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小鼠肺小動脈內(nèi)皮細(xì)胞

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25
貨號 YS-01X8494 主要用途 僅供科研研究實(shí)驗(yàn)
小鼠肺小動脈內(nèi)皮細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品:肌微管蛋白MTMR13抗體 Fascin 2蛋白抗體 NCI-H1417 [H1417]人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞 剪切和多聚腺苷酸化特異性因子5抗體 COLO-60H人結(jié)腸癌細(xì)胞 酸性核糖體磷蛋白P2抗體 PK-59人胰腺癌細(xì)胞 大鼠鞏膜成纖維細(xì)胞

詳細(xì)介紹

小鼠肺小動脈內(nèi)皮細(xì)胞

小鼠肺小動脈內(nèi)皮細(xì)胞

商品屬性:

組織來源

產(chǎn)品規(guī)格

細(xì)胞形態(tài)

貨號

肺小動脈

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

內(nèi)皮細(xì)胞樣

YS-01X8494

細(xì)胞簡介:

小鼠肺小動脈內(nèi)皮分離自肺小動脈組織;肺動脈干是短而粗的動脈,自右心室的動脈圓錐起始,向左后上方斜升,先在升主動脈根部的前面,繼而至其左側(cè),至主動脈弓的下方,約在第5胸椎高度,分為左、右肺動脈。左肺動脈較短,橫行向左,經(jīng)左主支氣管前方至左肺門,分兩支進(jìn)入左肺的上、下葉。右肺動脈較長,橫行向右,經(jīng)主動脈升部和上腔靜脈的后方達(dá)右肺門,分3支進(jìn)入右肺上、中、下葉。左、右肺動脈的各分支在肺實(shí)質(zhì)內(nèi)又反復(fù)分支,與支氣管的分支伴行,后達(dá)肺泡壁,形成稠密的毛細(xì)血管網(wǎng)。肺動脈輸送的是含二氧化碳較多的靜脈血。在肺動脈干分叉處稍左側(cè)與主動脈弓下緣之間有一結(jié)締組織索,稱動脈韌帶。管徑在0.31mm之間,為小動脈(small-artery),小動脈包括粗細(xì)不等的幾級分支,也屬肌性動脈。較大的小動脈,內(nèi)膜有明顯的內(nèi)彈性膜,中膜有幾層平滑肌,外膜厚度與中膜相近,一般沒有外彈性膜。口徑在1mm以下的動脈,管壁有完整的平滑肌層及少量的彈性纖維和膠質(zhì)纖維。小動脈是決定周圍循環(huán)阻力大小的主要因素,也是調(diào)節(jié)微循環(huán)灌注量的“總開關(guān)"。典型的小動脈,其管壁的厚度與管徑相比約為12。中膜的肌層相對比其他動脈為厚,當(dāng)平滑肌在神經(jīng)支配下強(qiáng)力收縮時(shí),其管腔可以閉塞,而使血液不能流入它所分布的毛細(xì)血管內(nèi),從而增加了周圍血液循環(huán)的阻力。如果有許多小動脈同時(shí)收縮,可使血壓顯著上升。反之,當(dāng)小動脈的平滑肌舒張時(shí),則可使大量的血液流入毛細(xì)血管,外周阻力明顯下降,血壓降低。終末小動脈(terminal arteri-ole)的口徑為2030μm;后小動脈(metar-teriole),又稱毛細(xì)血管前小動脈(precapil-lary arteriole)的口徑為1215μm。管壁內(nèi)均有較稀疏的平滑肌,在毛細(xì)血管前小動脈分支的起始部分,管壁平滑肌成分增厚,叫做毛細(xì)血管前括約肌(precapillary sphinc-ter),其收縮或舒張,可調(diào)節(jié)真毛細(xì)血管的血流量,是調(diào)節(jié)微循環(huán)灌注量的“分開關(guān)"。支配小動脈平滑肌的交感神經(jīng)纖維,可延伸到終末小動脈和后小動脈的平滑肌細(xì)胞。在毛細(xì)血管前括約肌上交感神經(jīng)纖維特別豐富。肺小動脈內(nèi)皮細(xì)胞呈單層多角形鋪路石狀分布,該細(xì)胞在維持血管內(nèi)外的動態(tài)平衡、合成和分泌細(xì)胞因子和介質(zhì)、維持凝血和纖溶的動態(tài)平衡中起重要作用。

原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件:

  一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)

  1、細(xì)胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;

  2、細(xì)胞接種時(shí)濃度要稍大一些,至少為5×108細(xì)胞/L;

  3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);

  4、 胎牛血清濃度為10%-80%

  5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

  6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,漂?。?/p>

  7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應(yīng)將原代細(xì)胞換液;

