詳細介紹
測定步驟:
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準確
3.管底加樣,不能加在管壁上
4.加樣時不能產(chǎn)生氣泡
2.溫浴
1.加標本后和加結合物后,應立即放入按規(guī)定的反應溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應疊在一起。
3.白介素27ELISA試劑盒為避免蒸發(fā),板上應加蓋,或將板平放在底部墊有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后,反應的時間和溫度通常不做嚴格要求。 如室溫高于20℃,ELISA板可避光放在實驗臺上,以便 不時觀察,待對照管顯色適當時,即可終止酶反應。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過程中不是反應步驟,但卻 是決定實驗成敗的關鍵。
2.目的是洗去反應液中沒有與固相抗原或 抗體結合的物質以及在反應過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質。
4.讀板
1.陰性對照顏色極淺,在定性測定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標儀測定結果,準確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標儀的質 量和軟件的算法。
試劑和樣本的控制方法:
一、試劑
1.試劑的選擇:國家明確要求要采用批批檢定的形式對ELISA試劑嚴格把關,我司嚴格按照進行,已獲得國家承認的“三證”,每一個產(chǎn)品都有對應的批號,只要客戶提前下單,我們就能為您提供新批次的產(chǎn)品,不必擔心會有過期的試劑。我司的試劑,值得您選擇。
2.試劑的準備:先將試劑盒先從冰箱中拿出來,在室溫下放置20-30 min后,再進行測定,使試劑盒在使用前與室溫平衡,這樣做的目的能使反應微孔內的溫度較快地達到所需的溫度,以滿足后面的測定需求。
二、樣本
1.內源性干擾因素:包括類風濕因子、補體、高濃度的非特異免疫球蛋白、異嗜性抗體、某些自身抗體等;
類風濕因子的控制方法:
①用F(ab)2替代完整的IgG;
②標本用聯(lián)有熱變性IgG的固相吸附劑處理;
③檢測抗原時,可用加入到標本稀釋液中使RF降解;
補體的控制方法:
①用EDTA稀釋標本;
②56℃ 30 min加熱血清使C1q滅活;
2.外源性干擾因素:包括標本溶血、細菌污染、保存時間過長或凝固不全等;
控制方法:采血時規(guī)范操作,采集的血液勿用力震蕩,以防溶血;收集標本時采用無菌試管,經(jīng)檢測后再低溫凍存;保存時間不宜過久,檢測時盡量采用新鮮標本;對于凝固不全的血標本可適當加入抗凝劑,并放入37℃水中1 h,待充分凝固后再離心分離血清。
操作步驟:
1)使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,以免加樣時加入大量的氣泡,產(chǎn)生加樣上的誤差。
2)根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標準品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個標準品和空白孔建議做復孔。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定,能使用復孔的盡量做復孔。標本用標本稀釋液1:1稀釋后加入50ul于反應孔內。
3)加入稀釋好后的標準品50ul于反應孔、加入待測樣品50ul于反應孔內。立即加入50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時。
4)甩去孔內液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。
5)每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。
6)甩去孔內液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。
7)每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照。
8)取出酶標板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應立即測定結果。
9)在450nm波長處測定各孔的OD值。
具有如下優(yōu)點:
一、高效、靈敏、特異的抗體;
二、穩(wěn)定的重復性和可靠性;
三、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相載體;
四、適用血清、血漿、組織勻漿液、細胞培養(yǎng)上清液、尿液等等多種標本類型;
五、性價比非常好,節(jié)省實驗經(jīng)費。
anti- AFP antibody大鼠卵巢癌標志物CA125ELISA試劑盒
anti- AGA antibody大鼠卵清蛋白特異性IgE(OVA sIgE)ELISA試劑盒
anti- AGAP2 antibody大鼠骨保護素(OPG)ELISA試劑盒
anti- AGBL3 antibody大鼠骨保護素配體(OPGL)ELISA試劑盒
anti- AGBL5/CCP5 antibody大鼠骨橋素(OPN)ELISA試劑盒
anti- AGER antibody大鼠骨粘連蛋白(ON)ELISA試劑盒
anti- AGER antibody大鼠破骨細胞分化因子(ODF)ELISA試劑盒
