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北京中檢維康生物技術(shù)有限公司

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[供應(yīng)]CE2012,96T-iElisa 克倫特羅抗生素類(lèi)檢測(cè)試劑盒

貨物所在地:北京北京市

產(chǎn)地:中國(guó)

更新時(shí)間:2025-02-14 21:00:07

有效期:2025年2月14日 -- 2025年8月14日

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iElisa 克倫特羅抗生素類(lèi)檢測(cè)試劑盒
本試劑盒是利用競(jìng)爭(zhēng)ELISA方法,在酶標(biāo)板微孔上預(yù)包被抗克倫特羅抗原。檢測(cè)時(shí),加入標(biāo)準(zhǔn)品或樣品溶液,克倫特羅抗體及酶標(biāo)記物,包被抗原和加入樣本中的克倫特羅競(jìng)爭(zhēng)性地與克倫特羅抗體結(jié)合后,再與酶標(biāo)記物形成抗原抗體復(fù)合物,用TMB底物顯色;

 iElisa 克倫特羅抗生素類(lèi)檢測(cè)試劑盒

iElisa 克倫特羅抗生素類(lèi)檢測(cè)試劑盒

 

iElisa克倫特羅檢測(cè)試劑盒

(C/N: CE2012-G) 

---北京中檢維康生物技術(shù)有限公司

 

1、檢測(cè)原理

本試劑盒是利用競(jìng)爭(zhēng)ELISA方法,在酶標(biāo)板微孔上預(yù)包被抗克倫特羅抗原。檢測(cè)時(shí),加入標(biāo)準(zhǔn)品或樣品溶液,克倫特羅抗體及酶標(biāo)記物,包被抗原和加入樣本中的克倫特羅競(jìng)爭(zhēng)性地與克倫特羅抗體結(jié)合后,再與酶標(biāo)記物形成抗原抗體復(fù)合物,用TMB底物顯色;加入反應(yīng)終止液,在450nm波長(zhǎng)酶標(biāo)儀下進(jìn)行檢測(cè),樣品中的克倫特羅濃度與吸收光強(qiáng)度成反比。

2、檢測(cè)范圍

本試劑盒是應(yīng)用ELISA技術(shù)研發(fā)的藥物殘留檢測(cè)產(chǎn)品,與儀器分析技術(shù)比較,能經(jīng)濟(jì)、快速地檢測(cè)出尿樣、肌肉、肝臟及飼料等中的克倫特羅。

與類(lèi)似物的交叉反應(yīng)率:

克倫特羅&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;*

特布他林&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;7%

沙丁胺醇&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;25%

鹽酸腎上腺素&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;0.1%

去甲腎上腺素&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;0.1%

萊克多巴胺&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;0.1%

多巴酚丁胺&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;0.1%

3、試劑盒組成

  1. 酶標(biāo)板1塊,96/
  2. 標(biāo)準(zhǔn)液6瓶(1mL/瓶):

0 ppb、0.2ppb0.6ppb、1.8ppb5.4ppb、16.2ppb

  1. 抗體工作液 &河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;9mL
  2. 酶標(biāo)記物 &河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;3mL
  3. 底物液A &河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;7mL
  4. 底物液B &河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;7mL
  5. 終止液   &河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;7mL
  6. 說(shuō)明書(shū) &河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;1

4、需要但試劑盒中不提供的器材和試劑

1)設(shè)備

  1. 微孔板酶標(biāo)儀(450nm)
  2. 振蕩器
  3. 離心機(jī)
  4. 微量移液器:20μL200μL,100μL~1000μL
  5. 容量瓶:100mL,500mL,1000mL

2)試劑

  1. 氫氧化鈉、濃鹽酸、乙酸乙酯、乙腈

5、溶液的配制

樣本前處理需配制

  1. 配液10.1M鹽酸溶液

量取0.86mL濃鹽酸加去離子水混勻定容至100mL

  1. 配液21M鹽酸溶液

量取8.6mL濃鹽酸加去離子水混勻定容至100mL

  1. 配液30.1M氫氧化鈉溶液(組織樣本)

