精品国产亚洲国产亚洲,久热中文在线观看精品视频,成人三级av黄色按摩,亚洲AV无码乱码国产麻豆

湖南立譜沃生物科技有限公司
中級(jí)會(huì)員 | 第4年

18478886838

當(dāng)前位置:> 供求商機(jī)> PolyShooter NEO-PEI DNA 轉(zhuǎn)染試劑 P09310

PolyShooter NEO-PEI DNA 轉(zhuǎn)染試劑 P09310
  • PolyShooter NEO-PEI DNA 轉(zhuǎn)染試劑 P09310
舉報(bào)

貨物所在地:湖南長(zhǎng)沙市

更新時(shí)間:2024-11-03 21:00:08

瀏覽次數(shù):63

在線(xiàn)詢(xún)價(jià)收藏商機(jī)

( 聯(lián)系我們,請(qǐng)說(shuō)明是在 化工儀器網(wǎng) 上看到的信息,謝謝?。?/p>

LeapWal PolyShooter NEO-PEI DNA 轉(zhuǎn)染試劑是一種功能強(qiáng)大、值得信賴(lài)且經(jīng)濟(jì)實(shí)惠的瞬時(shí)轉(zhuǎn)染試劑。NEO-PEI丙?;?脫落,顯著改善了PEI的基因遞送性能,表現(xiàn)出較好的穩(wěn)定性和較低的細(xì)胞毒性,廣泛適用于多種細(xì)胞系,適合大規(guī)模重組蛋白表達(dá)和病毒生產(chǎn)等。

LeapWal PolyShooter NEO-PEI DNA 轉(zhuǎn)染試劑

PolyShooter NEO-PEI Transfection Reagent

DNA transfection reagent for large scale recombinant protein expression and virus production

CatalogNumber:P09310



01/產(chǎn)品概述


  PEI是基因轉(zhuǎn)染中常用的高分子載體,同時(shí)也是基因轉(zhuǎn)染的“金標(biāo)準(zhǔn)"。PEI轉(zhuǎn)染的原理是帶正電的陽(yáng)離子聚合物與核酸中帶負(fù)電的磷酸基團(tuán)形成帶正電的復(fù)合物后,再與細(xì)胞表面帶負(fù)電的蛋白多糖相互作用,通過(guò)細(xì)胞胞吞進(jìn)入細(xì)胞。PEI主鏈上每三個(gè)原子就含有一個(gè)氮原子,因此具有較高的陽(yáng)離子密度,這對(duì)于結(jié)合帶負(fù)電荷的核酸分子是非常有利的。在生理pH條件下,PEI部分胺基被質(zhì)子化,隨著體系pH值的降低,PEI剩余的胺基被質(zhì)子化,從而賦予了其出色的核酸結(jié)合能力和質(zhì)子緩沖能力,有利于通過(guò)質(zhì)子海綿效應(yīng)從內(nèi)涵體逃逸。但是,PEI高的陽(yáng)離子電荷密度,導(dǎo)致其嚴(yán)重的細(xì)胞毒性。同時(shí),PEI25K含有4%-11%的殘留丙?;?,這可能阻礙聚合物主鏈與DNA的有效結(jié)合,影響基因轉(zhuǎn)染效率。因此,針對(duì)PEI的研究工作主要聚焦在通過(guò)功能化修飾以及脫丙酰基,來(lái)提高轉(zhuǎn)染效率、降低細(xì)胞毒性。

  LeapWal PolyShooter NEO-PEI DNA 轉(zhuǎn)染試劑是一種基于分子量25kDaPEI的DNA轉(zhuǎn)染試劑。通過(guò)對(duì)PEI進(jìn)行功能改性,NEO-PEI丙?;?脫落,顯著改善了PEI的基因遞送性能,表現(xiàn)出較好的穩(wěn)定性和較低的細(xì)胞毒性。PolyShooterNEO-PEI與PEI25000轉(zhuǎn)染試劑相比,具有很多優(yōu)點(diǎn)。包括:

