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液相色譜對(duì)復(fù)方金銀花顆粒及藥材中灰氈毛忍冬皂苷乙的檢測(cè)

前言

金銀花和山銀花同屬忍冬科植物，過去二者都作為金銀花入藥。近些年開始將金銀花和山銀花區(qū)別使用，兩者在藥材產(chǎn)地、性狀及歸屬、化學(xué)成分等方面都存在較大差異。在產(chǎn)地上，金銀花主產(chǎn)于北方，產(chǎn)地相對(duì)單一；山銀花主產(chǎn)于南方，產(chǎn)地分布廣泛。在外觀性狀上，金銀花呈棒狀，上粗下細(xì)，山銀花則多為長(zhǎng)條形，略彎曲，上下粗細(xì)相差不大。兩者在化學(xué)成分上差別最為明顯，金銀花黃酮類成分含量較高，而山銀花皂苷類成分含量較高。 2005 年版《中國(guó)藥典》將金銀花、山銀花分列，主要考慮金銀花大量作為中藥注射劑的原料，而山銀花中皂苷含量較高，一般皂苷具有溶血作用，如果將山銀花與金銀花混用，存在著潛在的安全風(fēng)險(xiǎn)。而能明顯區(qū)別兩者的是山銀花的特有成分“灰氈毛忍冬皂苷乙"。目前常用的摻雜檢測(cè)方法是使用薄層色譜法進(jìn)行初篩，高效液相色譜法補(bǔ)充驗(yàn)證，此方法準(zhǔn)確度較高，是金銀花和山銀花的有效鑒別手段。

本篇文章參考了中國(guó)食品藥品檢定研究院發(fā)布的《復(fù)方金銀花顆粒中灰氈毛忍冬皂苷乙檢查法》中高效液相色譜法色譜條件，采用皖儀科技高效液相色譜儀LC3200系列配置蒸發(fā)光散射檢測(cè)器進(jìn)行檢測(cè)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，理論板數(shù)按灰氈毛忍冬皂苷乙峰計(jì)算不低于 4000，滿足系統(tǒng)適用性試驗(yàn)要求。在金銀花顆粒及藥材的樣品色譜中未出現(xiàn)與灰氈毛忍冬皂苷乙對(duì)照品色譜峰保留時(shí)間相應(yīng)的色譜峰。說明了該方法配備皖儀科技LC3200系列高效液相色譜儀搭配蒸發(fā)光散射檢測(cè)器滿足對(duì)金銀花顆粒及藥材中灰氈毛忍冬皂苷乙的檢測(cè)需求。

關(guān)鍵詞：金銀花顆粒及藥材；高效液相色譜法；蒸發(fā)光散射檢測(cè)器；灰氈毛忍冬皂苷乙。

1實(shí)驗(yàn)方法

1.1  儀器配置

表1高效液相色譜系統(tǒng)配置清單

1.2 實(shí)驗(yàn)材料及輔助設(shè)備

乙腈：色譜純；

甲醇：色譜純；

灰氈毛忍冬皂苷乙對(duì)照品;

金銀花顆粒樣品；

金銀花藥材；

分析天平；

研缽；

微孔濾膜：0.45μm；

超聲波清洗機(jī)；

渦旋混合器。

1.3 測(cè)試條件

表2 高效液相色譜條件

1.4 溶液配制

1.4.1灰氈毛忍冬皂苷乙對(duì)照品溶液

取灰氈毛忍冬皂苷乙對(duì)照品適量，精密稱定，加75%甲醇制成每lml含0.16mg的溶液，即得。

1.4.2 金銀花顆粒供試品溶液的制備

取本品5袋金銀花顆粒中的內(nèi)容物，研細(xì)，取10g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入75%的甲醇25ml，稱定重量，搖勻，超聲處理30分鐘，放冷，再稱定重量，用75%甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。

1.4.3 金銀花藥材供試品溶液的制備

取本品金銀花藥材，切碎研細(xì)，取10g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入75%的甲醇25ml，稱定重量，搖勻，超聲處理30分鐘，放冷，再稱定重量，用75%甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。

2    結(jié)果與討論

2.1系統(tǒng)適用性

 圖1 灰氈毛忍冬皂苷乙標(biāo)準(zhǔn)品色譜圖及色譜參數(shù)

說明：由上述譜圖可見，理論板數(shù)按灰氈毛忍冬皂苷乙峰計(jì)算不低于 4000，滿足系統(tǒng)適用性試驗(yàn)要求。

2.2 樣品測(cè)試

分別精密金銀花顆粒供試品溶液和金銀花藥材供試品溶液各10μL，注入液相色譜儀，測(cè)定。

圖2  金銀花顆粒及金銀花藥材與灰氈毛忍冬皂苷乙對(duì)照品溶液重疊色譜圖

說明：在金銀花顆粒及藥材的供試品溶液色譜中未出現(xiàn)與灰氈毛忍冬皂苷乙對(duì)照品色譜峰保留時(shí)間相應(yīng)的色譜峰。說明了該方法配備皖儀科技LC3200系列高效液相色譜儀搭配蒸發(fā)光散射檢測(cè)器滿足對(duì)金銀花顆粒及藥材中灰氈毛忍冬皂苷乙的檢測(cè)需求。

2.3 注意事項(xiàng)

1. 標(biāo)準(zhǔn)品需在-20℃冰箱中保存；

2.在制備相關(guān)溶液時(shí)需要注意佩戴好實(shí)驗(yàn)室防護(hù)用品。

3 結(jié)論

本篇文章參考了中國(guó)食品藥品檢定研究院發(fā)布的《復(fù)方金銀花顆粒中灰氈毛忍冬皂苷乙檢查法》中高效液相色譜法色譜條件，采用皖儀科技高效液相色譜儀LC3200系列配置蒸發(fā)光散射檢測(cè)器進(jìn)行檢測(cè)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，理論板數(shù)按灰氈毛忍冬皂苷乙峰計(jì)算不低于 4000，滿足系統(tǒng)適用性試驗(yàn)要求。在金銀花顆粒及藥材的樣品色譜中未出現(xiàn)與灰氈毛忍冬皂苷乙對(duì)照品色譜峰保留時(shí)間相應(yīng)的色譜峰。說明了該方法配備皖儀科技LC3200系列高效液相色譜儀搭配蒸發(fā)光散射檢測(cè)器滿足對(duì)金銀花顆粒及藥材中灰氈毛忍冬皂苷乙的檢測(cè)需求。