化工儀器網(wǎng)
詳細(xì)介紹
本網(wǎng)站銷售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用，不直接用于食品、藥品、臨床或動物的診斷或治療！
產(chǎn)品名稱：小鼠浦肯野細(xì)胞
組織來源：小腦組織
產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)信息：
包被條件 PLL（0.1mg/ml）
培養(yǎng)基 含脂質(zhì)濃縮液、BSA、Monothioglycerol、Transferrin、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 神經(jīng)元細(xì)胞樣
傳代特性 不增殖；不傳代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細(xì)胞簡介：
小鼠浦肯野分離自小腦皮質(zhì)組織；小腦的表面被覆著一層灰質(zhì)，叫小腦皮質(zhì)，小腦皮質(zhì)分為3層，從表及里分別為分子層、浦肯野細(xì)胞層和顆粒細(xì)胞層。皮質(zhì)里含有星狀細(xì)胞、籃狀細(xì)胞、浦肯野細(xì)胞、高爾基細(xì)胞和顆粒細(xì)胞等5種神經(jīng)元。浦肯野細(xì)胞發(fā)出的軸突組成小腦皮質(zhì)的傳出纖維，終止于小腦白質(zhì)內(nèi)的神經(jīng)核。浦肯野細(xì)胞（Purkinje cell）是從小腦皮質(zhì)發(fā)出的能夠傳出沖動的神經(jīng)元。人的小腦皮質(zhì)約有1500萬個(gè)浦肯野細(xì)胞。浦肯野細(xì)胞還廣泛分布于心室。顯著的電生理特點(diǎn)是傳導(dǎo)性強(qiáng)，傳導(dǎo)速度快，可達(dá)4000mm/s。屬快反應(yīng)自律型細(xì)胞，具有舒張期自動除極化的性能，因而有自律性，但自律性強(qiáng)度明顯低于竇房結(jié)P細(xì)胞。這類細(xì)胞常常平行排列，細(xì)胞內(nèi)電阻低，只有心室細(xì)胞的1/3。小腦：浦肯野細(xì)胞是小腦皮質(zhì)中最大的神經(jīng)元，細(xì)胞體呈梨形，頂端發(fā)出2~3條粗大的主樹突，向外伸入分子層。主樹突沿途分支繁茂，形如展開的、扁薄的扇形，鋪展在與小腦葉片長軸垂直的平面上。樹突分支上有大量的樹突棘，與傳入纖維構(gòu)成廣泛的突觸聯(lián)系，接受傳入小腦的全部信息。軸突由細(xì)胞底部（與主樹突相對方向）發(fā)出，細(xì)長，離開胞體不遠(yuǎn)便形成有髓神經(jīng)纖維，向內(nèi)經(jīng)顆粒層離開皮質(zhì)進(jìn)入白質(zhì)，組成小腦皮質(zhì)的傳出纖維，終止于小腦內(nèi)部的神經(jīng)核團(tuán)。一個(gè)浦肯野細(xì)胞的軸突約形成500個(gè)終末膨大，約與小腦深部核團(tuán)的35個(gè)神經(jīng)元形成突觸。心臟浦肯野細(xì)胞常常平行排列，幾個(gè)細(xì)胞互相以漿膜連接排成一個(gè)小束，小束外包繞著基底膜。細(xì)胞內(nèi)含肌原纖維很少，胞漿區(qū)內(nèi)充滿糖原顆粒、線粒體和肌漿網(wǎng)，細(xì)胞內(nèi)電阻低，只有心室細(xì)胞的1/3。浦肯野細(xì)胞內(nèi)無橫管系統(tǒng)，但膜電容比收縮細(xì)胞大，可能是由于其閏盤結(jié)構(gòu)廣泛而復(fù)雜，提供了較大的表面積的緣故。浦肯野細(xì)胞閏盤的主要成分是縫隙連接，粒著膜占的比例很少，這些可能是構(gòu)成浦肯野細(xì)胞傳導(dǎo)快的形態(tài)學(xué)基礎(chǔ)。
方法簡介：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠浦肯野采用消化法結(jié)合神經(jīng)元專用培養(yǎng)基、化學(xué)試劑抑制法篩選制備而來，細(xì)胞總量約為5×105cells/瓶
質(zhì)量檢測：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠浦肯野經(jīng)Neph3免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)步驟：
一、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中），培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
二、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a）、對于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2. 加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打細(xì)胞，脫落后吸出，在1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 按5-6ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)液，將細(xì)胞懸液按1：2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中。
b）、對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄上清液，補(bǔ)加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中。
收到細(xì)胞如何處理？
1、首先，觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有，請拍照，并及時(shí)與技術(shù)支持聯(lián)系（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）。