  8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時(shí),應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。

  二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)

  1、原代培養(yǎng)時(shí)要盡量去除紅細(xì)胞;

  2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行;

  3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進(jìn)行分瓶試驗(yàn);

  4、長期培養(yǎng)時(shí),淋巴細(xì)胞中要加入生長因子,白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,以利細(xì)胞生長;

  5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次;

  6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行。

方法簡介:

實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠肺小動脈內(nèi)皮采用-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法、并通過內(nèi)皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測:

實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠肺小動脈內(nèi)皮經(jīng)CD31免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)信息:

包被條件:PLL0.1mg/ml),明膠(0.1%

培養(yǎng)基:基礎(chǔ)培養(yǎng)基,含FBS、EGF、bFGFIGF、VEGFHeparin、Hydrocortisone、Penicillin、Streptomycin

換液頻率:每2-3天換液一次

生長特性:貼壁

細(xì)胞形態(tài):內(nèi)皮細(xì)胞樣

傳代特性:可傳1-3

消化液:0.25%

培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;CO25%

小鼠肺小動脈內(nèi)皮體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。

小鼠肺小動脈內(nèi)皮細(xì)胞

細(xì)胞傳代及凍存:

細(xì)胞傳代步驟細(xì)胞凍存步驟
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細(xì)胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標(biāo)識。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:

  ① 組織塊培養(yǎng)法

  組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長。

 ?、?消化培養(yǎng)法

 ?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法

  對于懸浮生長的細(xì)胞,如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

 ?、芷鞴倥囵B(yǎng)

  器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。

小鼠肺小動脈內(nèi)皮細(xì)胞


公司正在出售的產(chǎn)品:

蔗糖測定試劑盒(紫外比色法)

γ-谷酰半胱酸合成酶(γ-GCS)測定試劑盒(速率法)

超微量ATP酶測試盒(Na+K+、Ca2+Mg2+、TATP酶)

總巰基(-SH)測定試劑盒

MAP激酶相互作用絲/蘇激酶1抗體

FBXL18蛋白抗體

ICOSLG重組小鼠 ICOS Ligand / B7-H2 / ICOSLG 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽) Protein

chloramphenicol/OVA 氯偶聯(lián)雞卵白蛋白蛋白 2mgchloramphenicol/OVA 氯偶聯(lián)雞卵白蛋白蛋白

GAPDH重組人 GAPDH 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

ACOX1 Protein Human 重組人 ACOX1 / aox 蛋白 (His 標(biāo)簽)

LDLR Protein Mouse 重組小鼠 LDLR / LDL Recepto僀?僀

chloramphenicol/OVA 氯偶聯(lián)雞卵白蛋白蛋白 2mgchloramphenicol/OVA 氯偶聯(lián)雞卵白蛋白蛋白

ACOX1 Protein Human 重組人 ACOX1 / aox 蛋白 (His 標(biāo)簽)

ICOSLG重組小鼠 ICOS Ligand / B7-H2 / ICOSLG 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽) Protein

LDLR Protein Mouse 重組小鼠 LDLR / LDL Receptor 蛋白 (His 標(biāo)簽)

GAPDH重組人 GAPDH 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

植物鈣調(diào)素(CAM)ELISA 試劑盒

Human ai nuclear factor aibody (ANF) ELISA Kit 人抗核因子抗體(ANF)試劑盒

Porcineadiponectin,ADPELISAKit 豬脂聯(lián)素(ADP)試劑盒分裝

CLIAKitforADV-IgM(HumanAdenovirusIgM)ELISAKit人腺病毒IgM

血液氧化應(yīng)激活性氧(ROS)魯米諾化學(xué)發(fā)光法定量試劑盒50

MouseStemcellfactor/mastcellgrowthfactor,SCF/MGFELISAKit小鼠干細(xì)胞因子/肥大細(xì)胞生長因子(SCF/MGF)試劑盒

小鼠肺小動脈內(nèi)皮細(xì)胞大鼠鈣/鈣調(diào)蛋白依賴性蛋白激酶Ⅱα(CAMK2α)試劑盒 ,英文名: CAMK2α ELISA Kit

Rat beta amyloid (A beta 1-40 1-40) ELISA Kit 大鼠β淀粉樣蛋白1-40(Aβ1-40)試劑盒

RatTumornecrosisfactorα,TNF-αELISAKIT 大鼠腫瘤壞死因子α(TNF-α)試劑盒分裝

CLIAKitforDSIP(Humandeltasleep-inducingpeptide)ELISAKit人促睡眠肽

細(xì)胞培養(yǎng)液抗壞血酸比色法定量試劑盒20

RatHistoneDeacetylase,HDELISAKit大鼠組織蛋白去乙?;?span>(HD)試劑盒


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