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技術(shù)文章

人廣譜細(xì)胞角蛋白(P-CK)elisa檢測試劑盒?操作步驟

閱讀:1160          發(fā)布時間:2022-11-2

人廣譜細(xì)胞角蛋白(P-CK)elisa檢測試劑盒操作步驟:


1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣:在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔,在*、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl,然后在*、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后從*孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,濃度分別為15 ng/ml ,10 ng/ml,5ng/ml,2.5ng/ml,1.25ng/ml)。


2. 加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。


3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。


4. 配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。


5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。


6. 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。


7. 溫育:操作同3。


8. 洗滌:操作同5。


9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘. 


10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。


11. 測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。

Adipose Triglyceride Lipase脂肪甘油三酯脂酶抗體

phospho-AMPK alpha-1 (Thr172)磷酸化腺苷單磷酸活化蛋白激酶α1抗體

Amphiregulin雙調(diào)蛋白(結(jié)腸直腸細(xì)胞源性生長因子)抗體

phospho-AQP2(Ser264)磷酸化水通道蛋白2抗體

AXL粘附相關(guān)激酶抗體

phospho-AXL (Tyr698+Tyr702+Tyr703)磷酸化粘附相關(guān)激酶抗體

phospho-AKT1 + AKT2 + AKT3 (Thr308+Thr309+Thr305)磷酸化蛋白激酶B抗體

phospho-AQP2(Ser269)磷酸化水通道蛋白2抗體

phospho-Amyloid Precursor Protein (Thr743)磷酸化APP淀粉樣肽前體蛋白抗體

phospho-AKT1(Ser129)磷酸化蛋白激酶B抗體

phospho-Amyloid Precursor Protein (Ser198)磷酸化APP淀粉樣肽前體蛋白抗體

phospho-ATF4 (Ser245)磷酸化活化轉(zhuǎn)錄因子4抗體

phospho-Androgen Receptor (Ser213)磷酸化雄激素受體抗體

phospho-Androgen Receptor (Ser650)磷酸化雄激素受體抗體

phospho-AKT1+2+3 (Tyr315+316+312) 磷酸化蛋白激酶AKT1,2,3抗體

phospho-AKT1(Thr34)磷酸化蛋白激酶B抗體

phospho-ATF2(Ser472)磷酸化活化復(fù)制因子2抗體

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