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ERM-AD427轉(zhuǎn)基因玉米DP98140是由歐盟聯(lián)合研究中心(JRC)認(rèn)證的質(zhì)粒DNA標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì),專用于轉(zhuǎn)基因玉米DP98140(事件DP-098140-6)的檢測(cè)與校準(zhǔn)。該標(biāo)準(zhǔn)品通過(guò)插入80堿基對(duì)(bp)的轉(zhuǎn)基因片段和79 bp的玉米內(nèi)源高遷移基(hmg)基因片段,模擬轉(zhuǎn)基因玉米的DNA特征,確保檢測(cè)方法的準(zhǔn)確性和可溯源性。
標(biāo)識(shí)符:根據(jù)歐盟法規(guī)(EC)第65/2004號(hào),DP98140的唯1標(biāo)識(shí)碼為DP-?9814?-6,用于法律合規(guī)性驗(yàn)證。
組成:溶液含1 mmol/L TRIS、0.01 mmol/L EDTA(pH 7.0)及1 ng/μL的ColE1質(zhì)粒DNA,每瓶約500 μL
制備與認(rèn)證參數(shù)
(1) 材料制備
質(zhì)粒構(gòu)建:質(zhì)粒pIRMM-0090包含DP98140事件的轉(zhuǎn)基因序列與內(nèi)源基因序列,拷貝數(shù)濃度約為2×10? cp/μL,通過(guò)微滴數(shù)字PCR(ddPCR)技術(shù)驗(yàn)證均質(zhì)性。
質(zhì)量控制:ERM-AD427轉(zhuǎn)基因玉米DP98140采用測(cè)序比值和核酸定量技術(shù)(如實(shí)時(shí)熒光定量PCR)確保理論值與測(cè)量值一致,解決傳統(tǒng)質(zhì)粒標(biāo)準(zhǔn)品的量值偏倚問(wèn)題。
(2) 認(rèn)證特性
用途:校準(zhǔn)轉(zhuǎn)基因食品/飼料中DP98140的拷貝數(shù)比,量化檢測(cè)結(jié)果的不確定度。
儲(chǔ)存條件:ERM-AD427轉(zhuǎn)基因玉米DP98140未開(kāi)封時(shí)需在-20±5°C保存,開(kāi)封后需在層流環(huán)境下操作以避免污染,稀釋后的校準(zhǔn)液需當(dāng)日使用
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