詳細(xì)介紹
具有如下優(yōu)點(diǎn):
一、高效、靈敏、特異的抗體;
二、穩(wěn)定的重復(fù)性和可靠性;
三、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相載體;
四、適用血清、血漿、組織勻漿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等等多種標(biāo)本類(lèi)型;
五、性?xún)r(jià)比非常好,節(jié)省實(shí)驗(yàn)經(jīng)費(fèi)。
產(chǎn)品名稱(chēng) | TGF-β1ElisaKit |
英文名稱(chēng) | Porcine transforming growth factor β1, TGF-β1 Elisa Kit |
規(guī)格 | 48T/96T |
測(cè)定步驟:
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準(zhǔn)確
3.管底加樣,不能加在管壁上
4.加樣時(shí)不能產(chǎn)生氣泡
2.溫浴
1.加標(biāo)本后和加結(jié)合物后,應(yīng)立即放入按規(guī)定的反應(yīng)溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應(yīng)疊在一起。
3.為避免蒸發(fā),板上應(yīng)加蓋,或?qū)迤椒旁诘撞繅|有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后,反應(yīng)的時(shí)間和溫度通常不做嚴(yán)格要求。 如室溫高于20℃,ELISA板可避光放在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上,以便 不時(shí)觀察,待對(duì)照管顯色適當(dāng)時(shí),即可終止酶反應(yīng)。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過(guò)程中不是反應(yīng)步驟,但卻 是決定實(shí)驗(yàn)成敗的關(guān)鍵。
2.目的是洗去反應(yīng)液中沒(méi)有與固相抗原或 抗體結(jié)合的物質(zhì)以及在反應(yīng)過(guò)程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。
4.讀板
1.陰性對(duì)照顏色極淺,在定性測(cè)定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標(biāo)儀測(cè)定結(jié)果,準(zhǔn)確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標(biāo)儀的質(zhì) 量和軟件的算法。
試劑和樣本的控制方法:
一、試劑
1.試劑的選擇:國(guó)家明確要求要采用批批檢定的形式對(duì)ELISA試劑嚴(yán)格把關(guān),我司嚴(yán)格按照進(jìn)行,已獲得國(guó)家承認(rèn)的“三證”,每一個(gè)產(chǎn)品都有對(duì)應(yīng)的批號(hào),只要客戶(hù)提前下單,我們就能為您提供新批次的產(chǎn)品,不必?fù)?dān)心會(huì)有過(guò)期的試劑。我司的試劑,值得您選擇。
2.試劑的準(zhǔn)備:先將試劑盒先從冰箱中拿出來(lái),在室溫下放置20-30 min后,再進(jìn)行測(cè)定,使試劑盒在使用前與室溫平衡,這樣做的目的能使反應(yīng)微孔內(nèi)的溫度較快地達(dá)到所需的溫度,以滿(mǎn)足后面的測(cè)定需求。
二、樣本
1.內(nèi)源性干擾因素:包括類(lèi)風(fēng)濕因子、補(bǔ)體、高濃度的非特異免疫球蛋白、異嗜性抗體、某些自身抗體等;
類(lèi)風(fēng)濕因子的控制方法:
①用F(ab)2替代完整的IgG;
②標(biāo)本用聯(lián)有熱變性IgG的固相吸附劑處理;
③檢測(cè)抗原時(shí),可用加入到標(biāo)本稀釋液中使RF降解;
補(bǔ)體的控制方法:
①用EDTA稀釋標(biāo)本;
②56℃ 30 min加熱血清使C1q滅活;
2.外源性干擾因素:包括標(biāo)本溶血、細(xì)菌污染、保存時(shí)間過(guò)長(zhǎng)或凝固不全等;
控制方法:采血時(shí)規(guī)范操作,采集的血液勿用力震蕩,以防溶血;收集標(biāo)本時(shí)采用無(wú)菌試管,經(jīng)檢測(cè)后再低溫凍存;保存時(shí)間不宜過(guò)久,檢測(cè)時(shí)盡量采用新鮮標(biāo)本;對(duì)于凝固不全的血標(biāo)本可適當(dāng)加入抗凝劑,并放入37℃水中1 h,待充分凝固后再離心分離血清。
SarcosineOxidase肌酶5克BR,5u/ul,99%
SarcosinemethylesterHC1N-基基酯鹽鹽5克BR,99%
SarcosineethylesterHC1N-基基酯鹽鹽1克BR,99%
SarcosineN-基甘25克BR,99%
Saponin皂苷250毫升CP,
Samariumoxide三二釤10克BR,
Sallcylicacid柳100克CP
SalicylanilideN-水楊酰500毫克高,
Salicylaldoxime鄰羥基肟100毫克CP,99%
Salicylalcohol2-羥基25克3N
SaikosaponinD柴胡皂甙D25克BR,粘度1000mPa.s
SaikosaponinC柴胡皂甙C10克BR,粘度500mPa.s
SaikosaponinB1柴胡皂甙B1100克BR,粘度200mPa.s
SaikosaponinA柴胡皂甙A25克BR,粘度100mPa.s
SAHHS-腺苷高半胱水解酶100毫克BR,20u/ul