  1.PolyShooterNEO-PEI為即用型轉(zhuǎn)染試劑,無(wú)需配置,可直接用于細(xì)胞轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn),而PEI25000需要先把水調(diào)成弱酸性助其溶解,溶解后再用NaOH把pH調(diào)至中性,配置過(guò)程繁瑣復(fù)雜,容易引入誤差導(dǎo)致轉(zhuǎn)染效果不穩(wěn)定。PEI40000雖然較PEI25000更易溶解,但也同樣存在配置繁瑣,配置過(guò)程中容易引入誤差的風(fēng)險(xiǎn)。

  2.PEI25000含有4%-11%的丙?;鶜埩?,丙?;鶗?huì)阻止聚合物主鏈與DNA結(jié)合,影響轉(zhuǎn)染效果。相較于PEI25000,PolyShooterNEO-PEI丙?;?脫落,因此其性能始終高效如一。

  LeapWal PolyShooter NEO-PEI DNA 轉(zhuǎn)染試劑是一種功能強(qiáng)大、值得信賴(lài)且經(jīng)濟(jì)實(shí)惠的瞬時(shí)轉(zhuǎn)染試劑,廣泛適用于多種細(xì)胞系,包括HEK-293、HEK-293T、CHO-K1、COS-1、COS-7、NIH/3T3、Sf9、HepG2和HeLa細(xì)胞等。同時(shí),PolyShooterNEO-PEI轉(zhuǎn)染試劑在大規(guī)模重組蛋白表達(dá)和病毒生產(chǎn)等領(lǐng)域有著高效、低毒、穩(wěn)定、可靠等顯著優(yōu)勢(shì)。PolyShooterNEO-PEI提供從96孔板到200L生物反應(yīng)器持續(xù)的高表達(dá)轉(zhuǎn)染體系,實(shí)現(xiàn)從新藥研發(fā)到工業(yè)化生產(chǎn)的輕松過(guò)度。與大多數(shù)細(xì)胞轉(zhuǎn)染方案相比,使用PolyShooterNEO-PEI既能得到穩(wěn)定的基因表達(dá)效率,又可顯著降低轉(zhuǎn)染成本。



02/產(chǎn)品組分


截屏2022-06-18 11.35.09.png



03/保存條件


冰袋(wetice)運(yùn)輸。4℃保存,有效期6個(gè)月。-30℃至-10℃保存,有效期12個(gè)月,避免反復(fù)凍融。



04/產(chǎn)品特點(diǎn)


易于使用——即用型轉(zhuǎn)染試劑,無(wú)需配置,可直接用于細(xì)胞轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)

轉(zhuǎn)染效率高——針對(duì)多種類(lèi)型細(xì)胞,均表現(xiàn)出優(yōu)秀的轉(zhuǎn)染效率和高重組蛋白表達(dá)

細(xì)胞毒性低——作用溫和,能更好地實(shí)現(xiàn)高轉(zhuǎn)染效率與低細(xì)胞毒性之間的平衡

性能更穩(wěn)定——丙?;?脫落,性能始終高效如一

高性?xún)r(jià)比——既能得到穩(wěn)定的基因表達(dá)效率,又可顯著降低轉(zhuǎn)染成本

化學(xué)成分明確,不含動(dòng)物來(lái)源成分



05/適用范圍


PolyShooter NEO-PEI Transfection Reagent 廣泛適用于多種細(xì)胞系的DNA轉(zhuǎn)染,可應(yīng)用于大規(guī)模重組蛋白表達(dá)和病毒生產(chǎn)等領(lǐng)域。本試劑提供從96孔板到200L生物反應(yīng)器持續(xù)的高表達(dá)轉(zhuǎn)染體系,實(shí)現(xiàn)從新藥研發(fā)到工業(yè)化生產(chǎn)的輕松過(guò)度。



06/實(shí)驗(yàn)流程概要


圖1: PolyShooter NEO-PEI Transfection Reagent轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)流程圖



07/實(shí)驗(yàn)步驟(以24孔板為例,其他培養(yǎng)板加樣體積參考表一:轉(zhuǎn)染量度標(biāo)準(zhǔn))


