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人表皮成纖維細(xì)胞

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更新時間:2024-10-30 10:43:14瀏覽次數(shù):291

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
貨號 YS-01X7554 主要用途 僅供科研研究實驗
人表皮成纖維細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品:白細(xì)胞介素17受體E抗體 跨膜蛋白28/TMEM28抗體 丙酮酸脫氫酶E1β亞基抗體 人成骨細(xì)胞 小鼠表皮成纖維細(xì)胞 EoL-1人白血病細(xì)胞 OKT 11 (小鼠雜交瘤細(xì)胞(抗CD2))

詳細(xì)介紹

人表皮成纖維細(xì)胞

人表皮成纖維細(xì)胞

商品屬性:

組織來源

產(chǎn)品規(guī)格

細(xì)胞形態(tài)

貨號

皮膚組織

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

成纖維細(xì)胞樣

YS-01X7554

細(xì)胞簡介:

人表皮成纖維分離自皮膚組織;表皮位于動物皮膚的外層,由胚胎時期外胚層形成,具有抗摩擦和抗損傷的作用。表皮是皮膚的淺層結(jié)構(gòu),由復(fù)層扁平上皮構(gòu)成。從基底層到表面可分為五層,即基底層、棘層、顆粒層、透明層和角質(zhì)層。成纖維細(xì)胞(Fibroblast)是疏松結(jié)締組織的主要細(xì)胞成分,由胚胎時期的間充質(zhì)細(xì)胞分化而來。成纖維細(xì)胞較大,輪廓清楚,多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu),其細(xì)胞核呈規(guī)則的卵圓形,核仁大而明顯。成纖維細(xì)胞功能活動旺盛,細(xì)胞質(zhì)嗜弱堿性,具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動,在一定條件下,它可以實現(xiàn)跟纖維細(xì)胞的互相轉(zhuǎn)化;成纖維細(xì)胞對不同程度的細(xì)胞變性、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用。剛分離的表皮成纖維細(xì)胞呈圓形、折光性良好,懸浮于培養(yǎng)基中。30min細(xì)胞貼壁,其中部分開始伸出偽足,表現(xiàn)為小的突起;6h后細(xì)胞基本貼壁,伸展成梭形,胞核清晰,分布較均勻,散在生長,不聚集成團(tuán);細(xì)胞生長迅速,5-7天即呈融合狀態(tài),細(xì)胞排列緊密,有的交叉重疊生長,平坦、胞體較大,細(xì)胞質(zhì)透明,細(xì)胞核較大,呈橢圓形,顏色淡。細(xì)胞融合,并彼此連接成網(wǎng)狀;細(xì)胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。

原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件:

  一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)

  1、細(xì)胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;

  2、細(xì)胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細(xì)胞/L;

  3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);

  4、 胎牛血清濃度為10%-80%

  5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

  6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,漂??;

  7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應(yīng)將原代細(xì)胞換液;

  8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。

  二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)

  1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細(xì)胞;

  2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行;

  3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進(jìn)行分瓶試驗;

  4、長期培養(yǎng)時,淋巴細(xì)胞中要加入生長因子,白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,以利細(xì)胞生長;

  5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次;

  6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時才能進(jìn)行。

方法簡介:

公司實驗室分離的人表皮成纖維采用先消化、后-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測:

公司實驗室分離的人表皮成纖維經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBVHCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣

傳代特性 可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)最佳

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO25%

人表皮成纖維細(xì)胞

細(xì)胞傳代及凍存:

細(xì)胞傳代步驟細(xì)胞凍存步驟
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細(xì)胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細(xì)胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標(biāo)識。本公司按每個凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個細(xì)胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:

  ① 組織塊培養(yǎng)法

  組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長。

  ② 消化培養(yǎng)法

 ?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法

  對于懸浮生長的細(xì)胞,如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

 ?、芷鞴倥囵B(yǎng)

