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如何選擇合適的PCR板來確定實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)？

時(shí)間：2022/7/13閱讀：1471
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　　PCR是一種敏感和有效的方法，用于在短時(shí)間內(nèi)將單拷貝的目標(biāo)DNA序列擴(kuò)增至數(shù)百萬拷貝。因此用于PCR反應(yīng)的PCR板必須避免存在污染物和抑制劑，同時(shí)又具有可保障PCR效果的高質(zhì)量。
　　
　　那么如何選擇合適的耗材以獲得準(zhǔn)確可靠的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)呢？
　　
　　PCR板通常由聚丙烯制成，因?yàn)樗嵌栊缘牟⑶夷軌虺惺軣嵫h(huán)過程中溫度的快速變化。聚丙烯的惰性性質(zhì)使其對于反應(yīng)物質(zhì)的吸收降低至小，確保獲取PCR結(jié)果。
　　
　　為了進(jìn)一步保障在純度和生物兼容性方面的批次間一致性，應(yīng)當(dāng)在生產(chǎn)過程中使用全新未循環(huán)使用的醫(yī)學(xué)級或分子生物學(xué)級高品質(zhì)聚丙烯原料。請注意，某些PCR邊框用更強(qiáng)的聚碳酸酯框制成，以與高通量機(jī)器人應(yīng)用兼容。
　　
　　PCR管和板通常可提供多種不同的顏色形式，以便于對于樣品的視覺區(qū)分和鑒別，特別是在高通量實(shí)驗(yàn)中。盡管耗材的顏色對DNA擴(kuò)增沒有影響，但在設(shè)置實(shí)時(shí)PCR板的反應(yīng)時(shí)，與透明耗材相比，我們更推薦使用白色耗材，以實(shí)現(xiàn)靈敏和準(zhǔn)確的熒光檢測。
　　
　　白色耗材通過阻止熒光折射出管來提高qPCR數(shù)據(jù)的靈敏度和一致性。折射被小化時(shí)，更多的信號被反射回檢測器，從而增加信噪比。
　　
　　此外，白色管壁可阻止熒光信號傳遞至PCR儀模塊，避免被吸收或不一致地反射熒光信號，從而使重復(fù)實(shí)驗(yàn)中的差異降低。在少數(shù)情況下，如果熒光探測器由于白色孔的信號反射增強(qiáng)而過飽和，可以使用磨砂孔替代。

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