1: 準(zhǔn)備待轉(zhuǎn)染細(xì)胞

貼壁細(xì)胞:轉(zhuǎn)染前一天,將消化后的細(xì)胞按照每孔0.5-1.5x105個(gè)細(xì)胞的量進(jìn)行鋪板,使其在轉(zhuǎn)染時(shí)密度為50%左右。

懸浮細(xì)胞:轉(zhuǎn)染當(dāng)天,配制轉(zhuǎn)染試劑-核酸復(fù)合物之前,在24孔板中進(jìn)行細(xì)胞鋪板,每500 µL生長(zhǎng)培養(yǎng)基中加入1-3x105個(gè)細(xì)胞。

? 細(xì)胞狀態(tài)會(huì)極大影響轉(zhuǎn)染效率,待轉(zhuǎn)染細(xì)胞應(yīng)處于良好生長(zhǎng)狀態(tài),建議使用生長(zhǎng)處于指數(shù)期、存活率大于90% 的細(xì)胞進(jìn)行轉(zhuǎn)染。

2: 準(zhǔn)備PolyShooterTM NEO-PEI轉(zhuǎn)染試劑-核酸復(fù)合物

(1)取1 μg質(zhì)粒加入到1.5 mL離心管中,往管中加入50 μL無(wú)血清基礎(chǔ)培養(yǎng)基1(與培養(yǎng)體系一致,且無(wú)血清無(wú)雙抗),輕輕混勻,標(biāo)記為“A"。

(2)取2.5 μL* PolyShooterTM NEO-PEI轉(zhuǎn)染試劑加入到另一個(gè)1.5 mL離心管中,往管中加入50 μL無(wú)血清基礎(chǔ)培養(yǎng)基1(與培養(yǎng)體系一致,且無(wú)血清無(wú)雙抗),輕輕混勻,標(biāo)記為“B"。

? * PolyShooterTM NEO-PEI轉(zhuǎn)染試劑使用量受細(xì)胞類(lèi)型及其他實(shí)驗(yàn)條件影響,通常情況下,DNA(μg)和PolyShooterTM NEO-PEI轉(zhuǎn)染試劑(μL)的推薦使用比例為1:2.5。建議初次使用時(shí),可在1:1-1:5的比例范圍內(nèi)設(shè)置梯度進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn),以達(dá)到更優(yōu)轉(zhuǎn)染效果。

(3)將“A"和“B"輕輕混合均勻(總體積為100 µL),在室溫下靜置30分鐘,形成轉(zhuǎn)染試劑-核酸復(fù)合物。

? PolyShooterTM NEO-PEI轉(zhuǎn)染試劑-核酸復(fù)合物在室溫下4個(gè)小時(shí)內(nèi)保持穩(wěn)定。

3: 細(xì)胞轉(zhuǎn)染

從培養(yǎng)箱中取出細(xì)胞,將上述100 µL轉(zhuǎn)染試劑-核酸復(fù)合物加入每孔細(xì)胞,將細(xì)胞放回培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。

4: 分析轉(zhuǎn)染細(xì)胞

轉(zhuǎn)染細(xì)胞培養(yǎng)36-48小時(shí)后,可根據(jù)實(shí)際情況用熒光檢測(cè)法、Western Blot、RT-PCR、ELISA、流式細(xì)胞術(shù)、報(bào)告基因等檢測(cè)轉(zhuǎn)染效果,或加入篩選藥物進(jìn)行穩(wěn)定細(xì)胞株的篩選。




表一:轉(zhuǎn)染量度標(biāo)準(zhǔn)

7.png



08/注意事項(xiàng)

  

1:核酸質(zhì)量:想要獲得最高的轉(zhuǎn)染效率和更低的細(xì)胞毒性,應(yīng)選用高純度、無(wú)菌、無(wú)污染、無(wú)內(nèi)毒素的優(yōu)質(zhì)核酸。質(zhì)粒中的內(nèi)毒素是轉(zhuǎn)染的大敵,內(nèi)毒素會(huì)導(dǎo)致轉(zhuǎn)染效率顯著下降。推薦使用無(wú)內(nèi)毒素質(zhì)粒抽提試劑盒進(jìn)行質(zhì)粒提取,保證質(zhì)粒A260/A280比值為1.8-2.0。同時(shí),需合理計(jì)算質(zhì)粒用量,轉(zhuǎn)染過(guò)量的質(zhì)??赡軙?huì)導(dǎo)致細(xì)胞毒性甚至死亡;