anti- AGFG1 antibody大鼠骨鈣素/骨谷氨酸蛋白(OT/BGP)ELISA試劑盒
anti- AGFG2 antibody大鼠孤腓肽(OFQ/N)ELISA試劑盒
anti- AGGF1 antibody大鼠阿立新A(Orexin A)ELISA試劑盒
anti- Aggrecan antibody大鼠抑瘤素M(OSM)ELISA試劑盒
anti- AGO2 antibody大鼠網(wǎng)膜素(omentin)ELISA試劑盒
anti- AGPAT1 antibody大鼠核因子κB亞基p65親和肽(NF-κB p65)ELISA試劑盒
anti- AGPAT3 antibody大鼠核因子κB(NF-κB)ELISA試劑盒
anti- AGPAT6 antibody大鼠Ⅲ型前膠原肽(PⅢNP)ELISA試劑盒
白介素27ELISA試劑盒小鼠 IgA (mouse IgA)Human CMA1(Chymase) ELISA Kit
Human KISS1(Metastasis-suppressor KiSS-1) ELISA Kit
小鼠 IgG(mouse IgG)Human 4-HNE(4-Hydroxynonenal) ELISA Kit
Human ADAMTS9(A disintegrin and metalloproteinase with thrombospondin motifs 9) ELISA Kit
小鼠類胰島素樣生長因子 -1 (mouse IGF-1)Human UCP2(Mitochondrial uncoupling protein 2) ELISA Kit
Human UCP1(Mitochondrial brown fat uncoupling protein 1) ELISA Kit
小鼠 IGF-II (Mouse IGF-II) ELISA KitHuman LRP1(Prolow-density lipoprotein receptor-related protein 1) ELISA Kit
Human COQ10B(Coenzyme Q-binding protein COQ10 homolog B, mitochondrial) ELISA Kit
小鼠白介素 -1 a (mouse IL-1 a )Human QPCTL(Glutaminyl-peptide cyclotransferase-like protein) ELISA Kit
Human SELENBP1(Selenium-binding protein 1) ELISA Kit
小鼠白介素 -1 b (mouse IL-1 b )Human CCR3(C-C chemokine receptor type 3) ELISA Kit
Human DMP1(Dentin matrix acidic phosphoprotein 1) ELISA Kit
mouse IL-1R ELISA KitHuman PION(Gamma-secretase-activating protein) ELISA Kit
Human ALAD(Delta-aminolevulinic acid dehydRatase) ELISA Kit
小鼠白介素 -1RA( 小鼠 IL-1ra)Human FECH(Ferrochelatase, mitochondrial) ELISA Kit
Human QPCT(Glutaminyl-peptide cyclotransferase) ELISA Kit
小鼠白介素 -2 (mouse IL-2)Human DDOST(Dolichyl-diphosphooligosaccharide--protein glycosyltransferase 48 kDa subunit) ELISA Kit
Human PDPN(Podoplanin) ELISA Kit
小鼠白介素 -3 (mouse IL-3)Human MCL1(Induced myeloid leukemia cell differentiation protein Mcl-1) ELISA Kit
Human ADAMTS5(A disintegrin and metalloproteinase with thrombospondin motifs 5) ELISA Kit
小鼠白介素 -4 (mouse IL-4)Human MEFV(Pyrin) ELISA Kit
Human DNMT1(DNA(cytosine-5)-methyltransferase 1) ELISA Kit
小鼠白介素 -5 (mouse IL-5)Human IL17B(Interleukin-17B) ELISA Kit
Human TLN1(Talin-1) ELISA Kit
小鼠白介素 -6 (mouse IL-6)Human MRC2(C-type mannose receptor 2) ELISA Kit
Human IFNE(Interferon epsilon) ELISA Kit
小鼠白介素 -7(mouse IL-7)Human GOT1L1(Putative aspartate aminotransferase, cytoplasmic 2) ELISA Kit
Human TK1(Thymidine kinase, cytosolic) ELISA Kit
小鼠白介素 -10 (mouse IL-10)Human 5-HETE(5-Hydroxyeicosatetraenoic Acid) ELISA Kit
Human LCAT(Phosphatidylcholine-sterol acyltransferase) ELISA Kit