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人腎足突細(xì)胞

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更新時間:2024-10-30 13:12:40瀏覽次數(shù):273

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
貨號 YS-01X7272 主要用途 僅供科研研究實驗
人腎足突細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品:電壓門控鉀通道亞基Kv7.5抗體 FbxL7蛋白抗體 核糖體蛋白S6修飾樣蛋白A抗體 人視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞 人主動脈平滑肌細(xì)胞 SNU-2535人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞 RKO-E6 (人結(jié)腸癌轉(zhuǎn)基因細(xì)胞)

詳細(xì)介紹

人腎足突細(xì)胞

人腎足突細(xì)胞

商品屬性:

組織來源

產(chǎn)品規(guī)格

細(xì)胞形態(tài)

貨號

腎組織

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

上皮細(xì)胞樣

YS-01X7272

細(xì)胞簡介:

人腎足突分離自腎組織;腎小球是腎元中的用于將血液過濾生成原尿的一團毛細(xì)血叢,被鮑氏囊所包裹,是尿液形成的重要構(gòu)造。血液經(jīng)由入球小動脈進入腎小球。腎小球內(nèi)的微血管不像其他微血管,匯流入靜脈,而是流入出球小動脈。在腎小球內(nèi),微血管受到高壓,而加速了超濾作用(hyperfiltration)的進行。微血管中的血液經(jīng)由超濾作用之后,形成濾液,滲入鮑氏囊內(nèi)。腎小球與鮑氏囊合稱為腎小體,腎小球的過濾速率便稱為腎小球過濾率。足細(xì)胞(podocyte)即腎小囊臟層上皮細(xì)胞,它附著于腎小球基底膜(GBM)的外側(cè),連同GBM和毛細(xì)血管內(nèi)皮一起構(gòu)成了腎小球血液濾過屏障。足細(xì)胞特殊的解剖位置,使得其體內(nèi)研究較為困難;又由于正常成年機體的腎臟足細(xì)胞是一種終末分化細(xì)胞,體外培養(yǎng)的原代細(xì)胞不能增殖。足細(xì)胞呈星型多突狀,胞體較大,由胞體伸出許多突起,又稱足突(FP),呈指狀交叉復(fù)蓋于GBM外表面,并通過黏附分子和蛋白多糖分子與GBM相連。足細(xì)胞在正常情況下可以分泌GBM的主要組成成分,IV型膠原和纖維連接蛋白(FN);在促腎纖維化引資等刺激下還能分泌具有降解GBM作用的基質(zhì)金屬蛋白酶(MMPs)和組織蛋白酶,從而在GBM的代謝平衡中發(fā)揮重要作用。足細(xì)胞之間鄰近的足突相互交替,形成了許多30-40nm的裂孔,孔上覆蓋一層厚4-6nm的裂孔隔膜,即腎小球足突間裂孔隔膜。后者是血漿蛋白通過脈管系統(tǒng)的最后屏障,對于維持腎小球濾過屏障結(jié)構(gòu)與功能完整性發(fā)揮關(guān)鍵作用。

方法簡介:

公司實驗室分離的人腎足突采用機械研磨過不同孔徑不銹鋼網(wǎng)篩結(jié)合膠原酶消化法制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測:

公司實驗室分離的人腎足突經(jīng)PCK免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)信息:

包被條件 鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣

傳代特性 可傳1-2

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%CO2,5%

人腎足突細(xì)胞

細(xì)胞傳代及凍存:

細(xì)胞傳代步驟細(xì)胞凍存步驟
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細(xì)胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細(xì)胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標(biāo)識。本公司按每個凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個細(xì)胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:

  ① 組織塊培養(yǎng)法

  組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長。

 ?、?消化培養(yǎng)法

  ③ 懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法

  對于懸浮生長的細(xì)胞,如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

 ?、芷鞴倥囵B(yǎng)

  器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。

人腎足突細(xì)胞


公司正在出售的產(chǎn)品:

小鼠瘦素(LEP)試劑盒   96T/48T

小鼠嗜酸粒細(xì)胞趨化因子(ECF)試劑盒   96T/48T

小鼠嗜酸粒細(xì)胞趨化蛋白Eotaxin2(Eotaxin2/CCL24)試劑盒   96T/48T

小鼠嗜酸粒細(xì)胞趨化蛋白Eotaxin1(Eotaxin1/CCL11)試劑盒   96T/48T

小鼠酸激酶M2型同工酶(M2-PK)ELISA 試劑盒 96T/48T

One set of membrane protein (iNV) ELISA Kit 人套膜蛋白(iNV)試劑盒

Humanglycogensyhasekinase,GSKELISAKit 人糖原合成酶激酶(GSK)試劑盒 96T/48T 進口分裝

Humanbonesialoprotein,BSP試劑盒人骨涎蛋白(BSP)試劑盒規(guī)格:96T/48T

植物組織胞漿超氧化物歧化酶(Cu/ZnSOD)分離試劑盒50

HumanStaphylococalproteinA,SPAELISAKit人葡萄球菌蛋白A(SPA)試劑盒規(guī)格:96T/48T

原鈣粘附蛋白β6抗體

RTL9蛋白抗體

HA重組甲型流感 H5N2 (A/ostrich/South Africa/AI1091/2006) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 Protein

Rabbit IgG/Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 647標(biāo)記兔IgG(細(xì)胞流式同型對照 0.1mlRabbit IgG/Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 647標(biāo)記兔IgG(細(xì)胞流式同型對照)

EPHB6重組人 EphB6 / EphB6 蛋白 Protein

CLCF1 Protein Human 重組人 NNT1 / CLCF1 / CLC 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

ERBB4 Protein Human 重組人 HER4 / ErbB4 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽)

Rabbit IgG/Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 647標(biāo)記兔IgG(細(xì)胞流式同型對照 0.1mlRabbit IgG/Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 647標(biāo)記兔IgG(細(xì)胞流式同型對照)

CLCF1 Protein Human 重組人 NNT1 / CLCF1 / CLC 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

HA重組甲型流感 H5N2 (A/ostrich/South Africa/AI1091/2006) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 Protein

ERBB4 Protein Human 重組人 HER4 / ErbB4 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽)

EPHB6重組人 EphB6 / EphB6 蛋白 Protein

人腎足突細(xì)胞大鼠絲蛋白結(jié)合LIM蛋白1(FBLIM1)試劑盒 ,英文名: FBLIM1 ELISA Kit

Mouse vitamin A (VA) ELISA Kit 小鼠A(VA)試劑盒

RatProgesterone,PROGELISAkit 大鼠孕激素/孕酮(PROG)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforHGH(Humangrowthhormone)ELISAKIT人生長激素

細(xì)胞SPHK1激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20

ELISAKiX大鼠Ⅰ型膠原N末端肽

原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件:

  一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)

  1、細(xì)胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;

  2、細(xì)胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細(xì)胞/L;

  3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);

  4、 胎牛血清濃度為10%-80%

  5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

  6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,漂??;

  7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應(yīng)將原代細(xì)胞換液;

  8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。

  二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)

  1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細(xì)胞;

  2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行;

  3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進行分瓶試驗;

  4、長期培養(yǎng)時,淋巴細(xì)胞中要加入生長因子,白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,以利細(xì)胞生長;

  5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次;

  6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時才能進行。


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