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產(chǎn)品名稱：人乳腺癌血管內(nèi)皮細胞

組織來源：乳腺癌組織

產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

培養(yǎng)信息：

包被條件 PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%）

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態(tài) 內(nèi)皮細胞樣

傳代特性 可傳2-3代

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

細胞簡介：

人乳腺癌血管內(nèi)皮分離自患有乳腺癌的女性乳腺組織；女性乳腺是由皮膚、纖維組織、乳腺腺體和脂肪組成的，乳腺癌是發(fā)生在乳腺腺上皮組織的惡性腫瘤。乳腺癌中99%發(fā)生在女性，男性僅占1%。乳腺并不是維持機體生命活動的重要器官，原位乳腺癌并不致命；但由于乳腺癌細胞喪失了正常細胞的特性，細胞之間連接松散，容易脫落。癌細胞一旦脫落，游離的癌細胞可以隨血液或淋巴液播散全身，形成轉(zhuǎn)移，危及生命。目前，乳腺癌已成為威脅女性身心健康的常見腫瘤。

方法簡介：

公司實驗室分離的人乳腺癌血管內(nèi)皮采用-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法，并通過內(nèi)皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測：

公司實驗室分離的人乳腺癌血管內(nèi)皮經(jīng)CD31免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)步驟：

一、復(fù)蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓毎麘乙杭尤?cm皿中），培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。

二、細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。

a）、對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：

1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。

2. 加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化。

3.輕輕吹打細胞，脫落后吸出，在1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。

4. 按5-6ml/瓶補加培養(yǎng)液，將細胞懸液按1：2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中。

b）、對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細胞，1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄上清液，補加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中。

方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中。
公司正在出售的產(chǎn)品：

素   英文名稱：   Human Renin   規(guī)格：      英文縮寫：   RN

視網(wǎng)膜母細胞瘤蛋白1   英文名稱：   Human Retinoblastoma Protein 1   規(guī)格：      英文縮寫：   RBP1

松弛素-2   英文名稱：   Human Relaxin-2   規(guī)格：      英文縮寫：   RLN-2

S-100蛋白   英文名稱：   S-100protein   規(guī)格：      英文縮寫：   S-100

豚鼠轉(zhuǎn)化生長因子β1(TGF-β1)試劑盒 ，英文名： TGF-β1 ELISA Kit

Human protein kinase A (PKA) ELISA Kit 人蛋白激酶A(PKA)試劑盒

MonkeyMacrophageInflammatoryProtein-1α,MIP-1αELISAkit巨噬細胞性蛋白1α(MIP-1α/CCL3)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforBMP-6(MouseBonemorphogeneticprotein6)ELISAKit小鼠骨形成蛋白6

細菌氫鉍選擇瓊脂平板50個

rabbitNeuron-specificenolase,NSEELISAKit兔子神經(jīng)特異性烯醇化酶(NSE)試劑盒規(guī)格：96T/48T

信號轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子4重組兔單克隆抗體

NARFL蛋白抗體

CD53重組小鼠 CD53 蛋白 (aa 107-181, His 標(biāo)簽) Protein

基質(zhì)金屬蛋白酶1(MMP1)重組蛋白 Recombinant Matrix Metalloproteinase 1 (MMP1)

CD81重組人 CD81 / TAPA-1 蛋白 Protein

IGF2BP2 Protein Human 重組人 IGF2BP2 / IMP2 / p62 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽)

EFNB2 Protein Canine 重組狗 Ephrin-B2 / EFNB2 蛋白

基質(zhì)金屬蛋白酶1(MMP1)重組蛋白 Recombinant Matrix Metalloproteinase 1 (MMP1)

IGF2BP2 Protein Human 重組人 IGF2BP2 / IMP2 / p62 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽)

CD53重組小鼠 CD53 蛋白 (aa 107-181, His 標(biāo)簽) Protein

EFNB2 Protein Canine 重組狗 Ephrin-B2 / EFNB2 蛋白

CD81重組人 CD81 / TAPA-1 蛋白 Protein

人乳腺癌血管內(nèi)皮細胞大鼠調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)錄肽(CA)試劑盒 ，英文名： CA ELISA Kit

Monkey macrophage migration inhibitory factor (MIF) ELISA Kit巨噬細胞移動抑制因子(MIF)試劑盒

RatCompleme3,C3ELISAKit 大鼠補體蛋白3(C3)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforFSH(mousefollicle-stimulatinghormone)ELISAKit小鼠促卵泡素

細胞還原型(GSH)濃度高效液相色譜定量試劑盒50次

RatPlatelet-DerivedGrowthFactorSolubleReceptorα,PDGFsR-αELISAKit大鼠血小板衍生生長因子可溶性受體α(PDGFsR-α)試劑盒規(guī)格：96T/48T

收到細胞如何處理？

1、首先，觀察細胞培養(yǎng)瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有，請拍照，并及時與技術(shù)支持聯(lián)系（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）。

2、用75%酒精擦拭細胞培養(yǎng)瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題，部分貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落；先不要打開培養(yǎng)瓶蓋，將細胞置于細胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時，以便穩(wěn)定細胞狀態(tài)。

3、仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關(guān)信息，如貼壁特性（貼壁/懸?。?、細胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子、傳代比例、換液頻率等。

4、靜置完成后，取出細胞培養(yǎng)瓶，鏡檢、拍照，記錄細胞狀態(tài)（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）；建議細胞傳代培養(yǎng)后，定期拍照、記錄細胞生長狀態(tài)。

5、貼壁細胞：若細胞生長密度超過80%，可正常傳代；若未超過80%，移除細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基，預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng)，直至細胞密度達80%左右再進行傳代操作，瓶蓋可稍微擰松。

6、懸浮細胞：將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi)，1200rpm離心5min，離心后上清培養(yǎng)基可收集備用，管底細胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時，若細胞密度超過80%，可將細胞懸液分至2個細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)，補加培養(yǎng)基至5ml；若細胞密度未超過80%，將細胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng)，直至細胞密度達80%左右時再進行傳代操作