詳細(xì)介紹
細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn):
1.研究的對(duì)象是活細(xì)胞
在實(shí)驗(yàn)過程中,根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力,并可長時(shí)間監(jiān)控、檢測甚至定量評(píng)估一部分活細(xì)胞的情況,包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動(dòng)等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件,可以根據(jù)實(shí)際需要進(jìn)行人為的控制,同時(shí),可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察,這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性
通過細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后,所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞,需要時(shí),可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄
產(chǎn)品僅用于科研采用各種研究技術(shù):如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備。
產(chǎn)品名稱 | Ar 1193 感受態(tài)細(xì)胞 |
規(guī)格 | 100ul*10/100ul*50/100ul*100 |
貨號(hào) | YSRIBIO9750 |
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細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
操作方法:
1. 感受態(tài)細(xì)胞從-80℃拿出,迅速插入冰中,5分鐘后待菌塊融化,加入目的DNA (質(zhì)?;蜻B接產(chǎn)物) 并用手EP管底輕輕混勻 (避免用槍吸打),冰中靜置25分鐘。
2. 42℃水浴熱激45秒,迅速放回冰上并靜置2分鐘,晃動(dòng)會(huì)降低轉(zhuǎn)化效率。
3. 向離心管中加入700μl不含抗生素的無菌培養(yǎng)基 (2YT或LB),混勻后37℃,200 rpm復(fù)蘇60分鐘。
4. 5000rpm離心一分鐘收菌,留取100μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應(yīng)抗生素的2YT或LB培養(yǎng)基上。
5. 將平板倒置放于37℃培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)。如果進(jìn)行藍(lán)白斑篩選操作,將平板放37℃培養(yǎng)至少13 h。
基本共性:
1、所有的細(xì)胞表面均有由磷脂雙分子層與鑲嵌蛋白質(zhì)及糖被構(gòu)成的生物膜,即細(xì)胞膜。
2、所有的細(xì)胞都含有兩種核酸:即DNA與RNA。
3、作為遺傳信息復(fù)制與轉(zhuǎn)錄的載體。
4、作為蛋白質(zhì)合成的機(jī)器—核糖體,毫無例外地存在于一切細(xì)胞內(nèi),核糖體,是蛋白質(zhì)合成的機(jī)器,在細(xì)胞遺傳信息流的傳遞中起重要作用。
5、所有細(xì)胞的增殖都以一分為二的方式進(jìn)行分裂。
6、能進(jìn)行自我增殖和遺傳
7、新陳代謝
8、細(xì)胞都具有運(yùn)動(dòng)性,包括細(xì)胞自身的運(yùn)動(dòng)和細(xì)胞內(nèi)部的物質(zhì)運(yùn)動(dòng)
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抗谷氨酸受體IgG抗體檢測試劑盒 英文名稱:8-Hydroxy-9,10-diisobutyryloxythymol 純度:≥98%
基質(zhì)金屬蛋白酶1酶原檢測試劑盒 英文名稱:Thymol 純度:≥98%
阿米巴原蟲檢測試劑盒 英文名稱:3-Hydroxy-p-menth-1-en-6-one 純度:≥99%
弓蛔蟲IgG抗體檢測試劑盒 英文名稱:Euglobal Ia1 純度:≥98%
人類嗜T淋巴細(xì)胞V型病毒檢測試劑盒 英文名稱:9-Hydroxythymol 純度:≥98.0%
B7-H4檢測試劑盒 英文名稱:3-Hydroxyperillaldehyde 純度:≥98%
葡糖氨基聚糖檢測試劑盒 英文名稱:8-Hydroxythymol 純度:≥97%
多配體聚糖-1檢測試劑盒 英文名稱:Thymyl 2-methylbutyrate 純度:≥97%
Ras三磷酸鳥苷酶激活樣蛋白檢測試劑盒 英文名稱:Euglobal Ia2 純度:≥97%
血管抑素檢測試劑盒 英文名稱:Cantharidin 純度:≥98%
吡啶并林檢測試劑盒 英文名稱:Menthol 純度:≥98%
磷脂酰肌醇抗體檢測試劑盒 英文名稱:Debenzoylgalloylpaeoniflorin 純度:≥97%
抗磷脂酰絲氨酸凝血酶原復(fù)合物IgG抗體檢測試劑盒 英文名稱:Camphor 純度:≥97%
抗磷脂酰絲氨酸凝血酶原復(fù)合物IgM抗體檢測試劑盒 英文名稱:(+)-Borneol 純度:≥95%
凝血素IgG抗體檢測試劑盒 英文名稱:Borneol 純度:≥99%
凝血素IgM抗體檢測試劑盒 英文名稱:Paeonilactone A 純度:≥97%
Ar 1193 感受態(tài)細(xì)胞SH2B1 SH2B蛋白一抗 * 0.2ml 13Acetyl9dihydrobaccatin III
Coronin 1a 肌動(dòng)蛋白結(jié)合蛋白CORO1A一抗 * 0.2ml Dihydrotanshinone
Nitrotyrosine 基酪氨一抗 * 0.2ml Boron solution
XDH/Xanthine Oxidase 氧化酶一抗 * 0.1ml Boron solution
phosphoCstF64(Ser498) 化細(xì)胞分裂相關(guān)蛋白CSTF64一抗 * 0.1ml Bismuth solution
Hemoglobin Beta 血紅蛋白β一抗 * 0.2ml Copper solution
Desmuslin 中間絲蛋白βsynemin一抗 * 0.2ml Copper solution
G Protein alpha Inhibitor 1 G蛋白α抑制蛋白1一抗 * 0.2ml Chromium solution