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酶標(biāo)儀儀器介紹
酶標(biāo)儀是酶聯(lián)免疫吸附試驗的儀器。大體可分為半自動和全自動2大類，兩大類的工作原理基本上都是一致的，其核心都是一個比色計,即用比色法來分析抗原或抗體的含量。 ELISA測定一般要求測試液的終體積在250u l以下，用一般光電比色計無法完成測試，因此對酶標(biāo)儀中的光電比色計有特殊要求。
原理
酶標(biāo)儀的基本工作原理與主要結(jié)構(gòu)和光電比色計基本相同，因此酶標(biāo)儀實際上就是一臺變相的光電比色計或分光光度計。 光源燈發(fā)出的光波經(jīng)過濾光片或單色器變成一束單色光，進(jìn)入塑料微孔極中的待測標(biāo)本.該單色光一部分被標(biāo)本吸收，另一部分則透過標(biāo)本照射到光電檢測器上，光電檢測器將這一待測標(biāo)本不同而強(qiáng)弱不同的光信號轉(zhuǎn)換成相應(yīng)的電信號.電信號經(jīng)前置放大，對數(shù)放大，模數(shù)轉(zhuǎn)換等信號處理后送入微處理器進(jìn)行數(shù)據(jù)處理和計算，后由顯示器和打印機(jī)顯示結(jié)果. 微處理機(jī)還通過控制電路控制機(jī)驅(qū)動機(jī)構(gòu)X方向和Y方向的運(yùn)動來移動微孔板，從而實現(xiàn)自動進(jìn)樣檢測過程.微孔板是一種經(jīng)事先包理于放置待測樣本的透明塑料板，板上有多排大小均勻一致的小孔，孔內(nèi)都包埋著相應(yīng)的抗原或抗體，微孔板上每個小孔可盛放零點幾毫升的溶液.酶標(biāo)儀中所屬的光是電磁波，紫外光的波長100nm～400nm，400nm～780nm之間的光可被人眼觀察到，大于780nm稱為紅外光。酶標(biāo)儀測定的原理是在特定波長下，檢測被測物的吸光值。
檢測單位
光通過被檢測物，前后的能量差異即是被檢測物吸收掉的能量，特定波長下，同一種被檢測物的濃度與被吸收的能量成定量關(guān)系。檢測單位用OD值表示， OD是optical density（光密度）的縮寫，表示被檢測物吸收掉的光密度， OD=log（1/trans），其中trans為檢測物的透光值。根據(jù)Bouger-amberT-beer法則，OD值與光強(qiáng)度成下述關(guān)系：
E=OD=log(lo/Ι) 其中E表示被吸收的光密度， Ιo 為在檢測物之前的光強(qiáng)度，Ι為從被檢測物出來的光強(qiáng)度。
OD值由下述公式計算：E=OD=a×b×c
c為檢測物的濃度 b為檢測物的厚度 a為摩爾因子在特定波長下測定每一種物質(zhì)都有其特定的波長，在此波長下，此物質(zhì)能夠吸收多的光能量。如果選擇其它的波長段，就會造成檢測結(jié)果的不準(zhǔn)確。因此，在測定檢測物時，我們選擇特定的波長進(jìn)行檢測，稱為測量波長。但是每一種物質(zhì)對光能量還存在一定的非特異性吸收，為了消除這種非特異性吸收，我們再選取一個參照波長，以消除這個不準(zhǔn)確性。在參照波長下，檢測物光的吸收小。檢測波長和參照波長的吸光值之差可以消除非特異性吸收。