2、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題，部分貼壁細(xì)胞會有少量從瓶壁脫落；先不要打開培養(yǎng)瓶蓋，將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時(shí)，以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
3、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如貼壁特性（貼壁/懸?。?、細(xì)胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后，取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶，鏡檢、拍照，記錄細(xì)胞狀態(tài)（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）；建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后，定期拍照、記錄細(xì)胞生長狀態(tài)。
5、貼壁細(xì)胞：若細(xì)胞生長密度超過80%，可正常傳代；若未超過80%，移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基，預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng)，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作，瓶蓋可稍微擰松。
6、懸浮細(xì)胞：將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi)，1200rpm離心5min，離心后上清培養(yǎng)基可收集備用，管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時(shí)，若細(xì)胞密度超過80%，可將細(xì)胞懸液分至2個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)，補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml；若細(xì)胞密度未超過80%，將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng)，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時(shí)再進(jìn)行傳代操作
公司正在出售的產(chǎn)品：
小鼠血管性血友病因子 英文名稱： von Willebrand Factor 規(guī)格： 英文縮寫： VWF
蠶多巴胺 英文名稱： Bombyx Dopamine 規(guī)格： 英文縮寫： DPA
英文名稱： Total Niic Oxide 規(guī)格： 英文縮寫： NO
骨橋素/骨橋蛋白 英文名稱： Osteopoin 規(guī)格： 英文縮寫： OPN
小鼠心肌營養(yǎng)素1(CT-1)ELISA 試劑盒 96T/48T
Rat high mobility group protein 1 (HMG-1) ELISA Kit 大鼠高遷移率族蛋白1(HMG-1)試劑盒
Humanadenosinedeaminase,ADAELISAKit 人腺苷脫氨酶(ADA)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Chickencarbonicanhydrase,CA試劑盒雞酶(CA)試劑盒規(guī)格：96T/48T
載玻片細(xì)胞CASPASE-10蛋白表達(dá)熒光顯微鏡試劑盒10/20次
MouseHexokinase,HKELISAKit小鼠己糖激酶(HK)試劑盒規(guī)格：96T/48T
LIM結(jié)構(gòu)域蛋白1抗體
FAM205A蛋白抗體
BST2重組小鼠 TETHERIN / BST2 / CD317 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
半乳糖凝集素8(GAL8)重組蛋白 Recombinant Galectin 8 (GAL8)
IL22重組人 IL22 / IL-22 / Interleukin 22 蛋白 Protein
CD82 Protein Human 重組人 CD82 / KAI-1 蛋白
TNFSF13B Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 BLyS / TNFSF13B / BAFF 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
AM (Adrenomedullin; ADM 0.1mgAM (Adrenomedullin; ADM) 腎上腺髓質(zhì)素(多肽抗原)
CD82 Protein Human 重組人 CD82 / KAI-1 蛋白
SLAMF6重組小鼠 SLAMF6 / Ly108 蛋白 Protein
TLR2 Protein Rat 重組大鼠 TLR2 蛋白
ENPP5重組人 ENPP5 蛋白 Protein
小鼠浦肯野細(xì)胞大鼠鈣非依賴型0脂酶A2(iPLA2)試劑盒 ，英文名： iPLA2 ELISA Kit
Pig two amine oxidase (DAO) ELISA Kit 豬氧化酶(DAO)試劑盒
轉(zhuǎn)基因植物EPSPS基因核酸試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T
CLIAKitforMCAb(Humanmelanocyteaibody)ELISAKit人黑色素細(xì)胞抗體
體液血管緊張素Ⅰ轉(zhuǎn)化酶2(ACE2)活性比色法定量試劑盒20次
ELISAKitβ-EP馬β內(nèi)啡肽
化工儀器網(wǎng)