TGF-β1ElisaKitDIALLYL MALEATE馬來(lái)二999213
2,2,2Trifluoroethyl methacrylate三352874
ACID RED 1偶熒光桃紅3734676
2CHLORO6IODOTOLUENE2642048113
2Amino2(hydroxymethyl)1,3propanediol hydrochloride三(羥)氨1185531
Trimethoxymethane原三149735
OBenzylLtyrosine benzyl ester hydrochlorideO芐L酪氨芐52142015
17bhydroxyestr4en3one 17(3phenylpropionate)諾龍62908
DFRUCTOSE 6PHOSPHATE DISODIUM SALTD糖6二26177866
Prochloraz咪鮮67747095
Cisplatin順鉑15663271
COPPER(II) NITRATE HYDRATE銅水合物13778319
Diphenylmethane二101815
(1S)()Camphanic acid(1S)()樟腦13429839
PENTAFLUOROPHENYLHYDRAZINE五肼828739
牡荊素; 5, 7, 4'三羥黃 3681934 訂購(gòu)|咨詢(xún) 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支
金石蠶苷; 金石蠶甙 94079819 訂購(gòu)|咨詢(xún) 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支
姜 122485 訂購(gòu)|咨詢(xún) 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支
表兒茶素 訂購(gòu)|咨詢(xún) 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支
表沒(méi)食子兒茶素 訂購(gòu)|咨詢(xún) 規(guī)格: HPLC≥98%,10mg/支
柚皮苷 10236472 訂購(gòu)|咨詢(xún) 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支
甜菜 590465 訂購(gòu)|咨詢(xún) 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支
脫水穿心蓮內(nèi); 穿心蓮素 134418283 訂購(gòu)|咨詢(xún) 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支
金絲桃苷;槲皮素3半糖甙 482360 訂購(gòu)|咨詢(xún) 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支
蒿本內(nèi);藁本內(nèi) 4431010 訂購(gòu)|咨詢(xún) 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支
()新 訂購(gòu)|咨詢(xún) 規(guī)格: 200mg
2氨4,6雙環(huán)氨三 對(duì)照品 訂購(gòu)|咨詢(xún) 規(guī)格: 200mg
辛葡 對(duì)照品 訂購(gòu)|咨詢(xún) 規(guī)格: 200mg;99.9%
抗?fàn)钕龠^(guò)物酶抗體 訂購(gòu)|咨詢(xún) 規(guī)格: 430IU
棕櫚;Palmitic acid 訂購(gòu)|咨詢(xún) 規(guī)格: 200mg
操作步驟:
1)使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,以免加樣時(shí)加入大量的氣泡,產(chǎn)生加樣上的誤差。
2)根據(jù)待測(cè)樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個(gè)樣品根據(jù)自己的數(shù)量來(lái)定,能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。標(biāo)本用標(biāo)本稀釋液1:1稀釋后加入50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。
3)加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔、加入待測(cè)樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標(biāo)記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時(shí)。
4)甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿(mǎn)洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。
5)每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。
6)甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿(mǎn)洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。
7)每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照。
8)取出酶標(biāo)板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應(yīng)立即測(cè)定結(jié)果。
9)在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值。