  器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。

人表皮成纖維細(xì)胞


公司正在出售的產(chǎn)品:

小鼠β基己糖苷酶試劑盒   小鼠β基己糖苷酶試劑盒   規(guī)格型號:96T/48T   小鼠β基己糖苷酶試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠β基己糖苷酶試劑盒、小鼠β基己糖苷酶eisa試劑盒   保存條件:2-8   保質(zhì)期:6個月。

小鼠前列腺酸性0酸酶試劑盒   小鼠前列腺酸性0酸酶試劑盒   規(guī)格型號:96T/48T   小鼠前列腺酸性0酸酶試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠前列腺酸性0酸酶試劑盒、小鼠前列腺酸性0酸酶eisa試劑盒   保存條件:2-8   保質(zhì)期:6個月。

小鼠糖原合成酶激酶試劑盒   小鼠糖原合成酶激酶試劑盒   規(guī)格型號:96T/48T   小鼠糖原合成酶激酶試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠糖原合成酶激酶試劑盒、小鼠糖原合成酶激酶eisa試劑盒   保存條件:2-8   保質(zhì)期:6個月。

小鼠雄烯二試劑盒   小鼠雄烯二試劑盒   規(guī)格型號:96T/48T   小鼠雄烯二試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠雄烯二試劑盒、小鼠雄烯二eisa試劑盒   保存條件:2-8   保質(zhì)期:6個月。

小鼠核因子κB亞基p65親和肽(NF-κB p65)試劑盒  試劑盒 組裝/原裝

Human neuronal apoptosis inhibitory protein (NAIP) ELISA Kit 人神經(jīng)元凋亡抑制蛋白(NAIP)試劑盒

humanParathyroidhormone,PTHELISAKit 人甲狀旁腺激素(PTH)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

HumanAi-nuclearAibody,ANA試劑盒人抗核抗體(ANA)試劑盒規(guī)格:96T/48T

植物酸性蔗糖轉(zhuǎn)化酶(acidinvease)總活性比色法定量試劑盒20

HumanulaEsiol,uE3ELISAKit人超敏游離雌三醇(uE3)試劑盒規(guī)格:96T/48T

磷酸化卡波西氏肉瘤皰疹病毒潛伏核抗原相互作用蛋白1抗體

核苷酸轉(zhuǎn)氫酶抗體

ACE2重組小鼠 ACE2 / Angiotensin-Converting Enzyme 2 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽) Protein

Ah Receptor(Aryl Hydrocarbon Receptor 0.5mgAh Receptor(Aryl Hydrocarbon Receptor) 芳香烴受體抗原

IZUMO4重組人 IZUMO4 / C19orf36 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

F7 Protein Human 重組人 Coagulation Factor VII / FVII / F7 蛋白

PVRL1 Protein Rat 重組大鼠 CD111 / Nectin-1 / PVRL1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

Ah Receptor(Aryl Hydrocarbon Receptor 0.5mgAh Receptor(Aryl Hydrocarbon Receptor) 芳香烴受體抗原

F7 Protein Human 重組人 Coagulation Factor VII / FVII / F7 蛋白

ACE2重組小鼠 ACE2 / Angiotensin-Converting Enzyme 2 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽) Protein

PVRL1 Protein Rat 重組大鼠 CD111 / Nectin-1 / PVRL1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

IZUMO4重組人 IZUMO4 / C19orf36 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

人表皮成纖維細(xì)胞大鼠抑制素βA(INHβA)試劑盒 ,英文名: INHβA ELISA Kit

Mouse immunoglobulin G (IgG) ELISA Kit 小鼠免疫球蛋白G(IgG)試劑盒

MousePlatelet-DerivedGrowthFactorAB,PDGF-ABELISAkit 小鼠血小板衍生生長因子AB(PDGF-AB)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforhumandopamine,DAELISAKIT人多巴胺

細(xì)胞ABL1激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20

ELISAKitEPO大鼠紅細(xì)胞生成素


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