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皖儀科技離子色譜法測定食品中的糖類

引言

糖類是供給生物熱能的一種主要營養(yǎng)素，也是人體必需的營養(yǎng)物質(zhì)之一。葡萄糖是自然界分布最廣且最為重要的一種單糖，葡萄糖可以有效地保護(hù)肝臟、改善脫水，也是補(bǔ)充熱能的主要途徑。果糖的作用與功效能夠增加免疫力、潤腸通便、調(diào)理腸胃等。蔗糖是從甘蔗或甜菜中提取出的，是自然界中純天然的二糖，經(jīng)過水解后可分解為葡萄糖和果糖，為人體所用，提高人體功能。具有和中緩急、生津潤燥及補(bǔ)充能量等功效。乳糖能起到提供能量、調(diào)理腸道功能、促進(jìn)鈣吸收等作用和功效。麥芽糖能潤肺止咳、健脾養(yǎng)胃、潤腸通便。但是攝入糖分過多會引發(fā)糖代謝問題，因此對食品中糖含量進(jìn)行檢測是十分必要的。

GB5009.8-2023首次增加了離子色譜法為第二法，適用于食品中果糖、葡萄糖、蔗糖、麥芽糖、乳糖的測定。并將于2024年3月正式實(shí)施。如糧食及糧食制品，果蔬以及果蔬制品，乳及乳制品，甜味劑等食品添加劑，糖果飲料等甜味制品，嬰幼兒制品等各種食品。HPAEC-PAD 逐步成為食品中糖檢測的常用方法。

皖儀開發(fā)了一種離子色譜測試方法檢測食品中的五種糖含量，測試方法簡單，不同組分間分離度良好，重現(xiàn)性好，準(zhǔn)確性高，完全滿足GB5009.8-2023對食品中五種糖的測試要求。

關(guān)鍵詞：離子色譜；食品；葡萄糖；乳糖；果糖；麥芽糖；蔗糖；方法學(xué)驗(yàn)證

1 實(shí)驗(yàn)方法

1.1測試條件

儀器：皖儀科技IC6600系列離子色譜儀配置安培檢測器（金電極）/ 皖儀科技IC6300系列離子色譜儀配置安培檢測器（金電極）；

皖儀科技IC6600系列離子色譜儀

自動(dòng)進(jìn)樣器：AS3110 / AS2800；

色譜柱：糖類專用色譜柱（4.0mm×250mm）；

保護(hù)柱：糖類專用保護(hù)柱（30 mm×4 mm）；

柱溫：30℃；

流速：1.0ml/min；

進(jìn)樣量：25μL；

檢測模式：脈沖積分

1.2 使用試劑

淋洗液：A:超純水 B：200mM NaOH

標(biāo)樣：

葡萄糖：純度≥99％或經(jīng)國家認(rèn)證授予標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)證書的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)；

蔗糖：純度≥99％或經(jīng)國家認(rèn)證授予標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)證書的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)；

果糖：純度≥99％或經(jīng)國家認(rèn)證授予標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)證書的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)；

乳糖：純度≥99％或經(jīng)國家認(rèn)證授予標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)證書的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)；

麥芽糖：純度≥99％或經(jīng)國家認(rèn)證授予標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)證書的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)

樣品：巧克力

1.3 標(biāo)準(zhǔn)溶液制備

混合標(biāo)準(zhǔn)溶液儲備液（10mg/mL）：分別稱取經(jīng)過90℃±2℃干燥2h的果糖和96℃±2℃干燥2h的葡萄糖；蔗糖；麥芽糖；乳糖各1g（精確至0.001g），加水溶解后轉(zhuǎn)移至100mL容量瓶中，加入2mL乙酸，并用水定容至刻度。置于0℃~4℃密封，保存期3個(gè)月。

混合標(biāo)準(zhǔn)中間液（100mg/L）：吸取1.00mL果糖、葡萄糖、蔗糖、麥芽糖和乳糖混合標(biāo)準(zhǔn)儲備液（10.0mg/mL）于100mL容量瓶中,用水定容至刻度。置于0℃~4℃密封,保存期1個(gè)月。

1.4 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備

混合標(biāo)準(zhǔn)工作液:分別吸取0.250mL、0.500mL、1.00mL、2.00mL、2.50mL、4.00mL和6.50mL混合標(biāo)準(zhǔn)中間液（100mg/L）于10mL容量瓶中,用水定容至刻度,配得果糖、葡萄糖、蔗糖、麥芽糖和乳糖的質(zhì)量濃度為2.50mg/L、5.00mg/L、10.0mg/L、20.0mg/L、25.0mg/L、40.0mg/L和65.0mg/L的混合標(biāo)準(zhǔn)工作液，臨用現(xiàn)配。

1.      標(biāo)準(zhǔn)系列曲線濃度梯度表

2 測試結(jié)果

2.1 果糖、葡萄糖、蔗糖、麥芽糖和乳糖線性測試結(jié)果

依次移取2.50mg/L、5.00mg/L、10.0mg/L、20.0mg/L、25.0mg/L、40.0mg/L、65.0mg/L的系列標(biāo)準(zhǔn)工作曲線，按照1.1工作測試條件得到標(biāo)準(zhǔn)曲線譜圖多點(diǎn)重疊圖如圖1，果糖、葡萄糖、蔗糖、麥芽糖和乳糖在該色譜條件下線性相關(guān)系數(shù)R在0.999以上，線性良好。

圖1. 食品中五種糖標(biāo)準(zhǔn)曲線重疊色譜圖

表2. 線性方程

2.2 樣品測試

在1.1的工作測試條件下條件下，將前處理好的巧克力樣品進(jìn)行檢測。樣品圖譜如圖2所示，樣品圖譜中的目標(biāo)蔗糖和乳糖離子峰形對稱，分離度良好，測得巧克力中蔗糖含量為37.088g/100g，乳糖含量為3.312g/100g。

圖2. 樣品測試譜圖

2.3樣品加標(biāo)回收重復(fù)性測試結(jié)果

分別向樣品加3mg/L、10mg/L、25mg/L的5種糖標(biāo)準(zhǔn)品，每個(gè)濃度6個(gè)平行樣品進(jìn)行測定，其測定譜圖分別如圖3-5所示，其回收率在95.02％~104.88％，標(biāo)準(zhǔn)離差率為0.71~2.39。

圖3. 樣品中加標(biāo)3mg/L測試譜圖

圖4. 樣品加標(biāo)10mg/L測試重疊圖譜

圖5. 樣品加標(biāo)25mg/L測試重疊圖譜

2.4 檢出限測試

向樣品中加入3mg/L糖類標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行檢出限測定，其測試譜圖如圖6所示。五種糖信噪比在95~505之間，理論檢出限濃度和定量限濃度如表3所示。在樣品稱樣量為2g，定容體積為100mL時(shí)，五種糖對應(yīng)的方法檢出限和定量限如表4所示，完全滿足GB5009.8-2003中方法檢出限0.015g/100g,定量限為0.050g/100g的要求。

圖6. 檢出限測試圖譜

表3. 樣品加標(biāo)測試結(jié)果

表4. 方法檢出限與定量限

3 總結(jié)

測本次采用皖儀科技離子色譜儀IC6600系列對食品中五種糖測試進(jìn)行系統(tǒng)適用性、標(biāo)準(zhǔn)曲線驗(yàn)證、重復(fù)性驗(yàn)證、加標(biāo)回收率驗(yàn)證。測試結(jié)果峰形較好，線性良好，重復(fù)性高，靈敏度高，完全滿足GB5009.8-2023對食品中五種糖的測試要求。