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小鼠小腸黏膜上皮細(xì)胞

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
貨號(hào) YS-01X7181 主要用途 僅供科研研究實(shí)驗(yàn)
小鼠小腸黏膜上皮細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品:粘蛋白19抗體 鋅指蛋白781抗體 P53應(yīng)答基因蛋白5抗體 小鼠心臟微血管內(nèi)皮細(xì)胞 大鼠海馬神經(jīng)元細(xì)胞 SK-MEL-28人黑素瘤細(xì)胞 HCC1937 人乳腺癌細(xì)胞

詳細(xì)介紹

小鼠小腸黏膜上皮細(xì)胞

小鼠小腸黏膜上皮細(xì)胞

商品屬性:

組織來(lái)源

產(chǎn)品規(guī)格

細(xì)胞形態(tài)

貨號(hào)

小腸組織

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

上皮細(xì)胞樣

YS-01X7181

細(xì)胞簡(jiǎn)介:

小鼠小腸黏膜上皮分離自小腸組織;小腸位于腹中,上端接幽門與胃相通,下端通過(guò)闌門與大腸相連,是食物消化吸收的主要場(chǎng)所。小腸盤曲于腹腔內(nèi),上連胃幽門,下接盲腸,分為十二指腸、空腸和回腸三部分。小腸內(nèi)消化是至關(guān)重要的,因?yàn)槭澄锝?jīng)過(guò)小腸內(nèi)胰液、膽汁和小腸液的化學(xué)性消化及小腸運(yùn)動(dòng)的機(jī)械性消化后,基本上完成了消化過(guò)程,同時(shí)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)被小腸粘膜吸收了。小腸管壁由粘膜、粘膜下層、肌層和漿膜構(gòu)成。其結(jié)構(gòu)特點(diǎn)是管壁有環(huán)形皺襞,粘膜有許多絨毛,絨毛根部的上皮下陷至固有層,形成管狀的腸腺,其開口位于絨毛根部之間。絨毛和腸腺與小腸的消化和吸收功能關(guān)系密切;構(gòu)成腸腺的細(xì)胞有柱狀細(xì)胞、杯狀細(xì)胞、潘氏細(xì)胞和未分化細(xì)胞。柱狀細(xì)胞和內(nèi)分泌細(xì)胞與絨毛上皮相似,接近絨毛的柱狀細(xì)胞與吸收細(xì)胞相似,絨毛深部的柱狀細(xì)胞微絨毛少而短,不形成紋狀緣。小腸有三種功能即消化、吸收和分泌及運(yùn)動(dòng)功能,其中以吸收和分泌功能為主。平滑肌細(xì)胞的收縮是負(fù)責(zé)腸蠕動(dòng)的動(dòng)力,促使食物向下運(yùn)動(dòng)。腸黏膜上皮細(xì)胞是機(jī)體內(nèi)外環(huán)境的重要屏障,持續(xù)暴露于大量抗原中,也是機(jī)體面對(duì)病原微生物的道防線。因此,腸黏膜上皮細(xì)胞除有吸收、分泌和轉(zhuǎn)運(yùn)等重要生理功能之外,在黏膜先天性和獲得性免疫防御機(jī)制中也起著重要作用。腸黏膜上皮細(xì)胞作為首先接觸抗原的細(xì)胞,在黏膜免疫反應(yīng)的起始階段發(fā)揮關(guān)鍵作用,它決定黏膜免疫反應(yīng)的發(fā)生、性質(zhì)和強(qiáng)度。

方法簡(jiǎn)介:

公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠小腸黏膜上皮采用先機(jī)械分離法、后膠原酶消化法并通過(guò)上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測(cè):

公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠小腸黏膜上皮經(jīng)Cytokeratin-18免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)信息:

包被條件 鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2

培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin

換液頻率 每2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣

傳代特性 可傳1-2

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%

小鼠小腸黏膜上皮細(xì)胞

細(xì)胞傳代及凍存:

