目錄:上海安為生物科技有限公司>>細(xì)胞系/細(xì)胞株>>鼠源細(xì)胞系>> L929小鼠成纖維細(xì)胞
| 純度 | 99.99% | 供貨周期 | 一周 |
|---|---|---|---|
| 規(guī)格 | 1*10^6 | 貨號 | AW-mic-055 |
| 應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè),制藥 | 主要用途 | 科研使用 |
小鼠成纖維細(xì)胞L929 種屬鑒定 安為生物
也稱為NCTC clone 929，是一種從C3H/An小鼠的正常皮下乳暈和脂肪組織中分離出來的細(xì)胞系。這個細(xì)胞系是在1948年3月建立的，是最早的連續(xù)培養(yǎng)細(xì)胞系之一。L929細(xì)胞具有成纖維細(xì)胞的形態(tài)，貼壁生長，并且對多種病毒敏感，如格拉斯哥水泡性口炎病毒、奧賽州水泡性口炎病毒、腦心肌炎病毒等。此外，它們在免疫抑制的小鼠體內(nèi)具有成瘤性，并且可以作為宿主細(xì)胞進(jìn)行轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)。
L929細(xì)胞在細(xì)胞生物學(xué)和生物醫(yī)學(xué)研究中有著廣泛的應(yīng)用，包括毒性試驗(yàn)、病毒學(xué)研究、藥物篩選、免疫學(xué)測定以及組織工程等。它們的生長特性使得它們成為研究細(xì)胞增殖、細(xì)胞毒性、細(xì)胞黏附和細(xì)胞間連接的重要模型。在培養(yǎng)條件下，L929細(xì)胞通常在含有10%胎牛血清的DMEM高糖培養(yǎng)基中生長，并且在37攝氏度、95%空氣和5%二氧化碳的氣相條件下培養(yǎng)。
在進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)時，L929細(xì)胞的傳代比例通常為1:2到1:8，傳代周期約為2-3天，凍存液配方為培養(yǎng)液92%和DMSO 8%。這些細(xì)胞在科學(xué)研究中的應(yīng)用非常廣泛，但需要注意的是，所有腫瘤和病毒轉(zhuǎn)染的細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性，因此在操作時必須在二級生物安全臺內(nèi)進(jìn)行，并采取適當(dāng)?shù)姆雷o(hù)措施。
| 小鼠成纖維細(xì)胞L929 NCTC clone 929【L929】 | |
| l 細(xì)胞鑒定 | 種屬鑒定已通過 |
| l 細(xì)胞來源 | 國家資源庫 |
| l 細(xì)胞背景 | 1948年三月建立了NCTC clone 929(小鼠結(jié)締組織)，細(xì)胞系L的克隆。細(xì)胞系L是最早建立的連續(xù)培養(yǎng)細(xì)胞系之一，而clone 929是最早的克隆株。從一只100日齡的雄性C3H/An小鼠的正常皮下疏松結(jié)締組織入脂肪組織中建立了親本細(xì)胞系L。 第95代的細(xì)胞系L使用毛細(xì)管法分離單細(xì)胞建立了clone929。檢測發(fā)現(xiàn)鼠痘病毒陰性。 |
| l 細(xì)胞特性
| 1） 來源：組織：皮下結(jié)締組織；疏松結(jié)締組織及脂肪 品系：C3H/An； 2） 形態(tài)：成纖維細(xì)胞，貼壁生長； 3） 含量：>1x106 細(xì)胞數(shù)； 4） 規(guī)格：T25瓶或者1mL凍存管包裝； 5) 用途：僅供科研使用。 |
| l 培養(yǎng)條件 | 1） 準(zhǔn)備MEM（推薦awcell-0012）培養(yǎng)基；馬血清（推薦：awcell-002b）10%；雙抗，1%。該細(xì)胞不能用胎牛血清培養(yǎng)。 2） 培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。 |
| l 注意事項(xiàng)
| 對于貼壁細(xì)胞傳代可以參考以下方法： 1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。 2. 加入0.25％（w / v）胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培養(yǎng)瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘（難消化的細(xì)胞可以適當(dāng)延長消化時間），然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3-4ml含10?S的培養(yǎng)基來終止消化。 3.輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。將細(xì)胞懸液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照說明書要求配置的新的*培養(yǎng)基以保持細(xì)胞的生長活力，后續(xù)傳代根據(jù)實(shí)際情況按1:2~1:5的比例進(jìn)行。 3）細(xì)胞凍存: 收到細(xì)胞后建議在培養(yǎng)前3代時凍存一批細(xì)胞種子以備后續(xù)實(shí)驗(yàn)使用。 |
| l 運(yùn)輸形式 | 低溫：（1）1mL凍存管包裝干冰運(yùn)輸，收到后-80度冰箱保存過夜后轉(zhuǎn)入液氮或直接復(fù)蘇發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染，請立即與我們聯(lián)系。 常溫: （2） T25瓶復(fù)蘇的存活細(xì)胞常溫發(fā)貨，收到后按照細(xì)胞接收后的處理方法操作。 |
| l 生物安全 | 1. 所有動物細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性，必須在二級生物安全臺內(nèi)操作，并請注意防護(hù)，所有廢液及接觸過此細(xì)胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。 2. 建議在復(fù)蘇凍存細(xì)胞時始終使用防護(hù)手套、衣服和戴上防護(hù)面罩。注意：凍存管浸沒在液氮中會泄漏，并會慢慢充滿液氮。解凍時，液氮轉(zhuǎn)化成氣相可能導(dǎo)致容器爆炸或用危險(xiǎn)力吹掉其蓋子，從而產(chǎn)生飛揚(yáng)的碎屑造成人員傷害。 |
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