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人食管平滑肌細(xì)胞

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更新時(shí)間:2025-04-09 10:53:01瀏覽次數(shù):283

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
貨號(hào) YS-01X7129 主要用途 僅供科研研究實(shí)驗(yàn)
人食管平滑肌細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品:鉀離子通道多聚體結(jié)構(gòu)域蛋白10抗體 FBXO24蛋白抗體 環(huán)指蛋白113B抗體 人髓母細(xì)胞瘤組織源細(xì)胞 人直腸癌組織源細(xì)胞 SNU-228人腎細(xì)胞癌細(xì)胞 PLC/PRF/5 (人肝癌亞力山大細(xì)胞)

詳細(xì)介紹

人食管平滑肌細(xì)胞

人食管平滑肌細(xì)胞

商品屬性:

組織來(lái)源

產(chǎn)品規(guī)格

細(xì)胞形態(tài)

貨號(hào)

食管組織

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

成纖維細(xì)胞樣

YS-01X7129

細(xì)胞簡(jiǎn)介:

人食管平滑肌分離自食管組織;食管可分為頸段、胸段和腹段,脊椎動(dòng)物食管的頸段位于氣管背后和脊柱前端,胸段位于左、右肺之間的縱膈內(nèi),胸段通過(guò)膈孔與腹腔內(nèi)腹相連,腹段很短與胃相連。哺乳動(dòng)物的食管結(jié)構(gòu)上由內(nèi)向外分四層:黏膜層、黏膜下層、肌層和外膜。其中,肌層上1/3段為骨骼肌,下1/3為平滑肌,中段為骨骼肌和平滑肌混合組成。其中,肌纖維的排列方式分為內(nèi)環(huán)形和外縱形兩層。食管的蠕動(dòng)是由食管平滑肌收縮嚴(yán)格控制,食管還有括約肌,位于環(huán)狀軟骨水平的,稱(chēng)為食管上括約肌;位于食管下端,一部分在膈上,穿過(guò)膈孔,另一部分在膈下的高壓帶,稱(chēng)為食管下括約肌。食管平滑肌細(xì)胞原代分離培養(yǎng)3天后,可見(jiàn)細(xì)胞貼壁伸展,細(xì)胞形態(tài)大小不一,呈梭形、不規(guī)則形、三角形或扇形,核卵圓形、居中;2周后細(xì)胞匯合,多數(shù)細(xì)胞伸展呈長(zhǎng)梭形,胞漿豐富,有分枝狀突起,細(xì)胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長(zhǎng),高低起伏;細(xì)胞密度低時(shí),常交織成網(wǎng)狀;密度高時(shí),則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細(xì)胞生長(zhǎng)較快,4-6天即可匯合,并保持上述形態(tài)學(xué)特征和生長(zhǎng)特點(diǎn)。

方法簡(jiǎn)介:

公司實(shí)驗(yàn)室分離的人食管平滑肌采用-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測(cè):

公司實(shí)驗(yàn)室分離的人食管平滑肌經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBVHCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin

換液頻率 每2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣

傳代特性 可傳5代左右;3代以?xún)?nèi)狀態(tài)最佳

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%CO2,5%

人食管平滑肌細(xì)胞

細(xì)胞傳代及凍存:

細(xì)胞傳代步驟細(xì)胞凍存步驟
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細(xì)胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:

  ① 組織塊培養(yǎng)法

  組織塊培養(yǎng)是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng)。

 ?、?消化培養(yǎng)法

 ?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法

  對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞,如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無(wú)需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

  ④器官培養(yǎng)

  器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性,可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。

人食管平滑肌細(xì)胞


公司正在出售的產(chǎn)品:

小鼠水通道蛋白試劑盒   小鼠水通道蛋白試劑盒   規(guī)格型號(hào):96T/48T   小鼠水通道蛋白試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來(lái)源:試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠水通道蛋白試劑盒、小鼠水通道蛋白eisa試劑盒   保存條件:2-8   保質(zhì)期:6個(gè)月。

小鼠抗試劑盒   小鼠抗試劑盒   規(guī)格型號(hào):96T/48T   小鼠抗試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來(lái)源:試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠抗試劑盒、小鼠抗eisa試劑盒   保存條件:2-8   保質(zhì)期:6個(gè)月。

