詳細介紹
具有如下優(yōu)點:
一、高效、靈敏、特異的抗體;
二、穩(wěn)定的重復性和可靠性;
三、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相載體;
四、適用血清、血漿、組織勻漿液、細胞培養(yǎng)上清液、尿液等等多種標本類型;
五、性價比非常好,節(jié)省實驗經(jīng)費。
產(chǎn)品名稱 | HMGB-1ElisaKit |
英文名稱 | Rabbit High mobility group protein B1, HMGB-1 Elisa Kit |
規(guī)格 | 48T/96T |
測定步驟:
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準確
3.管底加樣,不能加在管壁上
4.加樣時不能產(chǎn)生氣泡
2.溫浴
1.加標本后和加結合物后,應立即放入按規(guī)定的反應溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應疊在一起。
3.為避免蒸發(fā),板上應加蓋,或將板平放在底部墊有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后,反應的時間和溫度通常不做嚴格要求。 如室溫高于20℃,ELISA板可避光放在實驗臺上,以便 不時觀察,待對照管顯色適當時,即可終止酶反應。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過程中不是反應步驟,但卻 是決定實驗成敗的關鍵。
2.目的是洗去反應液中沒有與固相抗原或 抗體結合的物質以及在反應過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質。
4.讀板
1.陰性對照顏色極淺,在定性測定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標儀測定結果,準確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標儀的質 量和軟件的算法。
試劑和樣本的控制方法:
一、試劑
1.試劑的選擇:國家明確要求要采用批批檢定的形式對ELISA試劑嚴格把關,我司嚴格按照進行,已獲得國家承認的“三證”,每一個產(chǎn)品都有對應的批號,只要客戶提前下單,我們就能為您提供新批次的產(chǎn)品,不必擔心會有過期的試劑。我司的試劑,值得您選擇。
2.試劑的準備:先將試劑盒先從冰箱中拿出來,在室溫下放置20-30 min后,再進行測定,使試劑盒在使用前與室溫平衡,這樣做的目的能使反應微孔內的溫度較快地達到所需的溫度,以滿足后面的測定需求。
二、樣本
1.內源性干擾因素:包括類風濕因子、補體、高濃度的非特異免疫球蛋白、異嗜性抗體、某些自身抗體等;
類風濕因子的控制方法:
①用F(ab)2替代完整的IgG;
②標本用聯(lián)有熱變性IgG的固相吸附劑處理;
③檢測抗原時,可用加入到標本稀釋液中使RF降解;
補體的控制方法:
①用EDTA稀釋標本;
②56℃ 30 min加熱血清使C1q滅活;
2.外源性干擾因素:包括標本溶血、細菌污染、保存時間過長或凝固不全等;
控制方法:采血時規(guī)范操作,采集的血液勿用力震蕩,以防溶血;收集標本時采用無菌試管,經(jīng)檢測后再低溫凍存;保存時間不宜過久,檢測時盡量采用新鮮標本;對于凝固不全的血標本可適當加入抗凝劑,并放入37℃水中1 h,待充分凝固后再離心分離血清。
Sodiummalonate二鹽1克BR
Sodiumlignosulfonate分散CMN500克CP,
Sodiumlactate100U高,
Sodiumiodate500克CP,
Sodiumhypophosphite次1克AR,99.5%
Sodiumhydroxide苛性100克AR,99.8%
Sodiumhydrosulfidehydrate化水合物25克3.5N,200-250目
Sodiumhydrogenphthalate二5克AR
Sodiumhydrogencarboante重100毫克光譜級,99.8%
Sodiumhyaluronate玻璃500uBR,0.5-3u/mg,粉末
Sodiumhexametaphoshpate偏六1毫升AR,99%
SodiumGlycinate甘單鹽1克BR,
Sodiumformate鹽5克高,99%
Sodiumfluoroborate四250毫克AR,99.5%
Sodiumfluoroaluminate冰晶石500克基準試,99.9%
HMGB-1ElisaKitQuinoline Yellow黃8004920
Diisobutylaluminium hydride二異鋁1191157
HEXADECYLTRIMETHOXYSILANE十六三硅16415126
5(3AMINOPHENYL)TETRAZOLE間氨四唑73732511
PSEUDOLARIC ACID B土荊皮82508314
Bromothymol Blue溴百里香藍76595
NA水質凱氏標樣
Lead acetate trihydrate鉛6080564
NA4溴芐
Polyphyllin VI重樓皂苷 VI55916513
1,1,3TRIETHOXYPROPANE1,3,3三7789926
Allyl methyl sulfide10152768
2,2'BITHIOPHENE2,2'雙492977
2Methylindene2茚2177471
Gynostemma Pentaphyllum P.E. Gypenoside絞股藍皂苷
荷葉 475832 訂購|咨詢 規(guī)格: 20mg
橄欖苦苷 32619424 訂購|咨詢 規(guī)格: 20mg
佛手柑內 484208 訂購|咨詢 規(guī)格: 20mg
新綠原 906332 訂購|咨詢 規(guī)格: 20mg
膽固 57885 訂購|咨詢 規(guī)格: 20mg
地奧司明 520274 訂購|咨詢 規(guī)格: 20mg
蟾它靈 471954 訂購|咨詢 規(guī)格: 10mg
文多靈 2182141 訂購|咨詢 規(guī)格: 20mg
白術內III 73030714 訂購|咨詢 規(guī)格: 20mg
路路通 4481623 訂購|咨詢 規(guī)格: 20mg
補骨脂寧 53947925 訂購|咨詢 規(guī)格: 20mg
巴馬汀 10605024 訂購|咨詢 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg/vial
去斑 1294030 訂購|咨詢 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg/vial
去木香內 477430 訂購|咨詢 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/vial
D松 10284636 訂購|咨詢 規(guī)格: 0.95,20mg/vial
操作步驟:
1)使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,以免加樣時加入大量的氣泡,產(chǎn)生加樣上的誤差。
2)根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標準品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個標準品和空白孔建議做復孔。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定,能使用復孔的盡量做復孔。標本用標本稀釋液1:1稀釋后加入50ul于反應孔內。
3)加入稀釋好后的標準品50ul于反應孔、加入待測樣品50ul于反應孔內。立即加入50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時。
4)甩去孔內液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。
5)每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。
6)甩去孔內液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。
7)每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照。
8)取出酶標板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應立即測定結果。
9)在450nm波長處測定各孔的OD值。