細(xì)胞傳代步驟細(xì)胞凍存步驟
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細(xì)胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:

  ① 組織塊培養(yǎng)法

  組織塊培養(yǎng)是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng)。

 ?、?消化培養(yǎng)法

 ?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法

  對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞,如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無(wú)需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

  ④器官培養(yǎng)

  器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性,可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。

小鼠小腸黏膜上皮細(xì)胞


公司正在出售的產(chǎn)品:

(羥甲基)基鹽酸鹽   100g

is,Hydrochloride   500g

曲拉通X-100   100ml

itonX-100   250ml

豚鼠免疫球蛋白E(IgE)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human cytotoxin associated protein A (CagA) ELISA Kit 人細(xì)胞毒素相關(guān)蛋白A(CagA)試劑盒

Humanai-cardiolipinaibodyIgM,ACA-IgMELISAKit 人抗心0脂抗體IgM(ACA-IgM)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

Humancaneouslymphocyte-associatedaigen,CLA試劑盒人皮膚淋巴細(xì)胞相關(guān)抗原(CLA)試劑盒規(guī)格:96T/48T

組織EPHB3激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20

humanprogestinandadipoQreceptorfamilymember,PAQR7ELISAKit人孕同和adipoQ受體家族成員Ⅶ(PAQR7)試劑盒規(guī)格:96T/48T

8號(hào)染色體開放閱讀框74抗體

β淀粉樣肽(1-42)抗體

DLL1重組大鼠 DLL1 / Delta-like Protein 1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

CRF (Corticotropin-Releasing Factor 0.5mgCRF (Corticotropin-Releasing Factor) 促腎上腺皮質(zhì)激素釋放因子

AGO3重組人 AGO3 / Argonaute 3 / EIF2C3 蛋白 Protein

IL17RC Protein Human 重組人 IL17RC 蛋白 (aa 1-454, His 標(biāo)簽)

EPOR Protein Mouse 重組小鼠 EPOR 蛋白

CRF (Corticotropin-Releasing Factor 0.5mgCRF (Corticotropin-Releasing Factor) 促腎上腺皮質(zhì)激素釋放因子

IL17RC Protein Human 重組人 IL17RC 蛋白 (aa 1-454, His 標(biāo)簽)

DLL1重組大鼠 DLL1 / Delta-like Protein 1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

EPOR Protein Mouse 重組小鼠 EPOR 蛋白

AGO3重組人 AGO3 / Argonaute 3 / EIF2C3 蛋白 Protein

小鼠小腸黏膜上皮細(xì)胞大鼠蛋白激酶抑制因子γ(PKIγ)試劑盒 ,英文名: PKIγ ELISA Kit

L phenylalanine ammonia lyase (PAL) ELISA Kit L苯解氨酶(PAL)試劑盒

RatIerleukin5,IL-5ELISAKIT 大鼠白介素5(IL-5)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforCyclin-D3ELISAKit大鼠細(xì)胞周期素D3

細(xì)胞色素P450亞酶CYP2C19(CEC)活性熒光定量試劑盒20

RatFibronectin,FNELISAKit大鼠纖連蛋白(FN)試劑盒規(guī)格:96T/48T

原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件:

  一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)

  1、細(xì)胞要通過(guò)充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;

  2、細(xì)胞接種時(shí)濃度要稍大一些,至少為5×108細(xì)胞/L;

  3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);

  4、 胎牛血清濃度為10%-80%

  5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

  6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,漂??;

  7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應(yīng)將原代細(xì)胞換液;

  8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時(shí),應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。

  二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)

  1、原代培養(yǎng)時(shí)要盡量去除紅細(xì)胞;

  2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行;

  3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進(jìn)行分瓶試驗(yàn);

  4、長(zhǎng)期培養(yǎng)時(shí),淋巴細(xì)胞中要加入生長(zhǎng)因子,白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,以利細(xì)胞生長(zhǎng);

  5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次;

  6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行


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