2:細(xì)胞質(zhì)量:細(xì)胞狀態(tài)會(huì)極大影響轉(zhuǎn)染效率,建議使用生長(zhǎng)處于指數(shù)期、存活率大于90%的細(xì)胞進(jìn)行轉(zhuǎn)染;


3: 細(xì)胞密度:建議細(xì)胞傳代后12-24 h內(nèi)、細(xì)胞密度約為50-70% 時(shí)進(jìn)行轉(zhuǎn)染。不同的細(xì)胞轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn),對(duì)細(xì)胞密度的要求不盡相同。在進(jìn)行不同核酸或不同細(xì)胞系的轉(zhuǎn)染時(shí),需要根據(jù)說(shuō)明書(shū)再次優(yōu)化實(shí)驗(yàn)條件。此外,在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中保證相同的接種條件,確保實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的可重復(fù)性;


4: 質(zhì)粒與轉(zhuǎn)染試劑使用比例:對(duì)于大多數(shù)細(xì)胞系,轉(zhuǎn)染復(fù)合物中DNA (μg)與PolyShooterTM NEO-PEI Transfection Reagent (μL) 的比例在1:1至1:5之間,推薦比例為1:2.5。想要獲得更優(yōu)的轉(zhuǎn)染結(jié)果,需要對(duì)這一比例進(jìn)行優(yōu)化,根據(jù)所轉(zhuǎn)染細(xì)胞及質(zhì)粒選擇適合的轉(zhuǎn)染比例;


5: 由于一些特殊培養(yǎng)基中的某些成分可能會(huì)抑制陽(yáng)離子聚合物介導(dǎo)的轉(zhuǎn)染,因此有必要檢測(cè)特殊培養(yǎng)基與PolyShooterTM NEO-PEI Transfection Reagent的相容性;


6: 為了您的健康安全,請(qǐng)規(guī)范操作,穿戴實(shí)驗(yàn)服與手套開(kāi)展實(shí)驗(yàn);


7: 本產(chǎn)品僅供科研使用,請(qǐng)勿用于臨床診斷及治療。


09/實(shí)驗(yàn)案例分析


1: 轉(zhuǎn)染前一天,將圖2所示3種狀態(tài)良好的細(xì)胞接種于24孔板,使其在轉(zhuǎn)染時(shí)密度約為50%。


2: 按照每孔計(jì)量,取1μg GFP質(zhì)粒加入到1.5 mL離心管中,加入50 μL無(wú)血清基礎(chǔ)DMEM培養(yǎng)基稀釋質(zhì)粒,標(biāo)記為A。取2.5 μL PolyShooterTM NEO-PEI Transfection Reagent(圖2上)或某P公司品牌PEI(圖2下)加入到另一個(gè)1.5 mL離心管中,加入50 μL無(wú)血清基礎(chǔ)DMEM培養(yǎng)基稀釋轉(zhuǎn)染試劑,標(biāo)記為B。將A和B輕輕混合均勻,室溫靜置30分鐘,形成轉(zhuǎn)染試劑-核酸復(fù)合物。


3: 30分鐘后,從培養(yǎng)箱中取出細(xì)胞,往細(xì)胞中加入上述100 µL 轉(zhuǎn)染試劑-核酸復(fù)合物。


4: 轉(zhuǎn)染細(xì)胞培養(yǎng)48小時(shí)后,用熒光顯微鏡檢測(cè)GFP綠色熒光蛋白表達(dá)情況,并拍照記錄,實(shí)驗(yàn)結(jié)果如圖2所示。


2.png

圖2:轉(zhuǎn)染細(xì)胞48小時(shí)后,用熒光顯微鏡檢測(cè)GFP綠色熒光蛋白表達(dá)情況



10/其他相關(guān)產(chǎn)品


產(chǎn)品名稱(chēng)

