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詳細(xì)介紹
商品屬性：
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細(xì)胞形態(tài) | 貨號 |
卵巢 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 上皮細(xì)胞樣 | YS-01X8389 |
細(xì)胞簡介：
兔卵泡顆粒（卵巢顆粒細(xì)胞）分離自卵巢組織；卵巢是雌性動物的生殖器官，卵巢的功能是產(chǎn)生卵以及類固醇激素。卵巢的位置與睪丸相同，僅左側(cè)發(fā)育（右側(cè)已退化），呈葡萄狀，均為處于不同發(fā)育時(shí)期的卵泡，卵泡呈黃色，卵巢表面密布血管。卵巢的大小與年齡和產(chǎn)卵期有關(guān)。大多數(shù)脊椎動物有兩個卵巢，但是部分魚類的兩個卵巢融合為單個結(jié)構(gòu)，而所有鳥類只有左側(cè)卵巢有機(jī)能。卵巢是位于子宮兩側(cè)的一對卵圓形的生殖器官，它的外表有一層上皮組織，其下方有薄層的結(jié)締組織。卵巢的內(nèi)部結(jié)構(gòu)可分為皮質(zhì)和髓質(zhì)。皮質(zhì)位于卵巢的周圍部分，主要由卵泡和結(jié)締組織構(gòu)成；髓質(zhì)位于中央，由疏松結(jié)締組織構(gòu)成，其中有許多血管、淋巴管和神經(jīng)。卵巢顆粒細(xì)胞是卵巢的主要功能細(xì)胞，其增殖與分化直接影響著卵泡的生長啟動、發(fā)育、排卵、黃體形成以及甾體激素分泌等卵巢功能活動。卵巢顆粒細(xì)胞是卵泡內(nèi)的大細(xì)胞群，也是主要的功能細(xì)胞，卵泡發(fā)育的顯著標(biāo)志之一就是顆粒細(xì)胞迅速生長及增殖，而成年動物的卵泡閉鎖主要是由顆粒細(xì)胞凋亡引起，尤其在卵泡發(fā)育后期，此外，顆粒細(xì)胞還與卵泡膜細(xì)胞共同完成卵巢激素的合成，維持著有利于卵母細(xì)胞生長和成熟的微環(huán)境。細(xì)胞形狀呈圓形或橢圓形。
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件：
一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細(xì)胞要通過充分漂洗，以盡量除去消化液的毒性；
2、細(xì)胞接種時(shí)濃度要稍大一些，至少為5×108細(xì)胞/L；
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng)；
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
6、在起始的2天中盡量減少振蕩，以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落，漂??；
7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀，應(yīng)將原代細(xì)胞換液；
8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時(shí)要盡量去除紅細(xì)胞；
2、短期培養(yǎng)，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行；
3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi)，進(jìn)行分瓶試驗(yàn)；
4、長期培養(yǎng)時(shí)，淋巴細(xì)胞中要加入生長因子，白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清，以利細(xì)胞生長；
5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次；
6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行。
方法簡介：
實(shí)驗(yàn)室分離的兔卵泡顆粒采用先機(jī)械分離，而后膠原酶消化，后差速貼壁法制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測：
實(shí)驗(yàn)室分離的兔卵泡顆粒經(jīng)FSHR免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息：
包被條件：PLL（0.1mg/ml）
培養(yǎng)基：含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長特性：貼壁
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
傳代特性：可傳1-2代
消化液：0.25%
培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%
兔卵泡顆粒體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。
細(xì)胞傳代及凍存：
| 細(xì)胞傳代步驟 | 細(xì)胞凍存步驟 |
| 如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例； 1．細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細(xì)胞變圓脫落后，加入2ml培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中，注意凍存管做好標(biāo)識。本公司按每個凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個細(xì)胞凍存。3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種：
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長。
?、?消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細(xì)胞，如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
④器官培養(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品：
豚鼠免疫球蛋白G1試劑盒 豚鼠免疫球蛋白G1試劑盒 豚鼠免疫球蛋白G1試劑盒，，來源：試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：豚鼠免疫球蛋白G1試劑盒、豚鼠免疫球蛋白G1eisa試劑盒
豚鼠免疫球蛋白E試劑盒 豚鼠免疫球蛋白E試劑盒 豚鼠免疫球蛋白E試劑盒，，來源：試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：豚鼠免疫球蛋白E試劑盒、豚鼠免疫球蛋白Eeisa試劑盒
豚鼠晚期糖基化終末產(chǎn)物試劑盒 豚鼠晚期糖基化終末產(chǎn)物試劑盒 豚鼠晚期糖基化終末產(chǎn)物試劑盒，，來源：試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：豚鼠晚期糖基化終末產(chǎn)物試劑盒、豚鼠晚期糖基化終末產(chǎn)物eisa試劑盒
豚鼠纖溶酶抗纖溶酶復(fù)合物試劑盒 豚鼠纖溶酶抗纖溶酶復(fù)合物試劑盒 豚鼠纖溶酶抗纖溶酶復(fù)合物試劑盒，，來源：試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：豚鼠纖溶酶抗纖溶酶復(fù)合物試劑盒、豚鼠纖溶酶抗纖溶酶復(fù)合物eisa試劑盒
原鈣粘蛋白β4抗體
RNA結(jié)合蛋白9抗體
ACPP重組小鼠 Prostatic Acid Phosphatase / ACPP 蛋白 Protein
半乳糖凝集素4(GAL4)重組蛋白 Recombinant Galectin 4 (GAL4)
AK4重組人 AK4 / Adenylate Kinase 4 / AK3L1 蛋白 Protein
FLRT1 Protein Human 重組人 FLRT1 蛋白
IFNGR1 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 IFNGR / IFNGR1 蛋白
AMH/MIS Muellerian抑制因子抗原 1mgAMH/MIS Muellerian抑制因子抗原
FLRT1 Protein Human 重組人 FLRT1 蛋白
LY9重組小鼠 LY9 / CD229 / SLAMF3 蛋白 Protein
HEPACAM2 Protein Rat 重組大鼠 HepaCAM2 蛋白
ANGPTL4重組人 ANGPTL4 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
小鼠釋放激素(GH)ELISA pcr檢測試劑盒
Rat calf iestine alkaline phosphatase (CIAP) ELISA Kit 大鼠牛小腸堿性0酸酶(CIAP)試劑盒
HumanSerumamyloidA,SAAELISAKit 人血清淀粉樣蛋白A(SAA)pcr檢測試劑盒分裝
Humanbasicfibroblastgrowthfactor,bFGF試劑盒人堿性成纖維細(xì)胞生長因子(bFGF)試劑盒規(guī)格：96T/48T
植物質(zhì)粒菌化試劑盒20次
HumaerminalcomplemecomplexC5b-9,TCCC5b-9ELISAKit人末端補(bǔ)體復(fù)合物C5b-9(TCCC5b-9)試劑盒規(guī)格：96T/48T
兔卵泡顆粒細(xì)胞大鼠斯鈣素1(STC1)試劑盒 ，英文名： STC1 ELISA Kit
Mouse deoxypyridinoline / deoxypyridinoline (DPD) ELISA Kit 小鼠脫氧酚/脫氧啉(DPD)試劑盒
ratNoradrenaline,NAELISAKit 大鼠去甲(NA)pcr檢測試劑盒分裝
CLIAKitforHIF-1Alpha(Mousehypoxia-induciblefactor1Alpha)ELISAKit小鼠低氧誘導(dǎo)因子1α
細(xì)胞RSK1激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次
ELISAKit26SPSM大鼠26S蛋白酶體
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