小鼠己糖激酶試劑盒   小鼠己糖激酶試劑盒   規(guī)格型號(hào):96T/48T   小鼠己糖激酶試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來(lái)源:試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠己糖激酶試劑盒、小鼠己糖激酶eisa試劑盒   保存條件:2-8   保質(zhì)期:6個(gè)月。

小鼠β甘露糖苷酶試劑盒   小鼠β甘露糖苷酶試劑盒   規(guī)格型號(hào):96T/48T   小鼠β甘露糖苷酶試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來(lái)源:試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠β甘露糖苷酶試劑盒、小鼠β甘露糖苷酶eisa試劑盒   保存條件:2-8   保質(zhì)期:6個(gè)月。

小鼠髓過(guò)氧化物酶特異性抗中性粒細(xì)胞胞質(zhì)抗體IgG(MPO-ANCA IgG)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human ovalbumin specific IgG (OVA sIgG) ELISA Kit 人卵清蛋白特異性IgG(OVA sIgG)試劑盒

Humanphosphoinositide-specificphospholipaseC,PIPLCELISAKit 0酯酰肌醇特異性0酯酶C(PIPLC)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

deoxypyridinoline,DPD試劑盒兔子脫氧酚/脫氧啉(DPD)試劑盒規(guī)格:96T/48T

載玻片細(xì)胞線粒體復(fù)合物IV蛋白表達(dá)熒光顯微鏡試劑盒10/20

MouseEndomeiumAibody,EMAbELISAKit小鼠抗子宮內(nèi)膜抗體(EMAb)試劑盒規(guī)格:96T/48T

著絲粒蛋白M抗體

SNAPC3蛋白抗體

HA重組甲型流感 H1N1 (A/Solomon Islands/3/2006) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 Protein

Shadow/SPRN(Shadow of prion protein precursor 0.5mgShadow/SPRN(Shadow of prion protein precursor) 新朊蛋白/朊蛋白相關(guān)蛋白/沙杜(Shadoo)蛋白抗原

S100A6重組人 S100A6 / CACY 蛋白 Protein

CISD1 Protein Human 重組人 CISD1 / ZCD1 蛋白

IL35 Protein Human 重組人 IL-35 (IL12A & IL27B) 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

Shadow/SPRN(Shadow of prion protein precursor 0.5mgShadow/SPRN(Shadow of prion protein precursor) 新朊蛋白/朊蛋白相關(guān)蛋白/沙杜(Shadoo)蛋白抗原

CISD1 Protein Human 重組人 CISD1 / ZCD1 蛋白

HA重組甲型流感 H1N1 (A/Solomon Islands/3/2006) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 Protein

IL35 Protein Human 重組人 IL-35 (IL12A & IL27B) 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

S100A6重組人 S100A6 / CACY 蛋白 Protein

人食管平滑肌細(xì)胞大鼠嗜鉻蛋白A(CHGA)試劑盒 ,英文名: CHGA ELISA Kit

Mouse vitamin D (VD) ELISA Kit 小鼠(VD)試劑盒

RatGranulocyteColonyStimulatingFactor,G-CSFELISAKit 大鼠粒細(xì)胞集落刺激因子(G-CSF)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforHDVIgM(HumanHepatitisDvirusIgM)ELISAKit人丁型肝IgM

細(xì)胞TEL激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20

ELISAKitcath-K倉(cāng)鼠組織蛋白酶K

原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件:

  一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)

  1、細(xì)胞要通過(guò)充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;

  2、細(xì)胞接種時(shí)濃度要稍大一些,至少為5×108細(xì)胞/L;

  3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);

  4、 胎牛血清濃度為10%-80%

  5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

  6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,漂??;

  7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應(yīng)將原代細(xì)胞換液;

  8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時(shí),應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。

  二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)

  1、原代培養(yǎng)時(shí)要盡量去除紅細(xì)胞;

  2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行;

  3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進(jìn)行分瓶試驗(yàn);

  4、長(zhǎng)期培養(yǎng)時(shí),淋巴細(xì)胞中要加入生長(zhǎng)因子,白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,以利細(xì)胞生長(zhǎng);

  5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次;

  6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行。


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