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詳細介紹
商品屬性：
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細胞形態(tài) | 貨號 |
腸系膜 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | 內(nèi)皮細胞樣 | YS-01X8223 |
細胞簡介：
大鼠腸系膜上動脈內(nèi)皮分離自腸系膜動脈組織；腸道指的是從胃幽門至門的消化管。腸是消化管中最長的一段，也是功能最重要的一段。哺乳動物的腸包括小腸、大腸和直腸3大段。大量的消化作用和幾乎全部消化產(chǎn)物的吸收都是在小腸內(nèi)進行的，大腸主要濃縮食物殘渣，形成糞便，再通過直腸經(jīng)門排出體外。腸道堪稱身體最勞累的器官——每天不停地消化、吸收食物，以提供足夠的養(yǎng)分，其實它的功能還遠不止此——它還是機體內(nèi)最大的微生態(tài)系統(tǒng)。腸系膜動脈由背大動脈發(fā)出的走行在腸系膜內(nèi)，分布于消化管的動脈。分成腸系膜上動脈和腸系膜下動脈。前者主要分布于小腸左側(cè)，后者分布于結(jié)腸、大腸、泄殖腔等處。內(nèi)皮細胞或血管內(nèi)皮是一薄層的專門上皮細胞，由一層扁平細胞所組成。它形成血管的內(nèi)壁，是血管管腔內(nèi)血液及其他血管壁（單層鱗狀上皮）的接口。內(nèi)皮細胞是沿著整個循環(huán)系統(tǒng)，由心臟直至最小的微血管。
方法簡介：
實驗室分離的大鼠腸系膜上動脈內(nèi)皮采用-膠原酶聯(lián)合消化法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測：
實驗室分離的大鼠腸系膜上動脈內(nèi)皮經(jīng)CD31免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息：
包被條件：PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%）
培養(yǎng)基：含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長特性：貼壁
細胞形態(tài)：內(nèi)皮細胞樣
傳代特性：可傳2-3代
消化液：0.25%
培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%
大鼠腸系膜上動脈內(nèi)皮體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細胞的優(yōu)良培養(yǎng)狀態(tài)。
細胞傳代及凍存：
| 細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
| 如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面T25瓶為例； 1．細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細胞變圓脫落后，加入2ml培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中，注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存。3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種：
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
?、?消化培養(yǎng)法
③ 懸浮細胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
④器官培養(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品：
小鼠白介素16(IL-16)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠白介素3(IL-3)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠白介素4(IL-4)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠白介素-5(IL-5)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠黃體生成素(LH)試劑盒 96T/48T
Rat lymphocyte factor ELISA Kit 大鼠淋巴細胞因子試劑盒
humancoicoopieleasinghormone,CRHELISAKit 人促腎上皮質(zhì)激素釋放激素(CRH)試劑盒 96T/48T 進口分裝
Humanaimousaibody,HAMAELISA人抗鼠抗體(HAMA)試劑盒規(guī)格：96T/48T
植物羥賴(HYL)含量比色法定量試劑盒20次
Humanurinaryfreecoisol,UFCELISAKit人尿游離(UFC)試劑盒規(guī)格：96T/48T
WD重復(fù)蛋白77抗體
卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白28A抗體
VEGFC重組大鼠 VEGFC / VEGF-C 蛋白 (aa 108-223, Fc 標簽) Protein
FasL(抗原 0.5mgFasL(抗原)
IL24重組人 IL-24 / MDA-7 蛋白 Protein
ERBB4 Protein Human 重組人 / 恒河猴 HER4 / ErbB4 蛋白 (Fc 標簽)
ACHE Protein Mouse 重組小鼠 Acetylcholinesterase / ACHE 蛋白
FasL(抗原 0.5mgFasL(抗原)
ERBB4 Protein Human 重組人 / 恒河猴 HER4 / ErbB4 蛋白 (Fc 標簽)
VEGFC重組大鼠 VEGFC / VEGF-C 蛋白 (aa 108-223, Fc 標簽) Protein
ACHE Protein Mouse 重組小鼠 Acetylcholinesterase / ACHE 蛋白
IL24重組人 IL-24 / MDA-7 蛋白 Protein
大鼠腸系膜上動脈內(nèi)皮細胞大鼠半乳糖凝集素3(Galectin3)試劑盒 ，英文名： Galectin3 ELISA Kit
Mouse ierferon beta (IFN- beta /IFNB) ELISA Kit 小鼠β干擾素(IFN-β/IFNB)試劑盒
ELISA 小鼠纖維連結(jié)蛋白(mous FN) 進口分裝
CLIAKitforISR-Beta(MouseInsulieceptorBeta)ELISAKit小鼠胰島素受體β
通用型丁酰酯酶活性比色法定量試劑盒20次
AIL-R1大鼠腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體1
原代細胞的培養(yǎng)條件：
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細胞要通過充分漂洗，以盡量除去消化液的毒性；
2、細胞接種時濃度要稍大一些，至少為5×108細胞/L；
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng)；
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
6、在起始的2天中盡量減少振蕩，以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落，漂浮；
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀，應(yīng)將原代細胞換液；
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時，應(yīng)將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞；
2、短期培養(yǎng)，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行；
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi)，進行分瓶試驗；
4、長期培養(yǎng)時，淋巴細胞中要加入生長因子，白血病細胞中要加入少量的原患者血清，以利細胞生長；
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次；
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行
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