稱(chēng)0.4gNaOH加去離子水混勻溶解,定容至100mL

  1. 配液41M氫氧化鈉溶液(飼料樣本)

稱(chēng)4.0gNaOH加去離子水混勻溶解,定容至100mL

  1. 配液5:乙腈-0.1M鹽酸(組織樣本)

乙腈與0.1M鹽酸溶液按體積比84:16混勻

6樣本前處理方法

樣本處理前須知

處理任何樣本時(shí),都須注意:

  1. 實(shí)驗(yàn)中必須使用一次性吸頭,在吸取不同的試劑時(shí)要更換吸頭。
  2. 實(shí)驗(yàn)之前須檢查各種實(shí)驗(yàn)器具是否干凈,必須使用潔凈實(shí)驗(yàn)器具,以避免污染干擾實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

樣本處理步驟

尿樣

  1. 尿樣(若渾濁可以4000轉(zhuǎn)/ 離心5分鐘,取清亮部分),20μL進(jìn)行分析。
  2. 不用時(shí)應(yīng)冷凍保存。

稀釋倍數(shù)為1

畜禽組織(雞、鴨、豬肌肉/肝臟等)

  1. 稱(chēng)取2±0.05 g勻漿的樣品于50mL離心管中,加入6mL乙腈-0.1M鹽酸,振蕩5分鐘;室溫4000轉(zhuǎn)/分以上離心10分鐘;
  2. 取上清3mL,加2mL 0.1M氫氧化鈉溶液,6mL乙酸乙酯,振蕩5分鐘;室溫4000轉(zhuǎn)/分,以上離心10分鐘;
  3. 取全部上清至干凈玻璃試管中,于56℃水浴下氮?dú)?/span>/空氣吹干;
  4. 1mL去離子水復(fù)溶,振蕩30秒。
  5. 20μL進(jìn)行分析。

稀釋倍數(shù)為1。

飼料

  1. 用食品粉碎機(jī)或乳缽研碎飼料樣品,稱(chēng)5±0.05 g研碎的飼料樣品,加10mL乙腈;用振蕩器劇烈震蕩5分鐘,室溫3000轉(zhuǎn)/分離心5分鐘;
  2. 3mL上層清亮有機(jī)相至10mL干凈的玻璃試管中,于50-60℃氮?dú)饬飨麓蹈伞?/span>
  3. 加入1mL正己烷,用渦旋儀渦旋30秒;再加入1mL去離子歲混合,用渦旋儀渦旋1分鐘,3000轉(zhuǎn)/分離心5分鐘;去除上層正己烷相。
  4. 取下層20μL進(jìn)行分析。

稀釋倍數(shù)為1。

7酶聯(lián)免疫檢測(cè)步驟

測(cè)定前須知:

  1. 使用之前將所有試劑和需用微孔板回升至室溫。
  2. 使用之后立即將所有試劑放回2-8℃。
  3. 在使用中不要讓微孔干燥。
  4. ELISA分析中的重復(fù)性,很大程度上取決于洗板的一致性,正確的洗板操作是ELISA測(cè)定程序中的要點(diǎn)。
  5. 在所有恒溫孵育過(guò)程中,避免光線照射,用該板膜蓋住微孔板。

測(cè)定步驟:

  1. 將所需試劑從冷藏環(huán)境中取出,在室溫下平衡30分鐘,每種液體使用前均須搖勻。注意標(biāo)準(zhǔn)液均需做2個(gè)平行試驗(yàn)。
  2. 加標(biāo)準(zhǔn)液或樣品液20μL到相應(yīng)的微孔中,然后加20μL酶標(biāo)記物,80μL抗體工作液,用膜蓋好,25℃下避光反應(yīng)30分鐘。
  3. 洗板:小心揭開(kāi)蓋板膜,將孔內(nèi)液體甩干,加去離子水 250mL/孔,每次浸泡15~30秒,充分洗滌4~5次,用吸水紙拍干。
  4. 顯色:每孔先各加入底物液A 50μL,再各加入底物液B 50μL,輕輕晃蕩混勻,并在25℃下避光反應(yīng)15分鐘。
  5. 讀數(shù):每孔各加50μL終止液,在酶標(biāo)儀于450nm處測(cè)定OD值(建議用450/630nm雙波長(zhǎng)檢測(cè),在5分鐘內(nèi)讀完數(shù)據(jù))。

