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產(chǎn)品簡(jiǎn)介
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 |
|---|---|---|---|
| 貨號(hào) | YS-01X7322 | 主要用途 | 僅供科研研究實(shí)驗(yàn) |
詳細(xì)介紹
商品屬性：
組織來(lái)源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細(xì)胞形態(tài) | 貨號(hào) |
皮膚組織 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 上皮細(xì)胞樣 | YS-01X7322 |
細(xì)胞簡(jiǎn)介：
小鼠表皮角質(zhì)形成分離自皮膚組織；表皮位于動(dòng)物皮膚的外層，由胚胎時(shí)期外胚層形成，具有抗摩擦和抗損傷的作用。表皮是皮膚的淺層結(jié)構(gòu)，由復(fù)層扁平上皮構(gòu)成。從基底層到表面可分為五層，即基底層、棘層、顆粒層、透明層和角質(zhì)層。表皮角質(zhì)形成細(xì)胞是一種能合成角質(zhì)蛋白的上皮細(xì)胞，此類細(xì)胞為表皮的主體，由表皮深層始逐漸增殖、分化，并在成為角化的角質(zhì)細(xì)胞中，細(xì)胞核與細(xì)胞器消失，細(xì)胞亦失去生理功能而脫落。未脫落部分對(duì)機(jī)體尚有保護(hù)作用，故不必在洗擦身體時(shí)用力搓擦，使其過(guò)早脫失。表皮角質(zhì)形成細(xì)胞主要分布于表皮基底層，在上皮程序性死亡后，細(xì)胞產(chǎn)生角化并移向表皮。體外培養(yǎng)的表皮角化細(xì)胞容易導(dǎo)致終末分化，不能充分增殖。角質(zhì)形成細(xì)胞最終產(chǎn)生角質(zhì)蛋白，在其向角質(zhì)細(xì)胞演變過(guò)程中，一般可以分為四層，即基底層、棘層、顆粒層以及角質(zhì)層。有人把前三層或前二層稱為生發(fā)層或馬爾匹基層。此外，在某些部位，特別在掌跖部位，角質(zhì)層下方還可見(jiàn)到透明層。
方法簡(jiǎn)介：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠表皮角質(zhì)形成層細(xì)胞先消化、后-膠原酶混合消化法制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè)：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠表皮角質(zhì)形成經(jīng)PCK免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣
傳代特性 可傳1-2代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細(xì)胞傳代及凍存：
| 細(xì)胞傳代步驟 | 細(xì)胞凍存步驟 |
| 如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例； 1．細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細(xì)胞變圓脫落后，加入2ml培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中，注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種：
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng)。
?、?消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞，如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無(wú)需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性，可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品：
鹽酸克倫特羅檢測(cè)試紙條 Detection of clenberol sip
萊克多巴胺檢測(cè)試紙條（尿樣） Ractopamine test sip (urine)
萊克多巴胺檢測(cè)試紙條(組織) Ractopamine test sip (Organization)
霉素檢測(cè)試紙條（液態(tài)樣品） Chloramphenicol detection test sip (liquid sample)
鴨α干擾素(IFN-α)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human adrenal coex aibody (AAA) ELISA Kit 人抗腎上腺皮質(zhì)抗體(AAA)試劑盒
HumanFolicacid,FAELISAKit 人(FA)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforAChEELISAKit大鼠乙酰酯酶
藥品阿斯巴塘(aspaame)含量薄層色譜法定性試劑盒20次
Mousephospho-exacellularsignal-regulatedkinase,pERKELISAKit小鼠0酸化細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶(pERK)試劑盒規(guī)格：96T/48T
HRAS樣抑制因子2抗體
尾型同源盒轉(zhuǎn)錄因子2重組兔單克隆抗體
NXPH1重組大鼠 Neurexophilin-1 / NXPH1 蛋白 Protein
HIF-1 Beta/ARNT1(Hypoxia-inducible factor-1 Beta 0.5mgHIF-1 Beta/ARNT1(Hypoxia-inducible factor-1 Beta) 缺氧誘導(dǎo)因子1β 抗原
PLA2G7重組人 PLA2G7 / PAFAH 蛋白 Protein
CANX Protein Human 重組人 CANX / Calnexin 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
CD300A Protein Mouse 重組小鼠 CD300A 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
HIF-1 Beta/ARNT1(Hypoxia-inducible factor-1 Beta 0.5mgHIF-1 Beta/ARNT1(Hypoxia-inducible factor-1 Beta) 缺氧誘導(dǎo)因子1β 抗原
CANX Protein Human 重組人 CANX / Calnexin 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
NXPH1重組大鼠 Neurexophilin-1 / NXPH1 蛋白 Protein
CD300A Protein Mouse 重組小鼠 CD300A 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
PLA2G7重組人 PLA2G7 / PAFAH 蛋白 Protein
小鼠表皮角質(zhì)形成細(xì)胞大鼠環(huán)0酸鳥(niǎo)苷(cGMP)試劑盒 ，英文名： cGMP ELISA Kit
Rabbit ai monocyte aibody (AMA) ELISA Kit 兔抗單核細(xì)胞抗體(AMA)試劑盒
登革熱病毒通用型(DFV-U)核酸試劑盒(PCR-熒光探針?lè)?span>) 48T
CLIAKitforMouseInsulin-likegrowthfactorbindingprotein6,IGFBP-6ELISAkit小鼠胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白6
體液還原型(GSH)濃度高效液相色譜定量試劑盒50次
ELISAKitPⅠCP人Ⅰ型前膠原羧基端肽
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件：
一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細(xì)胞要通過(guò)充分漂洗，以盡量除去消化液的毒性；
2、細(xì)胞接種時(shí)濃度要稍大一些，至少為5×108細(xì)胞/L；
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng)；
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
6、在起始的2天中盡量減少振蕩，以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落，漂浮；
7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀，應(yīng)將原代細(xì)胞換液；
8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時(shí)要盡量去除紅細(xì)胞；
2、短期培養(yǎng)，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行；
3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi)，進(jìn)行分瓶試驗(yàn)；
4、長(zhǎng)期培養(yǎng)時(shí)，淋巴細(xì)胞中要加入生長(zhǎng)因子，白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清，以利細(xì)胞生長(zhǎng)；
5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次；
6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行
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