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人羊膜成纖維細(xì)胞

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更新時間:2024-10-30 14:14:05瀏覽次數(shù):318

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
貨號 YS-01X7968 主要用途 僅供科研研究實驗
人羊膜成纖維細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品:NK細(xì)胞抑制性受體2DL2抗體 FERDL3蛋白抗體 RAS相關(guān)GTP結(jié)合蛋白C抗體 人源NK細(xì)胞 人外周血單核細(xì)胞 RMG-I人卵巢癌細(xì)胞 FC33 (人胚胎腎細(xì)胞(Asp-2基因修飾))

詳細(xì)介紹

人羊膜成纖維細(xì)胞

人羊膜成纖維細(xì)胞

商品屬性:

組織來源

產(chǎn)品規(guī)格

細(xì)胞形態(tài)

貨號

羊膜

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

成纖維細(xì)胞樣

YS-01X7968

細(xì)胞簡介:

人羊膜成纖維分離自胎盤組織;胎盤(placenta)是哺乳動物妊娠期間由胚胎的胚膜和母體子宮內(nèi)膜聯(lián)合長成的母子間交換物質(zhì)的過渡性器官,由羊膜、葉狀絨毛膜和底蛻膜構(gòu)成。胎兒在子宮中發(fā)育,依靠胎盤從母體取得營養(yǎng),而雙方保持相當(dāng)?shù)莫毩⑿浴LケP還產(chǎn)生多種維持妊娠的激素,是一個重要的內(nèi)分泌器官。有些爬行類和魚類也以胎生方式繁殖后代,胚胎生長出一些輔助結(jié)構(gòu)如卵黃囊、鰓絲等與母體組織緊密結(jié)合,以達(dá)到母子間物質(zhì)的交換,這樣的結(jié)構(gòu)稱假胎盤。羊膜是胎盤的最內(nèi)層,與眼結(jié)膜組織結(jié)構(gòu)相似,含有眼表上皮細(xì)胞,包括結(jié)膜細(xì)胞和角膜上皮細(xì)胞生長所需要的物質(zhì),其光滑,無血管、神經(jīng)及淋巴,具有一定的彈性;在電鏡下,其分為五層:上皮層、基底膜、致密層、纖維母細(xì)胞層和海綿層,羊膜基底膜和羊膜羊膜基質(zhì)層含有大量不同的膠元,主要為Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅶ型膠原和纖維粘連蛋白、層粘連蛋白等成份。羊膜成纖維細(xì)胞主要來自基底膜、致密層、纖維母細(xì)胞層。

方法簡介:

實驗室分離的人羊膜成纖維采用 - 膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測:

實驗室分離的人羊膜成纖維經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基:含FBS、bFGF、Insulin、Penicillin、Streptomycin

換液頻率:每2-3天換液一次

生長特性:貼壁

細(xì)胞形態(tài):成纖維細(xì)胞樣

傳代特性:可傳3-5代左右

消化液:0.25%

培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%CO2,5%

人羊膜成纖維細(xì)胞體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細(xì)胞的優(yōu)良培養(yǎng)狀態(tài)。

人羊膜成纖維細(xì)胞

細(xì)胞傳代及凍存:

細(xì)胞傳代步驟細(xì)胞凍存步驟
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細(xì)胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細(xì)胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標(biāo)識。本公司按每個凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個細(xì)胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:

  ① 組織塊培養(yǎng)法

  組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長。

 ?、?消化培養(yǎng)法

 ?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法

  對于懸浮生長的細(xì)胞,如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

 ?、芷鞴倥囵B(yǎng)

  器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。

人羊膜成纖維細(xì)胞


公司正在出售的產(chǎn)品:

小鼠神經(jīng)營養(yǎng)因子3(-3)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠神經(jīng)營養(yǎng)因子4(-4)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠骨保護(hù)素(OPG)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠B因子(BF)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠水通道蛋白1(AQP-1)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human pemphigus foliaceus (PF) ELISA Kit 人落葉型天皰瘡抗體(PF)試劑盒

HumanCompleme1q,C1qELISAKit 人補體1q(C1q)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

DuckIerleukin1,IL-1試劑盒鴨白介素1(IL-1)試劑盒規(guī)格:96T/48T

載體/DNA產(chǎn)物去0酸化處理試劑盒10

Mousedeoxypyridinoline,DPDELISAKit小鼠脫氧酚/脫氧啉(DPD)試劑盒規(guī)格:96T/48T

AlkB同源蛋白8抗體

泛素蛋白連接酶L3抗體

CD48重組人 CD48 / SLAMF2 / BCM1 蛋白 Protein

0脂酰肌醇蛋白聚糖1(GPC1)重組蛋白 Recombinant Glypican 1 (GPC1)

IDI2重組人 IDI2 蛋白 Protein

CLEC4A Protein Human 重組人 CLEC4A / CLECSF6 / DCIR 蛋白

HA Protein H9N2 重組甲型流感 H9N2 (A/Hong Kong/35820/2009) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白

0脂酰肌醇蛋白聚糖1(GPC1)重組蛋白 Recombinant Glypican 1 (GPC1)

CLEC4A Protein Human 重組人 CLEC4A / CLECSF6 / DCIR 蛋白

CD48重組人 CD48 / SLAMF2 / BCM1 蛋白 Protein

HA Protein H9N2 重組甲型流感 H9N2 (A/Hong Kong/35820/2009) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白

IDI2重組人 IDI2 蛋白 Protein

人羊膜成纖維細(xì)胞大鼠熱休克蛋白β8(HSPβ8)試劑盒 ,英文名: HSPβ8 ELISA Kit

Mouse vascular endothelial cell growth factor D (VEGF-D) ELISA Kit 小鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子D(VEGF-D)試劑盒

RatAquaporin4,AQP-4ELISAKit 大鼠水通道蛋白4(AQP-4)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforGuineapigImmunoglobulinG,IgGELISAKit豚鼠免疫球蛋白G

細(xì)胞長鏈脂酰氧化酶(acyl-CoAoxidase)活性比色法定量試劑盒20

RatTumorSpecificGrowthFacter/tumorsuppliedgroupoffactor,TGSFELISAKit大鼠腫瘤特異生長因子/腫瘤相關(guān)因子(TGSF)試劑盒規(guī)格:96T/48T

原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件:

  一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)

  1、細(xì)胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;

  2、細(xì)胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細(xì)胞/L;

  3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);

  4、 胎牛血清濃度為10%-80%

  5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

  6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,漂??;

  7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應(yīng)將原代細(xì)胞換液;

  8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。

  二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)

  1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細(xì)胞;

  2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行;

  3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進(jìn)行分瓶試驗;

  4、長期培養(yǎng)時,淋巴細(xì)胞中要加入生長因子,白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,以利細(xì)胞生長;

  5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次;

  6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時才能進(jìn)行。


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