8、結(jié)果分析    

所測(cè)得的標(biāo)準(zhǔn)液或樣品吸光度的平均值(B)除以di一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)液(0標(biāo)準(zhǔn)液)的吸光度(B<蘇b>0)值再乘以*,得到百分吸光度值。

百分吸光度值(%)=B/B<蘇b>0 ×*

        以標(biāo)準(zhǔn)品濃度的10為底的對(duì)數(shù)為X軸, 百分吸光值為Y軸,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。將樣本的百分吸光值代入標(biāo)準(zhǔn)曲線,從標(biāo)準(zhǔn)曲線上讀出樣本所對(duì)應(yīng)的值,作為10的冪,乘以稀釋倍數(shù),即為樣品中所含克倫特羅的量。利用試劑盒專(zhuān)業(yè)分析軟件進(jìn)行計(jì)算,更便于大量樣品的準(zhǔn)確、快速分析。/

9、試劑盒靈敏度、準(zhǔn)確度、精密度

試劑盒靈敏度0.1ppb

樣本低檢測(cè)限:

尿樣&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;0.2ppb

組織&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;0.4ppb

飼料 &河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;0.4ppb

回收率:

尿樣  &河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;90±10%

組織&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;85±10%

飼料  &河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;80±15%

精密度

 試劑盒的變異系數(shù)均小于10%

10、注意事項(xiàng)

  1. 室溫低于20℃或試劑及樣本沒(méi)有回到室溫(20-25℃)會(huì)導(dǎo)致所有標(biāo)準(zhǔn)的OD值偏低。
  2. 在洗板過(guò)程中如果出現(xiàn)板孔干燥的情況,則會(huì)出現(xiàn)標(biāo)準(zhǔn)曲線不成線性,重復(fù)性不好的現(xiàn)象。所以洗板拍干后應(yīng)立即進(jìn)行下一步操作。
  3. 反應(yīng)終止液為2M硫酸,避免接觸皮膚。如不慎滴漏到皮膚上,請(qǐng)盡快用水沖洗。
  4. 不要使用過(guò)了有效日期的試劑盒;也不要使用過(guò)了有效期的試劑盒中的任何試劑,摻雜使用過(guò)了有效期的試劑盒會(huì)引起靈敏度的降低;不要交換使用不同批號(hào)試劑盒中的試劑。
  5. 保存試劑盒于2-8℃,不要冷凍,將不用的微孔板放進(jìn)自封袋重新密封。標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)和無(wú)色的發(fā)色劑對(duì)光敏感,因此要避免直接暴露在光線下。
  6. 顯色試劑有任何顏色表明發(fā)色劑變質(zhì),應(yīng)當(dāng)棄之。0標(biāo)準(zhǔn)的吸光度(450nm)值小于0.5A450nm<0.5 )時(shí),表示試劑可能變質(zhì)。
  7. 在加入底物液后,一般顯色15分鐘即可。若顏色較淺,可延長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間到20分鐘(或更長(zhǎng)),但不得超過(guò)30分鐘。反之,則減短反應(yīng)時(shí)間。
  8. 該試劑盒佳反應(yīng)溫度為25℃,溫度過(guò)高或過(guò)低將導(dǎo)致檢測(cè)吸光度值和靈敏度發(fā)生變化。

11、貯藏條件及保存期

貯藏條件:在28℃保存試劑盒

保存期:本試劑盒有效期為12個(gè)月。

 

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