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小鼠肝竇內(nèi)皮細胞

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更新時間:2024-11-04 10:57:03瀏覽次數(shù):269

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
貨號 YS-01X7161 主要用途 僅供科研研究實驗
小鼠肝竇內(nèi)皮細胞公司正在出售的產(chǎn)品:胞外基質(zhì)蛋白3抗體 鋅指蛋白3抗體 轉(zhuǎn)鈷胺素蛋白2抗體 小鼠鞏膜成纖維細胞 大鼠胰島β細胞 IGR-1人黑素瘤細胞 DMS 114人小細胞肺癌細胞

詳細介紹

小鼠肝竇內(nèi)皮細胞

小鼠肝竇內(nèi)皮細胞

商品屬性:

組織來源

產(chǎn)品規(guī)格

細胞形態(tài)

貨號

肝臟組織

5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

內(nèi)皮細胞樣

YS-01X7161

細胞簡介:

小鼠肝竇內(nèi)皮細胞分離自肝臟組織;肝臟是身體內(nèi)以代謝功能為主的一個器官,并在身體里面起著去氧化、儲存肝糖、分泌性蛋白質(zhì)的合成等作用;肝臟也制造消化系統(tǒng)中之膽汁。肝臟是機體內(nèi)臟里最大的器官,位于機體中的腹部位置,在右側(cè)橫隔膜之下,位于膽囊之前端且于右邊腎臟的前方,胃的上方。肝臟是機體消化系統(tǒng)中最大的消化腺,為一紅棕色的V字形器官。肝臟是尿素合成的主要器官,又是新陳代謝的重要器官。肝臟在機體位置和形態(tài)結(jié)構(gòu):肝臟位于右上腹,隱藏在右側(cè)膈下和肋骨深面,大部分肝為肋弓所復蓋,僅在腹上區(qū)、右肋弓間露出并直接接觸腹前壁,肝上面則與膈及腹前壁相接。肝竇內(nèi)皮細胞(SEC)是肝臟內(nèi)所占比例最高的非實質(zhì)細胞,位于肝竇腔與肝細胞之間,具有物質(zhì)轉(zhuǎn)運、吞噬、抗原提呈、免疫耐受等功能。SEC由于擁有一般細胞所沒有的窗孔結(jié)構(gòu)、細胞間連結(jié)松散、內(nèi)皮下缺少基底膜而使其具有高度通透性,從而達到快速交換各種大小分子的目的。肝在遭到多種病原侵襲時,肝竇內(nèi)皮細胞窗孔逐漸減少或消失,內(nèi)皮下基膜形成,產(chǎn)生類似于連續(xù)型毛細血管的結(jié)構(gòu),這一過程稱為肝竇毛細血管化。它由多種因素引起,其過程極復雜,在多種肝病的發(fā)病前期階段均有出現(xiàn),近年來受到廣泛關(guān)注。

方法簡介:

公司實驗室分離的小鼠肝竇內(nèi)皮采用混合酶灌流消化、反復低速離心、密度梯度離心法,并通過內(nèi)皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測:

公司實驗室分離的小鼠肝竇內(nèi)皮經(jīng)CD31CD14免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBVHCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)信息:

包被條件 PLL0.1mg/ml),明膠(0.1%

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態(tài) 內(nèi)皮細胞樣

傳代特性 可傳1-2

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%

小鼠肝竇內(nèi)皮細胞

細胞傳代及凍存:

細胞傳代步驟細胞凍存步驟
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:

  ① 組織塊培養(yǎng)法

  組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。

 ?、?消化培養(yǎng)法

 ?、?懸浮細胞培養(yǎng)法

  對于懸浮生長的細胞,如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

 ?、芷鞴倥囵B(yǎng)

  器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。

小鼠肝竇內(nèi)皮細胞


公司正在出售的產(chǎn)品:

總蛋白定量測定試劑盒(帶標準:BCA法)(比色法)

總超氧化物歧化酶(SOD)測定試劑盒(WST-1法)

乳酸(lacticacid)測定試劑盒(測血清、組織等)(比色法)

羥脯酸(Hyp)測定試劑盒(堿水解法)(測動物血清、組織、尿液)

豬孕酮(PROG)試劑盒

Human erythrocyte membrane protein (EMP) ELISA Kit 人紅細胞膜蛋白(EMP)試劑盒

RabbitComplemefragme3a,C3aELISAKit 兔子補體片斷3a(C3a)試劑盒 進口分裝

CLIAKitforAPF(Humanai-perinuclearfactor)ELISAKit人抗核周因子抗體

血清鈣比色法定量試劑盒50

PorcineIerleukin6,IL-6ELISAKit豬白介素6(IL-6)試劑盒

SBNO2蛋白抗體

胸苷激酶2抗體

IL1B重組食蟹猴 IL-1 beta / IL1B 蛋白 Protein

MMP-9(matrix metalloproteinase 9 0.5mgMMP-9(matrix metalloproteinase 9) 基質(zhì)金屬蛋白酶-9(抗原)

WFDC2重組人 WAP5 / WFDC2 / HE4 蛋白 (His 標簽) Protein

BTK Protein Human 重組人 Bruton Tyrosine Kinase / BTK Kinase 蛋白 (His 標簽)

HGF Protein Mouse 重組小鼠 HGF / Hepatocyte Growth Factor 蛋白 (His 標簽)

泛素激活酶樣蛋白(UBE1L)重組蛋白 Recombinant Ubiquitin Activating Enzyme E1 Like Protein (UBE1L)

BTK Protein Human 重組人 Bruton Tyrosine Kinase / BTK Kinase 蛋白 (His 標簽)

NXPH1重組小鼠 Neurexophilin-1 / NXPH1 蛋白 (His 標簽) Protein

IGFBP2 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 IGFBP2 蛋白 (His 標簽)

PFN2重組人 Profilin 2 / PFN2 蛋白 (His 標簽) Protein

小鼠肝竇內(nèi)皮細胞大鼠果糖胺(FRA)試劑盒 ,英文名: FRA ELISA Kit

Rabbit inducible niic oxide syhase (iNOS) ELISA Kit 兔誘導型合成酶(iNOS)試劑盒

新型甲型H1N1流感病毒(IAV-H1N1)核酸試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T

CLIAKitforMMP-8(HumanMaixmetalloproteinase8/Neuophilcollagenase)ELISAkit人基質(zhì)金屬蛋白酶8/粒細胞膠原酶

體液基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP-1)活性熒光定量試劑盒20

ELISAKitTM犬血栓調(diào)節(jié)蛋白

原代細胞的培養(yǎng)條件:

  一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)

  1、細胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;

  2、細胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細胞/L;

  3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);

  4、 胎牛血清濃度為10%-80%

  5、應在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

  6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落,漂??;

  7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應將原代細胞換液;

  8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,應將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液。

  二、懸浮細胞培養(yǎng)

  1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞;

  2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行;

  3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進行分瓶試驗;

  4、長期培養(yǎng)時,淋巴細胞中要加入生長因子,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,以利細胞生長;

  5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次;

  6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行


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