到1 L。

其他Tris衍生緩沖液

除了Tris-HCl之外,Tris還有多種衍生緩沖液:

TBS=Tris-HCl+ NaCl+KCl,常用于清洗免疫染色的組織或Western Blotting中的蛋白印跡膜等;

TBST=Tris-HCl+NaCl+tween20,做Western Blotting中常用的一種洗膜緩沖液;

TE=Tris-HCl+EDTA,對DNA的堿基有保護性,常被用于DNA的穩(wěn)定和儲存;

TAE=Tris base+乙酸+EDTA,是大片段DNA短時間電泳時廣泛使用的緩沖系統(tǒng);

TBE=Trisbase+硼酸+EDTA,適用于長時間DNA電泳,對較小片段分離效果較好。

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