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兔外周血單核細(xì)胞

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25
貨號(hào) YS-01X8442 主要用途 僅供科研研究實(shí)驗(yàn)
兔外周血單核細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品:大鼠角膜基質(zhì)細(xì)胞 TALL-1人急性T細(xì)胞白血病細(xì)胞 SLU7蛋白抗體 M14 (人黑色素瘤細(xì)胞) 跨膜蛋白93抗體 正常胎兒肺纖維細(xì)胞 RSPO2蛋白抗體 G蛋白偶聯(lián)受體171抗體

詳細(xì)介紹

兔外周血單核細(xì)胞

兔外周血單核細(xì)胞

商品屬性:

組織來源

產(chǎn)品規(guī)格

細(xì)胞形態(tài)

貨號(hào)

外周血

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

圓形、巨噬細(xì)胞樣

YS-01X8442

細(xì)胞簡(jiǎn)介:

兔外周血單核分離自外周血;外周血是除骨髓之外的血液,臨床上常用一些方法把骨髓中的造血干細(xì)胞釋放到血液中,再在從血液中提取分離得到造血干細(xì)胞,我們把這樣得到的干細(xì)胞稱為外周血干細(xì)胞,在二十一世紀(jì)初人類開始的生命方舟計(jì)劃中提出外周血這一新概念。單核細(xì)胞起源于骨髓中的造血干細(xì)胞,并在骨髓中發(fā)育。當(dāng)它們從骨髓進(jìn)入血液時(shí)仍然是尚未成熟的細(xì)胞。與其他血細(xì)胞比較,單核細(xì)胞內(nèi)含有更多的非特異性脂酶,并且具有更強(qiáng)的吞噬作用。單核細(xì)胞在血液中停留2-3天后遷移到周圍組織中,細(xì)胞體積繼續(xù)增大,直徑可達(dá)50-80μm,細(xì)胞內(nèi)所含的溶酶體顆粒和線粒體的數(shù)目也增多,成為成熟的細(xì)胞。固定在組織中的單核細(xì)胞稱為組織巨噬細(xì)胞,它們經(jīng)常大量存在于淋巴結(jié)、肺泡壁、骨髓、肝和脾等器官。激活了的單核細(xì)胞和組織巨噬細(xì)胞能生成并釋放多種細(xì)胞毒、干擾素和白細(xì)胞介素,參與機(jī)體防衛(wèi)機(jī)制,還產(chǎn)生一些能促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞和平滑肌細(xì)胞生長(zhǎng)的因子。在炎癥周圍單核細(xì)胞能進(jìn)行細(xì)胞分裂,并包圍異物。

方法簡(jiǎn)介:

實(shí)驗(yàn)室分離的兔外周血單核采用密度梯度離心法結(jié)合差速貼壁法制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測(cè):

實(shí)驗(yàn)室分離的兔外周血單核經(jīng)CD14免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基:含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin

換液頻率:每2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性:半貼壁半懸浮

細(xì)胞形態(tài):圓形、巨噬細(xì)胞樣

傳代特性:不增殖;不傳代

消化液:0.25%

培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%

兔外周血單核體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的專用生長(zhǎng)培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。

兔外周血單核細(xì)胞

細(xì)胞傳代及凍存:

細(xì)胞傳代步驟細(xì)胞凍存步驟
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細(xì)胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:

  ① 組織塊培養(yǎng)法

  組織塊培養(yǎng)是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng)。

  ② 消化培養(yǎng)法

 ?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法

  對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞,如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

 ?、芷鞴倥囵B(yǎng)

  器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性,可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。

兔外周血單核細(xì)胞


公司正在出售的產(chǎn)品:

兔子髓0脂堿性蛋白(MBP)ELISAKit   ELISA

兔子前列腺素E2(PGE2)ELISAKit   ELISA

兔子前列腺素E1(PGE1)ELISAKit   ELISA

兔子皮質(zhì)/上腺(CO)ELISAKit   ELISA

同源盒蛋白GSC抗體

COX4NB蛋白抗體

TNFRSF14重組小鼠 HVEM / TNFRSF14 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽) Protein

Camk1g(Calcium/calmodulin dependent protein kinase IG 0.5mgCamk1g(Calcium/calmodulin dependent protein kinase IG) /鈣調(diào)蛋白依賴蛋白激酶IG抗原

CYB5R1重組人 CYB5R1 蛋白 Protein

GALK1 Protein Human 重組人 GALK1 / Galactokin僀?僀

Camk1g(Calcium/calmodulin dependent protein kinase IG 0.5mgCamk1g(Calcium/calmodulin dependent protein kinase IG) /鈣調(diào)蛋白依賴蛋白激酶IG抗原

GALK1 Protein Human 重組人 GALK1 / Galactokinase / Galactose kinase 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽)

TNFRSF14重組小鼠 HVEM / TNFRSF14 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽) Protein

SIRPA Protein Rat 重組大鼠 SIRP alpha / CD172a 蛋白

CYB5R1重組人 CYB5R1 蛋白 Protein

小鼠白血病抑制因子受體(LIFR)ELISA pcr檢測(cè)試劑盒

Human homocysteic acid (Hcy) ELISA Kit 人同型半胱(Hcy)試劑盒

Humanapoptosissignalregulatingkinase1,ASK-1ELISAKit 人凋亡信號(hào)調(diào)節(jié)激酶I(ASK-1)pcr檢測(cè)試劑盒分裝

HumanBullousPemphigoid,BP試劑盒人大皰性類天皰瘡抗體(BP)試劑盒規(guī)格:96T/48T

植物組織葉綠體DNA萃取試劑盒10/20

HumansolubleTumorNecrosisFactorαreceptor,sTNFαRELISAKit人可溶性壞死因子α受體(sTNFαR)試劑盒規(guī)格:96T/48T

兔外周血單核細(xì)胞大鼠纖調(diào)蛋白(FMOD)試劑盒 ,英文名: FMOD ELISA Kit

Mouse chorionic gonadoopin beta (-CG beta) ELISA Kit 小鼠絨毛膜β(β-CG)試劑盒

Mouseiestinalfattyacidbindingprotein,iFABPELISAKit 小鼠腸脂肪酸結(jié)合蛋白(iFABP)pcr檢測(cè)試劑盒分裝

CLIAKitforHTLV-I(Huma-lymphoopicvirusI)ELISAKit人類嗜T淋巴細(xì)胞Ⅰ型病毒

細(xì)胞HSV1(HERPESSIMPLX1)病毒定性試劑盒20

ELISAKitBTA大鼠膀胱腫瘤抗原

原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件:

  一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)

  1、細(xì)胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;

  2、細(xì)胞接種時(shí)濃度要稍大一些,至少為5×108細(xì)胞/L;

  3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);

  4、 胎牛血清濃度為10%-80%

  5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

  6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,漂?。?/p>

  7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應(yīng)將原代細(xì)胞換液;

  8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時(shí),應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。

  二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)

  1、原代培養(yǎng)時(shí)要盡量去除紅細(xì)胞;

  2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行;

  3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進(jìn)行分瓶試驗(yàn);

  4、長(zhǎng)期培養(yǎng)時(shí),淋巴細(xì)胞中要加入生長(zhǎng)因子,白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,以利細(xì)胞生長(zhǎng);

  5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次;

  6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行


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