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產(chǎn)品簡(jiǎn)介
腦多頭囊蟲PCR檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書運(yùn)輸及保存：低溫運(yùn)輸，-20℃保存，有效期一年。使用本試劑盒提供的陽(yáng)性對(duì)照時(shí)，由于其濃度較高，一定要注意不要污染其他試劑和成分。在專門的區(qū)域操作。
詳細(xì)介紹
腦多頭囊蟲PCR檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書原理是由一對(duì)引物介導(dǎo)，能在動(dòng)植物體外對(duì)特定基因(DNA)片斷進(jìn)行快速酶促擴(kuò)增，經(jīng)過(guò)n個(gè)熱循環(huán)擴(kuò)增，擴(kuò)增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0＜E＜1,擴(kuò)增效率＝倍，使得檢測(cè)擴(kuò)增產(chǎn)物中的特定基因成為可能。
產(chǎn)品名稱 | |
英文名稱 | Coenurus cerebralisPCR |
貨號(hào) | YS30601-R |
特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為：
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合；
②堿基配對(duì)原則；
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性；
④靶基因的特異性與保守性。
適用范圍【參考值】
1.試劑盒有效性判定：
（1）陽(yáng)性對(duì)照：有典型S型擴(kuò)增曲線或Ct值≤35。
（2）陰性對(duì)照：Ct值＞38或無(wú)Ct值，線形為直線或輕微斜線，無(wú)指數(shù)增長(zhǎng)期。
2.標(biāo)本結(jié)果判定：
（1）陽(yáng)性：標(biāo)本檢測(cè)結(jié)果Ct值≤35或有明顯指數(shù)增長(zhǎng)期。
（2）可疑：標(biāo)本檢測(cè)結(jié)果Ct值在35～38范圍內(nèi)。此時(shí)應(yīng)對(duì)標(biāo)本進(jìn)行重復(fù)檢測(cè)，如重復(fù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果Ct值仍在35～38范圍內(nèi)，有明顯指數(shù)增長(zhǎng)期，則判定為陽(yáng)性，否則為陰性。
（3）陰性：標(biāo)本檢測(cè)結(jié)果Ct值＞38或無(wú)Ct值。
PCR實(shí)驗(yàn)步驟:
典型的PCR由（1）高溫變性模板；（2）引物與模板退火；（3）引物沿模板延伸三步反應(yīng)組成一個(gè)循環(huán)，通過(guò)多次循環(huán)反應(yīng)，使目的DNA得以迅速擴(kuò)增。
其主要步驟是：
將待擴(kuò)增的模板DNA置高溫下（通常為93℃-94℃）使其變性解成單鏈；
人工合成的兩個(gè)寡核苷酸引物在其合適的復(fù)性溫度下分別與目的基因兩側(cè)的兩條單鏈互補(bǔ)結(jié)合，兩個(gè)引物在模板上結(jié)合的位置決定了擴(kuò)增片段的長(zhǎng)短；
耐熱的DNA聚合酶（Taq酶）在72℃將單核苷酸從引物的3’端開始摻入，以目的基因?yàn)槟０鍙?’→3’方向延伸，合成DNA的新互補(bǔ)鏈。
實(shí)驗(yàn)過(guò)程：
一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2．對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物（在PCR反應(yīng)中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制，而不能從無(wú)到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物?？梢允荄NA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此，擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步驟
1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1（10pM） 2μl
引物2（10PM） 2μ
Taq酶（2U/μl） 1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl） 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋，不加或添加石蠟油。
2．調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，后在72℃ 保溫7min。
3．結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4．PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)
三、注意事項(xiàng)
１．PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個(gè)沒(méi)有DNA污染的干凈環(huán)境中進(jìn)行。好設(shè)立一個(gè)的PCR實(shí)驗(yàn)室。
２．純化模板所選用的方法對(duì)污染的風(fēng)險(xiǎn)有影響。一般而言，只要能夠得到可靠的結(jié)果，純化的方法越簡(jiǎn)單越好。
３．所有試劑都應(yīng)該沒(méi)有核酸和核酸酶的污染。操作過(guò)程中均應(yīng)戴手套。
下列是公司正在*的產(chǎn)品：
RbAp48 antibody原裝、分裝Adenine 腺嘌呤
p55/DCAF1 antibody - ChIP Grade原裝、分裝AEC
HDAC1 antibody - ChIP Grade原裝、分裝Agar,Powder 瓊脂粉（內(nèi)附說(shuō)明書）
Human Histone H3 (mono methyl K9) peptide原裝、分裝瓊脂糖（西班牙分裝）
Human Histone H3 (di methyl K9) peptide原裝、分裝Agarose 瓊脂糖(西班牙原裝）
Human Histone H3 (tri methyl K9) peptide原裝、分裝Agarose 瓊脂糖(西班牙分裝）含說(shuō)明
Histone H3 (mono methyl R2) peptide原裝、分裝Agarose L.M.P 低熔點(diǎn)瓊脂糖（內(nèi)含說(shuō)明）
Human Histone H3 (mono methyl K27) peptide原裝、分裝Agarose L.M.P 低熔點(diǎn)瓊脂糖（附說(shuō)明）
Human Histone H3 (di methyl K27) peptide原裝、分裝Ammonium Persulfate 過(guò)胺Histone H2A (acetyl K5) antibody [EP856Y]原裝、分裝N-基吡咯（NMP）(standard for GC,≥99.6%(GC))
Histone H2A (acetyl K5) antibody [EP856Y]原裝、分裝異醇(standard for GC,≥99.5%(GC))
Recombinant Human JNK3 protein原裝、分裝基環(huán)己(Standard for GC,≥99.8%(GC))
Recombinant Human MK2 protein原裝、分裝酯(GCS,≥99.9% (GC))
Recombinant Human MK-3 protein原裝、分裝基異基(Standard for GC,>99.5%(GC))
Recombinant Human p38 protein原裝、分裝醚(Standard for GC,>99.7%(GC))
Recombinant Human p38 protein原裝、分裝二二醇二醚(standard for GC,≥99.5%(GC))
Recombinant Human MAPK11 protein原裝、分裝異戊(standard for GC,≥99.0%(GC))
Recombinant Human MAPK 12 protein原裝、分裝異(Standard for GC,>99.5%(GC))
腦多頭囊蟲PCR檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書TMPRSS2 antibody原裝、分裝小型胃泌素Ⅰ，人
GPR142 antibody原裝、分裝神秘果蛋白（1-20）
LPO antibody原裝、分裝MKK p2
MRP8 antibody原裝、分裝MLC –衍生肽
MTHFS antibody原裝、分裝基質(zhì)金屬蛋白酶底物Ⅰ
OTUB1 antibody原裝、分裝基質(zhì)金屬蛋白酶底物Ⅰ，熒光
liver FABP antibody [2G4]原裝、分裝基質(zhì)金屬蛋白酶-1底物Ⅰ，熒光
RASSF3 antibody原裝、分裝基質(zhì)金屬蛋白酶-2/基質(zhì)金屬蛋白酶-9底物Ⅰ，熒光
ZPI antibody原裝、分裝基質(zhì)金屬蛋白酶-2/基質(zhì)金屬蛋白酶-9抑制Ⅲ