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技術(shù)文章

制備液相色譜系統(tǒng)的組成部分和原理

閱讀:1691          發(fā)布時(shí)間:2024-8-30
  制備液相色譜系統(tǒng)是一種用于生物學(xué)、基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)、預(yù)防醫(yī)學(xué)與公共衛(wèi)生學(xué)、藥學(xué)等領(lǐng)域的先進(jìn)分析儀器。該系統(tǒng)基于液相色譜的原理,通過高壓驅(qū)動(dòng)流動(dòng)相通過填充有固定相的色譜柱,利用樣品中各組分在固定相和流動(dòng)相中的吸附、分配、離子交換等作用的差異,實(shí)現(xiàn)對(duì)復(fù)雜樣品中各組分的分離和純化。
 
  制備液相色譜系統(tǒng)主要由以下幾個(gè)部分組成:
 
  1. 高壓泵:負(fù)責(zé)將流動(dòng)相以高壓形式輸送到色譜柱。高壓泵的性能直接影響到整個(gè)系統(tǒng)的分離效果和穩(wěn)定性。常見的高壓泵有恒流泵、梯度泵等。
 
  2. 色譜柱:實(shí)現(xiàn)樣品分離的關(guān)鍵部件,其內(nèi)部填充有固定相。固定相可以是硅膠、聚合物、離子交換樹脂等。根據(jù)固定相的性質(zhì)和作用力,色譜柱可以分為正相色譜柱、反相色譜柱、離子交換色譜柱等。
 
  3. 檢測器:用于檢測經(jīng)過色譜柱分離后的樣品組分,并將其轉(zhuǎn)化為電信號(hào)。常見的檢測器有紫外檢測器、熒光檢測器、示差折光檢測器等。紫外檢測器因其廣譜性和靈敏度而廣泛使用,能夠檢測大多數(shù)有機(jī)化合物。
 
  4. 餾分收集器:用于收集經(jīng)過色譜柱分離后的各組分。根據(jù)需要,可以選擇手動(dòng)或自動(dòng)餾分收集器。自動(dòng)餾分收集器能夠根據(jù)檢測器的信號(hào)自動(dòng)收集特定組分,提高實(shí)驗(yàn)效率和準(zhǔn)確性。
 
  5. 控制系統(tǒng):負(fù)責(zé)整個(gè)系統(tǒng)的自動(dòng)化操作,包括泵的流速控制、檢測器的數(shù)據(jù)采集、餾分收集器的自動(dòng)控制等?,F(xiàn)代HPLC儀還配備有微機(jī)控制系統(tǒng),能夠?qū)崿F(xiàn)儀器的精確控制和數(shù)據(jù)處理。
 
  制備液相色譜系統(tǒng)的工作原理如下:
 
  1.高壓驅(qū)動(dòng):高壓泵將流動(dòng)相以高壓形式輸送到色譜柱,使樣品在高壓下通過色譜柱。高壓的作用可以使樣品中各組分的有效擴(kuò)散距離增大,從而提高分離效果。
 
  2.樣品分離:樣品在高壓作用下通過色譜柱,由于不同組分在固定相和流動(dòng)相中的吸附、分配、離子交換等作用的差異,實(shí)現(xiàn)對(duì)復(fù)雜樣品中各組分的分離。
 
  3.檢測與定量:經(jīng)過色譜柱分離后的樣品組分被檢測器檢測,并將其轉(zhuǎn)化為電信號(hào)。通過對(duì)電信號(hào)的處理和分析,可以實(shí)現(xiàn)對(duì)樣品中各組分的定量分析。
 
  4.餾分收集:根據(jù)檢測器的信號(hào),控制系統(tǒng)可以自動(dòng)控制餾分收集器的工作,實(shí)現(xiàn)對(duì)分離后各組分的自動(dòng)收集。

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