本網站銷售的化學產品僅供科學研究或工業(yè)應用，不直接用于食品、藥品、臨床或動物的診斷或治療！

產品名稱：大鼠食管上皮細胞

組織來源：食管組織

產品規(guī)格：5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

培養(yǎng)信息：

包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態(tài) 上皮細胞樣

傳代特性 可傳1-2代

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

細胞簡介：

大鼠食管上皮分離自食管組織；食管是咽和胃之間的消化管，食管在系統(tǒng)發(fā)生上起初很短，隨著頸部的伸長和心肺的下降，而逐漸增長。食管可分為頸段、胸段和腹段。脊椎動物食管的頸段位于氣管背后和脊柱前端，胸段位于左、右肺之間的縱膈內，胸段通過膈孔與腹腔內腹相連，腹段很短與胃相連。在發(fā)育過程中，食管的上皮細胞增殖，由單層變?yōu)閺蛯?，食管使管腔變狹窄，甚至一度閉鎖，以后管腔又重新出現。哺乳動物的食管結構上由內向外分四層：黏膜層、黏膜下層、肌層和外膜。其中，黏膜層，包括上皮、固有層和黏膜肌層。上皮為較厚的未角化的復層扁平上皮，耐摩擦，有保護作用。在食管與胃賁門交界處，復層扁平上皮突然變成單層柱狀上皮。食管被一層線性排列的、無角化、潮濕的復層扁平上皮細胞覆蓋，其頂端細胞膜和細胞間連接復合體聯合在一起產生有效滲透屏障，防止食管內容物的滲入。特別的是，層屏障使表層細胞的基質外側細胞膜和深層細胞的全部細胞膜不暴露于食管腔內規(guī)律的大幅波動的滲透壓之下。從組織學上講，食管上皮由兩層組成，基底層和分化層；其中，僅基底層的細胞可以增殖，然后向食管腔移行。移行過程伴隨有分化的發(fā)生和分化標記的依序表達。食管上皮細胞的培養(yǎng)是研究食管正常生理機制和食管癌變機制的非常好的體外模型。

方法簡介：

公司實驗室分離的大鼠食管上皮采用-膠原酶聯合消化法，并通過上皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質量檢測：

公司實驗室分離的大鼠食管上皮經PCK免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)步驟：

一、復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或將細胞懸液加入6cm皿中），培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。

二、細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。

a）、對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：

1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。

2. 加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化。

3.輕輕吹打細胞，脫落后吸出，在1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。

4. 按5-6ml/瓶補加培養(yǎng)液，將細胞懸液按1：2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中。

b）、對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細胞，1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄上清液，補加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中。

方法二：可選擇半數換液方式，棄半數培養(yǎng)基后，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中。

收到細胞如何處理？

1、首先，觀察細胞培養(yǎng)瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現象。若有，請拍照，并及時與技術支持聯系（所拍照片將作為后續(xù)服務依據）。

2、用75%酒精擦拭細胞培養(yǎng)瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題，部分貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落；先不要打開培養(yǎng)瓶蓋，將細胞置于細胞培養(yǎng)箱內靜置培養(yǎng)2-4小時，以便穩(wěn)定細胞狀態(tài)。

3、仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關信息，如貼壁特性（貼壁/懸浮）、細胞形態(tài)、所用基礎培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子、傳代比例、換液頻率等。

4、靜置完成后，取出細胞培養(yǎng)瓶，鏡檢、拍照，記錄細胞狀態(tài)（所拍照片將作為后續(xù)服務依據）；建議細胞傳代培養(yǎng)后，定期拍照、記錄細胞生長狀態(tài)。

5、貼壁細胞：若細胞生長密度超過80%，可正常傳代；若未超過80%，移除細胞培養(yǎng)瓶內培養(yǎng)基，預留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng)，直至細胞密度達80%左右再進行傳代操作，瓶蓋可稍微擰松。

6、懸浮細胞：將細胞培養(yǎng)瓶內液體全部轉移至50ml無菌離心管內，1200rpm離心5min，離心后上清培養(yǎng)基可收集備用，管底細胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時，若細胞密度超過80%，可將細胞懸液分至2個細胞培養(yǎng)瓶內培養(yǎng)，補加培養(yǎng)基至5ml；若細胞密度未超過80%，將細胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng)，直至細胞密度達80%左右時再進行傳代操作

公司正在出售的產品：

人脂蛋白α(Lp-α)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

人骨膠原交聯(Cr)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

人Ⅰ型前膠原C末端肽(CⅠCP)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

人脫氧酚/脫氧啉(DPD)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

豚鼠白三烯B4(LTB4)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human cytochrome C (Cyt-C) ELISA Kit 人(Cyt-C)試劑盒

Humanai-alpha-FodrinIgG/IgA,α-FodrinIgG/IgAELISAKit 人抗α-胞襯蛋白抗體IgG/IgA(α-FodrinIgG/IgA)試劑盒 96T/48T 進口分裝

Humancyclooxygenase-2,COX-2試劑盒人環(huán)加氧酶2(COX-2)試劑盒規(guī)格：96T/48T

組織GSK3β激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次

HumanPolySeriumAigen,PHSAELISAKit人多聚血清蛋白(PHSA)試劑盒規(guī)格：96T/48T

脆性X相關蛋白樣2抗體

尿皮素2抗體

HA重組甲型流感 H4N6 (A/mallard/Ohio/657/2002) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 Protein

S6PDH(NADP sorbitol-6-phosphate dehydrogenase 0.5mgS6PDH(NADP sorbitol-6-phosphate dehydrogenase) 6-0酸脫氫酶抗原

IL1RL1重組人 IL1RL1 / ST2 蛋白 Protein

IMPA1 Protein Human 重組人 IMP1 / IMPA1 蛋白

IL25 Protein Human 重組人 IL25 蛋白 (Fc 標簽)

S6PDH(NADP sorbitol-6-phosphate dehydrogenase 0.5mgS6PDH(NADP sorbitol-6-phosphate dehydrogenase) 6-0酸脫氫酶抗原

IMPA1 Protein Human 重組人 IMP1 / IMPA1 蛋白

HA重組甲型流感 H4N6 (A/mallard/Ohio/657/2002) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 Protein

IL25 Protein Human 重組人 IL25 蛋白 (Fc 標簽)

IL1RL1重組人 IL1RL1 / ST2 蛋白 Protein

大鼠食管上皮細胞人粘膜相關上皮趨化因子(MEC/CCL28)ELISA 試劑盒

Human tumor necrosis factor beta (TNF- beta) ELISA Kit 人腫瘤壞死因子β(TNF-β)試劑盒

HumanMethylaseELISAKit 人甲基化酶(Methylase)試劑盒 96T/48T 進口分裝

HumanImmunoreactivegrowthhormone,irGH試劑盒人免疫反應性生長激素(irGH)試劑盒規(guī)格：96T/48T

組織基質金屬蛋白酶(MMP-2)琥珀酰明膠法比色定量試劑盒20次

HumanLeukemiainhibitoryfactor,LIFELISAKit人白血病抑制因子(LIF)試劑盒規(guī)格：96T/48T