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產(chǎn)品簡介
毛樣枝孢霉PCR檢測試劑盒價(jià)格運(yùn)輸及保存：低溫運(yùn)輸，-20℃保存，有效期一年。使用本試劑盒提供的陽性對照時(shí)，由于其濃度較高，一定要注意不要污染其他試劑和成分。在專門的區(qū)域操作。
詳細(xì)介紹
實(shí)驗(yàn)過程：
一、毛樣枝孢霉PCR檢測試劑盒價(jià)格試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2．對應(yīng)目的基因的特異引物（在PCR反應(yīng)中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物?？梢允荄NA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此，擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步驟
1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1（10pM） 2μl
引物2（10PM） 2μ
Taq酶（2U/μl） 1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl） 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2．調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，后在72℃ 保溫7min。
3．結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4．PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測
三、注意事項(xiàng)
１．PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個(gè)沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進(jìn)行。好設(shè)立一個(gè)的PCR實(shí)驗(yàn)室。
２．純化模板所選用的方法對污染的風(fēng)險(xiǎn)有影響。一般而言，只要能夠得到可靠的結(jié)果，純化的方法越簡單越好。
３．所有試劑都應(yīng)該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應(yīng)戴手套。
產(chǎn)品名稱 | |
英文名稱 | Cladosporium trichoidesPCR |
貨號 | YS30578-R |
原理是由一對引物介導(dǎo)，能在動(dòng)植物體外對特定基因(DNA)片斷進(jìn)行快速酶促擴(kuò)增，經(jīng)過n個(gè)熱循環(huán)擴(kuò)增，擴(kuò)增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0＜E＜1,擴(kuò)增效率＝倍，使得檢測擴(kuò)增產(chǎn)物中的特定基因成為可能。
特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為：
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合；
②堿基配對原則；
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性；
④靶基因的特異性與保守性。
適用范圍【參考值】
1.試劑盒有效性判定：
（1）陽性對照：有典型S型擴(kuò)增曲線或Ct值≤35。
（2）陰性對照：Ct值＞38或無Ct值，線形為直線或輕微斜線，無指數(shù)增長期。
2.標(biāo)本結(jié)果判定：
（1）陽性：標(biāo)本檢測結(jié)果Ct值≤35或有明顯指數(shù)增長期。
（2）可疑：標(biāo)本檢測結(jié)果Ct值在35～38范圍內(nèi)。此時(shí)應(yīng)對標(biāo)本進(jìn)行重復(fù)檢測，如重復(fù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果Ct值仍在35～38范圍內(nèi)，有明顯指數(shù)增長期，則判定為陽性，否則為陰性。
（3）陰性：標(biāo)本檢測結(jié)果Ct值＞38或無Ct值。
PCR實(shí)驗(yàn)步驟:
典型的PCR由（1）高溫變性模板；（2）引物與模板退火；（3）引物沿模板延伸三步反應(yīng)組成一個(gè)循環(huán)，通過多次循環(huán)反應(yīng)，使目的DNA得以迅速擴(kuò)增。
其主要步驟是：
將待擴(kuò)增的模板DNA置高溫下（通常為93℃-94℃）使其變性解成單鏈；
人工合成的兩個(gè)寡核苷酸引物在其合適的復(fù)性溫度下分別與目的基因兩側(cè)的兩條單鏈互補(bǔ)結(jié)合，兩個(gè)引物在模板上結(jié)合的位置決定了擴(kuò)增片段的長短；
耐熱的DNA聚合酶（Taq酶）在72℃將單核苷酸從引物的3’端開始摻入，以目的基因?yàn)槟０鍙?’→3’方向延伸，合成DNA的新互補(bǔ)鏈。
下列是公司正在*的產(chǎn)品：
Calpain 2 antibody [1E8]原裝、分裝生物梅里埃API細(xì)菌鑒定試條
Syndecan-1 antibody [B-A38]原裝、分裝酵母粉|酵母浸粉|酵母提取物（OXOID）
Chromogranin A antibody [LK2H10 + PHE5]原裝、分裝大豆蛋白胨|植物蛋白胨|蛋白胨
SOCS3 antibody原裝、分裝β-葡萄糖苷酶/β-糖苷酶
TRPM7 antibody原裝、分裝蛋白酶K
Human activated Notch1 peptide原裝、分裝性酶/性酯酶
MelanA antibody [DT101 + BC199]原裝、分裝超氧化物歧化酶/過氧化物歧化酶
Melanoma antibody [HMB45 + M2-7C10 + M2-9E3]原裝、分裝復(fù)合蛋白酶/復(fù)合酶
Melanoma antibody [HMB45 + M2-7C10 + M2-9E3 + T311]原裝、分裝對基苯基-α-D-吡喃半乳糖苷Recombinant human Aurora A protein原裝、分裝高真空硅脂(無色)
Recombinant human B Raf + Cdc37 protein原裝、分裝高真空硅脂(無色)
Recombinant human GSK3 alpha protein原裝、分裝醇(農(nóng)殘級,≥99.8%)
Recombinant human NEK2 protein原裝、分裝異辛(農(nóng)殘級,>99.5%(GC))
Recombinant human PLK3 protein原裝、分裝異辛(農(nóng)殘級,>99.5%(GC))
Recombinant human Chk2 protein原裝、分裝醇胺(色譜固定液,30℃)
Recombinant human Eph receptor B2 protein原裝、分裝醇(for HPLC,≥99.9%)
Recombinant human Flt3 / CD135 protein原裝、分裝醇(for HPLC,≥99.9%)
Recombinant human Met (c-Met) protein原裝、分裝醇(for HPLC,≥99.9%)
毛樣枝孢霉PCR檢測試劑盒價(jià)格UBXN6/UBXD1 antibody [2F8-24]原裝、分裝人乳頭狀瘤病毒-E6-M
Native Human Protein C - DEGR (active site blocked)原裝、分裝人乳頭狀瘤病毒-E6-N
Native cow Protein C原裝、分裝人乳頭狀瘤病毒-E7-C
Native Human Alpha Thrombin protein原裝、分裝人乳頭狀瘤病毒-E7-N
Native Human Alpha Thrombin protein原裝、分裝熱休克蛋白（3-13）
Native human Beta Thrombin protein原裝、分裝單純胞疹病毒-1糖蛋白（gB）(497-507)
Native human Gamma Thrombin protein原裝、分裝單純胞疹病毒-1-酰胺UL26開放閱讀框（242-255）
Native human Factor IXa protein原裝、分裝單純胞疹病毒-gB2（498-505）
Native human Factor IXa protein原裝、分裝人巨細(xì)胞病毒次晶蛋白酶底物（M位點(diǎn)）