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詳細介紹
商品屬性：
組織來源 | 產品規(guī)格 | 細胞形態(tài) | 貨號 |
肝 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | 圓形 | YS-01X8350 |
細胞簡介：
兔肝非實質分離自肝臟組織；肝臟是身體內以代謝功能為主的一個器官，并在身體里面起著去氧化、儲存肝糖、分泌性蛋白質的合成等作用；肝臟也制造消化系統(tǒng)中之膽汁。肝臟是機體內臟里大的器官，位于機體中的腹部位置，在右側橫隔膜之下，位于膽囊之前端且于右邊腎臟的前方，胃的上方。肝臟是機體消化系統(tǒng)中大的消化腺，為一紅棕色的V字形器官。肝臟是尿素合成的主要器官，又是新陳代謝的重要器官。肝臟在機體位置和形態(tài)結構：肝臟位于右上腹，隱藏在右側膈下和肋骨深面，大部分肝為肋弓所復蓋，僅在腹上區(qū)、右肋弓間露出并直接接觸腹前壁，肝上面則與膈及腹前壁相接。肝實質細胞具有肝功能的單位，是肝臟的基本組成單位之一。肝非實質細胞是指除了肝實質細胞之外的細胞，主要包含了肝竇內皮細胞、肝星狀細胞、肝枯否細胞。
原代細胞的培養(yǎng)條件：
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細胞要通過充分漂洗，以盡量除去消化液的毒性；
2、細胞接種時濃度要稍大一些，至少為5×108細胞/L；
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng)；
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
6、在起始的2天中盡量減少振蕩，以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落，漂?。?/p>
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網狀，應將原代細胞換液；
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經靜置培養(yǎng)1周時，應將細胞懸液經低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞；
2、短期培養(yǎng)，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行；
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內，進行分瓶試驗；
4、長期培養(yǎng)時，淋巴細胞中要加入生長因子，白血病細胞中要加入少量的原患者血清，以利細胞生長；
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次；
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行。
方法簡介：
實驗室分離的兔肝非實質采用取肝臟灌流、膠原酶消化、密度梯度離心法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測：
實驗室分離的兔肝非實質經過檢測，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基：含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長特性：懸浮
細胞形態(tài)：圓形
傳代特性：不增殖；不傳代
消化液：0.25%
培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%
兔肝非實質體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。
細胞傳代及凍存：
| 細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
| 如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面T25瓶為例； 1．細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細胞變圓脫落后，加入2ml培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中，注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存。3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種：
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
?、?消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
④器官培養(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調節(jié)作用。
公司正在出售的產品：
豬內皮型合成酶3(eNOS-3)試劑盒 組裝/原裝
豬內皮型合成酶(eNOS)試劑盒 組裝/原裝
豬內皮素1(ET-1)試劑盒 組裝/原裝
豬免疫球蛋白M(IgM)試劑盒 組裝/原裝
DNA交聯(lián)修復基因SNM1抗體
9號染色體開放閱讀框172抗體
IL8重組人 IL-8 / CXCL8 蛋白 (aa 6-77, Fc 標簽) Protein
Ⅻ(F12)重組蛋白 Recombinant Coagulation Factor XII (F12)
BVES重組人 BVES / POPDC1 蛋白 (GST 標簽) Protein
ATL1 Protein Human 重組人 ATL1 / SPG3A / Atlastin-1 蛋白 (GST 標簽)
M1 Protein H7N9 重組甲型流感 H7N9 (A/Anhui/1/2013) Matrix 僀?僀
Ⅻ(F12)重組蛋白 Recombinant Coagulation Factor XII (F12)
ATL1 Protein Human 重組人 ATL1 / SPG3A / Atlastin-1 蛋白 (GST 標簽)
IL8重組人 IL-8 / CXCL8 蛋白 (aa 6-77, Fc 標簽) Protein
M1 Protein H7N9 重組甲型流感 H7N9 (A/Anhui/1/2013) Matrix protein 1 / M1 蛋白 (His 標簽)
BVES重組人 BVES / POPDC1 蛋白 (GST 標簽) Protein
豬葡萄糖轉運蛋白2(GL2)ELISA 試劑盒
Human formylmethionine (fMet) ELISA Kit 人甲酰甲硫(fMet)試劑盒
guineapigmaixmetalloproteinase9,MMP-9ELISAKit 豚鼠基質金屬蛋白酶9(MMP-9)試劑盒分裝
CLIAKitforANGELISAKit大鼠血管生長素
血液元素比色法定量試劑盒20次
PorcineCollageypeⅡ,ColⅡELISAKit豬Ⅱ型膠原(ColⅡ)試劑盒
兔肝非實質細胞大鼠干擾素誘導蛋白10(IP-10/CXCL10)試劑盒 ，英文名： IP-10/CXCL10 ELISA Kit
Rabbit prolactin (PRL) ELISA Kit 兔子催乳素(PRL)試劑盒
溶藻弧菌(VA)核酸試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T
CLIAKitforMDC/CCL22(MouseMacrophage-DerivedChemokine)ELISAKit小鼠巨噬細胞來源的趨化因子
體液前列腺型酸型性0酸酶(PACP)活性比色法定量試劑盒20次
ELISAKitsIgA牛分泌型免疫球蛋白A
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