兔角膜成纖維細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品：MS4A4E蛋白抗體 乳腺癌抵抗標(biāo)記蛋白1抗體 NCI-H1930人小細(xì)胞肺癌 核受體蛋白NR2E3抗體 HDLM-2人霍奇金淋巴瘤細(xì)胞 原鈣粘蛋白γC5抗體 RKN人卵巢癌細(xì)胞 大鼠肺動(dòng)脈成纖維細(xì)胞

兔角膜成纖維細(xì)胞

商品屬性：

細(xì)胞簡介：

兔角膜成纖維分離自眼角膜組織；角膜位于眼球前壁的一層透明膜，約占纖維膜的前1/6，從后面看角膜呈正圓形，從前面看為橫橢圓形。角膜厚度各部分不盡相同，中央部薄。角膜有十分敏感的神經(jīng)末梢，如有外物接觸角膜，眼瞼便會不由自主地合上以保護(hù)眼睛。為了保持透明，角膜并沒有血管，透過外界空氣、淚液及房水獲取養(yǎng)份及氧氣。角膜分為五層，由前向后依次為：上皮細(xì)胞層、前彈力層、基質(zhì)層、后彈力層、內(nèi)皮細(xì)胞層。成纖維細(xì)胞（Fibroblast）是疏松結(jié)締組織的主要細(xì)胞成分，由胚胎時(shí)期的間充質(zhì)細(xì)胞分化而來。成纖維細(xì)胞較大，輪廓清楚，多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu)，其細(xì)胞核呈規(guī)則的卵圓形，核仁大而明顯。成纖維細(xì)胞功能活動(dòng)旺盛，細(xì)胞質(zhì)嗜弱堿性，具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動(dòng)，在一定條件下，它可以實(shí)現(xiàn)跟纖維細(xì)胞的互相轉(zhuǎn)化；成纖維細(xì)胞對不同程度的細(xì)胞變性、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用。剛分離的角膜成纖維細(xì)胞呈圓形、折光性良好，懸浮于培養(yǎng)基中。30min細(xì)胞貼壁，其中部分開始伸出偽足，表現(xiàn)為小的突起；6h后細(xì)胞基本貼壁，伸展成梭形，胞核清晰，分布較均勻，散在生長，不聚集成團(tuán)；細(xì)胞生長迅速，5-7天即呈融合狀態(tài)，細(xì)胞排列緊密，有的交叉重疊生長，平坦、胞體較大，細(xì)胞質(zhì)透明，細(xì)胞核較大，呈橢圓形，顏色淡。細(xì)胞融合，并彼此連接成網(wǎng)狀；細(xì)胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。角膜成纖維細(xì)胞在生理?xiàng)l件下的主要功能包括：構(gòu)造和維持角膜的正常形態(tài)，合成和釋放細(xì)胞外基質(zhì)以及組織損傷后及時(shí)大量聚集修復(fù)損傷組織。

方法簡介：

實(shí)驗(yàn)室分離的兔角膜成纖維采用-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測：

實(shí)驗(yàn)室分離的兔角膜成纖維經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基：含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率：每2-3天換液一次

生長特性：貼壁

細(xì)胞形態(tài)：成纖維細(xì)胞樣

傳代特性：可傳5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)佳

消化液：0.25%

培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%

兔角膜成纖維體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。

細(xì)胞傳代及凍存：

原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種：

　　① 組織塊培養(yǎng)法

　　組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長。

　?、?消化培養(yǎng)法

　?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法

　　對于懸浮生長的細(xì)胞，如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

　　④器官培養(yǎng)

　　器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。

公司正在出售的產(chǎn)品：

豬血管生成素2(ANG-2)試劑盒   組裝/原裝

豬血管生成素1(ANG-1)試劑盒   組裝/原裝

豬血管內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1(VCAM-1/CD106)試劑盒   組裝/原裝

豬血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子A（VEGF-A）試劑盒   組裝/原裝

G蛋白信號轉(zhuǎn)導(dǎo)調(diào)節(jié)因子8抗體

微管蛋白聚合促進(jìn)蛋白24

VTN重組小鼠 Vitronectin / VTN 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

Ag-ARC(ARG3.1/ARC, Activity-regulated cytoskeleton-associated protein 0.5mgAg-ARC(ARG3.1/ARC, Activity-regulated cytoskeleton-associated protein) ARC(多肽抗原)

TLR4重組人 TLR4 / CD284 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

BCL2L2 Prote僀?僀

Ag-ARC(ARG3.1/ARC, Activity-regulated cytoskeleton-associated protein 0.5mgAg-ARC(ARG3.1/ARC, Activity-regulated cytoskeleton-associated protein) ARC(多肽抗原)

BCL2L2 Protein Human 重組人 BCL-W / BCL2L2 蛋白 (His 標(biāo)簽)

VTN重組小鼠 Vitronectin / VTN 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

ERBB3 Protein Rat 重組大鼠 HER3 / ErbB3 蛋白

TLR4重組人 TLR4 / CD284 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

豬細(xì)胞色素氧化酶(CC0)試劑盒

Human maix metalloproteinase 3 (MMP-3) ELISA Kit 人基質(zhì)金屬蛋白酶3(MMP-3)試劑盒

RabbitBcl-2AssaciatedXprotein,BAXELISAKit 兔Bcl-2相關(guān)X蛋白(BAX)試劑盒分裝

CLIAKitforai-CMVIgG(Humanai-cytomegalovirusIgGaibody,ai-CMVIgG)ELISAKit人抗巨細(xì)胞病毒抗體IgG

血液α-活性CNPG3比色法定量試劑盒50次

PorcineHeatShockProtein20,HSP-20ELISAKit豬熱休克蛋白20(HSP-20)試劑盒

兔角膜成纖維細(xì)胞大鼠環(huán)0腺苷(cAMP)試劑盒 ，英文名： cAMP ELISA Kit

Rabbit maix metalloproteinase 1 (MMP-1) ELISA Kit 兔基質(zhì)金屬蛋白酶1(MMP-1)試劑盒

腦膜奈瑟菌W135群(NM- W135)核酸試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T

CLIAKitforMouseLactateDehydrogenase,LDHELISAKit小鼠乳酸脫氫酶

體液過氧化氫(HYDROGENPEROXIDE)活性熒光定量試劑盒20次

ELISAKit2,3-dinor-TXB2人2,3Dinor血栓烷B2

原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件：

　　一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)

　　1、細(xì)胞要通過充分漂洗，以盡量除去消化液的毒性；

　　2、細(xì)胞接種時(shí)濃度要稍大一些，至少為5×108細(xì)胞/L；

　　3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng)；

　　4、 胎牛血清濃度為10%-80%

　　5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

　　6、在起始的2天中盡量減少振蕩，以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落，漂?。?/p>

　　7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀，應(yīng)將原代細(xì)胞換液；

　　8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。

　　二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)

　　1、原代培養(yǎng)時(shí)要盡量去除紅細(xì)胞；

　　2、短期培養(yǎng)，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行；

　　3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi)，進(jìn)行分瓶試驗(yàn)；

　　4、長期培養(yǎng)時(shí)，淋巴細(xì)胞中要加入生長因子，白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清，以利細(xì)胞生長；

　　5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次；

　　6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行