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詳細(xì)介紹
商品屬性：
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細(xì)胞形態(tài) | 貨號(hào) |
膠質(zhì)瘤 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 梭形、多角形 | YS-01X8374 |
細(xì)胞簡(jiǎn)介：
兔膠質(zhì)瘤組織源分離自癌組織；癌（cancer）是指起源于上皮組織的惡性腫瘤，是惡性腫瘤中常見的一類。相對(duì)應(yīng)的，起源于間葉組織的惡性腫瘤統(tǒng)稱為肉瘤。有少數(shù)惡性腫瘤不按上述原則命名，如腎母細(xì)胞瘤、惡性畸胎瘤等。一般人們所說的“癌癥"習(xí)慣上泛指所有惡性腫瘤。癌癥具有細(xì)胞分化和增殖異常、生長(zhǎng)失去控制、浸潤(rùn)性和轉(zhuǎn)移性等生物學(xué)特征，其發(fā)生是一個(gè)多因子、多步驟的復(fù)雜過程，分為致癌、促癌、演進(jìn)三個(gè)過程，與吸煙、感染、職業(yè)暴露、環(huán)境污染、不合理膳食、遺傳因素密切相關(guān)。癌細(xì)胞，是一種變異的細(xì)胞，是產(chǎn)生癌癥的病源。癌細(xì)胞與正常細(xì)胞不同，有無限增殖、可轉(zhuǎn)化和易轉(zhuǎn)移三大特點(diǎn)，能夠無限增殖并破壞正常的細(xì)胞組織。癌細(xì)胞除了分裂失控外（能進(jìn)行多極分裂），還會(huì)局部侵入周圍正常組織甚至經(jīng)由體內(nèi)循環(huán)系統(tǒng)或淋巴系統(tǒng)轉(zhuǎn)移到身體其他部分。分惡性和良性兩種。
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件：
一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細(xì)胞要通過充分漂洗，以盡量除去消化液的毒性；
2、細(xì)胞接種時(shí)濃度要稍大一些，至少為5×108細(xì)胞/L；
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng)；
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
6、在起始的2天中盡量減少振蕩，以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落，漂??；
7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀，應(yīng)將原代細(xì)胞換液；
8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時(shí)要盡量去除紅細(xì)胞；
2、短期培養(yǎng)，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行；
3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi)，進(jìn)行分瓶試驗(yàn)；
4、長(zhǎng)期培養(yǎng)時(shí)，淋巴細(xì)胞中要加入生長(zhǎng)因子，白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清，以利細(xì)胞生長(zhǎng)；
5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次；
6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行。
方法簡(jiǎn)介：
實(shí)驗(yàn)室分離的癌組織源采用膠原酶消化、經(jīng)Percoll離心純化制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè)：
實(shí)驗(yàn)室分離的兔膠質(zhì)瘤組織源經(jīng)檢測(cè)，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基：含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性：貼壁
細(xì)胞形態(tài)：梭形、多角形
傳代特性：可傳3代左右
消化液：0.25%
培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%
兔膠質(zhì)瘤組織源體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長(zhǎng)培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。
細(xì)胞傳代及凍存：
| 細(xì)胞傳代步驟 | 細(xì)胞凍存步驟 |
| 如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例； 1．細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細(xì)胞變圓脫落后，加入2ml培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中，注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種：
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng)。
?、?消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞，如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
④器官培養(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性，可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品：
豚鼠組胺試劑盒 豚鼠組胺試劑盒 豚鼠組胺試劑盒，，來源：試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：豚鼠組胺試劑盒、豚鼠組胺eisa試劑盒
豚鼠轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1試劑盒 豚鼠轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1試劑盒 豚鼠轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1試劑盒，，來源：試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：豚鼠轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1試劑盒、豚鼠轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1eisa試劑盒
豚鼠壞死因子α試劑盒 豚鼠壞死因子α試劑盒 豚鼠壞死因子α試劑盒，，來源：試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：豚鼠壞死因子α試劑盒、豚鼠壞死因子αeisa試劑盒
豚鼠試劑盒 豚鼠試劑盒 豚鼠試劑盒，，來源：試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：豚鼠試劑盒、豚鼠eisa試劑盒
葡萄糖醛酸差向異構(gòu)酶抗體
轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β2（TGFβ2）抗體
ART4重組小鼠 ART4 / CD297 蛋白 Protein
補(bǔ)體成分4a(C4a)重組蛋白 Recombinant Complement Component 4a (C4a)
COX5B重組人 COX5B 蛋白 Protein
FH Protein Human 重組人 Fumarate Hydratase / FH 蛋白
TEK Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 Tie2 / TEK 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
AEG-1 peptide AEG-1抗原 0.5mgAEG-1 peptide AEG-1抗原
FH Protein Human 重組人 Fumarate Hydratase / FH 蛋白
BLMH重組小鼠 BLMH / Bleomycin Hydrolase 蛋白 Protein
CHODL Protein Rat 重組大鼠 CHODL / Chondrolectin 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
FCGR2B重組人 CD32b / FCGR2B 蛋白 Protein
小鼠單核細(xì)胞趨化蛋白2(MCP-2/CCL8)ELISA pcr檢測(cè)試劑盒
Rat coagulation factor VIII related aigen (F VIII -Ag) ELISA Kit 大鼠Ⅷ相關(guān)抗原(FⅧ-Ag)試劑盒
Humancardioophln1,CT-1ELISAKit 人心肌營(yíng)養(yǎng)素1(CT-1)pcr檢測(cè)試劑盒分裝
HumanBcellreceptor,BCR試劑盒人B細(xì)胞受體(BCR)試劑盒規(guī)格：96T/48T
植物蔗糖合成酶(sucrosesyhase)活性比色法定量試劑盒20次
Humahioredoxieductase,xRELISAKit人硫氧還蛋白還原酶(xR)試劑盒規(guī)格：96T/48T
兔膠質(zhì)瘤組織源細(xì)胞大鼠血小板反應(yīng)蛋白解整合素金屬肽酶1(ADAMTS1)試劑盒 ，英文名： ADAMTS1 ELISA Kit
Mouse embryonic stem cell line MESPU30 (M30) ELISA Kit 小鼠胚胎干細(xì)胞系MESPU30(M30)試劑盒
MouseVascularEndothelialcellGrowthFactorC,VEGF-CELISAkit 小鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子C(VEGF-C)pcr檢測(cè)試劑盒分裝
CLIAKitforHumanc-junELISAKit人c-jun
細(xì)胞CDK7/CYCLINH激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次
ELISAKitCAMK2大鼠鈣/鈣調(diào)素依賴性蛋白激酶2
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