貨號(hào)

規(guī)格

PolyShooterTM Transfection Reagent

P09110-01

1 mL

P09110-05

1 mL x 5

PolyShooterTM INTERFERE Transfection Reagent

P09410-01

1 mL

P09410-05

1 mL x 5

PolyShooterTM Protein

Transfection Reagent

P19103-01

0.3 mL

P19103-05

0.3 mL x 5










會(huì)員登錄

×

請(qǐng)輸入賬號(hào)

請(qǐng)輸入密碼

=

請(qǐng)輸驗(yàn)證碼

收藏該商鋪

X
該信息已收藏!
標(biāo)簽:
保存成功

(空格分隔,最多3個(gè),單個(gè)標(biāo)簽最多10個(gè)字符)

常用:

提示

X
您的留言已提交成功!我們將在第一時(shí)間回復(fù)您~
撥打電話(huà)
在線(xiàn)留言
黄片免费观看视频下载-国产丝袜诱惑在线视频| 亚洲av专区在线观看国产-丰满人妻av一区二区三区| 日韩精品一区二区三区粉嫩av-欧美亚洲国产中文字幕| 中文不卡一区二区三区-老司机在线老司机在线一区| 丝袜美腿人妻连续中出-在线观看日韩三级视频| 日本欧美在线视频观看-国产一区二区三区无码下载快播| 成人免费黄色在线网站-日韩精品一区二区三区四区在线| 日韩毛片在线免费人视频-超碰中文字幕av在线| 可以免费看污污视频的网站-日韩欧美不卡视频在线观看| 国产传媒中文字幕在线观看-午夜福利视频在线播放观看| 日本高清二区视频久二区-大香蕉在线视频大香蕉在线视频| 婷婷综合在线视频观看-亚洲一区二区三区香蕉| 中文不卡一区二区三区-老司机在线老司机在线一区| 亚洲精品蜜桃在线观看-国产欧美日韩在线观看精品观看| 欧美日韩国产综合新一区-国产综合av一区二区三区| 日本韩国亚洲欧美三级-日本东京不卡网一区二区三区| 国产在线观看高清精品-四季av一区二区三区中文字幕| 国产一区二区三区噜噜-精品久久亚洲一区二区欧美| 免费看黄色污污的网站-欧美一区二区三区爽爽| 中文字幕日韩不卡久久-五月天中文字幕啊av| 亚洲黑人欧美一区二区三区-亚洲一区二区三区免费视频播放| 国产欧美一区二区三区嗯嗯-欧美一区二区日本国产激情| 韩漫一区二区在线观看-精品国产免费未成女一区二区三区| 久久免费观看归女高潮特黄-黄色av一本二本在线观看| 交换朋友的妻子中文字幕-日本美女8x8x8x8| 亚洲黄片三级三级三级-国产成人一区二区在线视频| 免费午夜福利视频在线观看-亚洲成人日韩欧美伊人一区| 成人免费黄色在线网站-日韩精品一区二区三区四区在线| 国产老熟女激情小视频-成人一区二区人妻不卡视频| 久久精品人妻一区二区三区极品-久久99热这里只有精品免费| 亚洲黄片三级三级三级-国产成人一区二区在线视频| 欧美精品一区二区不卡-精品国产一区二区三区香蕉网址| 国产一区二区三区噜噜-精品久久亚洲一区二区欧美| 亚洲av成人一区国产精品网-国产偷_久久一级精品a免费| 交换朋友的妻子中文字幕-日本美女8x8x8x8| 精品国产综合一区二区三区-蜜臀一区二区三区刺激视频| 欧美精品国产系列一二三国产真人-在线观看国产午夜视频| 国模自慰一区二区三区-日韩一级黄色片天天看| 国产欧美日本一区二区-一区二区三区亚洲在线播放| 男女做爰猛烈啪啪吃奶在线观看-人妻连裤丝袜中文字幕| 国产一区二区三区四区五区麻豆-欧美一级在线视频播放|