細(xì)胞培養(yǎng)基是培養(yǎng)環(huán)境中最重要的組成部分,主要為細(xì)胞提供必要的營(yíng)養(yǎng)、生長(zhǎng)因子和激素等70-100種不同化學(xué)成分,并調(diào)節(jié)培養(yǎng)物的pH值和滲透壓。
最初的細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)使用的是從組織提取物和體液中獲得的天然培養(yǎng)基,隨著對(duì)培養(yǎng)基質(zhì)量的需求不斷增長(zhǎng),天然培養(yǎng)基逐漸發(fā)展為合成培養(yǎng)基,即所有的化學(xué)成分和含量都確定的培養(yǎng)基。
細(xì)胞培養(yǎng)基可根據(jù)血清含量的不同,分為含血清培養(yǎng)基、減血清培養(yǎng)基和無(wú)血清培養(yǎng)基三種,其中含血清培養(yǎng)基通常含有10-20%胎牛血清,減血清培養(yǎng)基通常含有1-5%胎牛血清。動(dòng)物血清成分復(fù)雜,含有豐富的蛋白質(zhì)、多肽、氨基酸、脂肪酸、葡萄糖、激素等,其組分及含量常依動(dòng)物性別、年齡、生理狀態(tài)、營(yíng)養(yǎng)條件不同而有差異。盡管大部分成分已知,仍然存在不清楚的組分。因而血清在細(xì)胞培養(yǎng)中的作用至今沒(méi)有WAN全明確。由于不同生產(chǎn)廠家的血清間及同一廠家生產(chǎn)的不同批次的血清間所含因子的質(zhì)量和數(shù)量差異大,因此影響細(xì)胞培養(yǎng)的可重復(fù)性,制約動(dòng)物細(xì)胞規(guī)?;囵B(yǎng)。很多研究人員為了保證同一實(shí)驗(yàn)的一致性,不得不購(gòu)買(mǎi)和儲(chǔ)存大量同一批次的經(jīng)篩選后確定為優(yōu)質(zhì)的血清。這一問(wèn)題也使得比較不同研究者的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)極為困難。因此在含血清培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上發(fā)展出了減血清培養(yǎng)基和無(wú)血清培養(yǎng)基。
減血清培養(yǎng)基
在細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中,減少血清不良影響的另一種策略是使用減血清培養(yǎng)基。減血清培養(yǎng)基是富含營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和動(dòng)物源性因子的基礎(chǔ)培養(yǎng)基配方,可減少所需的血清量。
Opti-MEM™ I減血清培養(yǎng)基是一種經(jīng)過(guò)改良的ZUI低必需培養(yǎng)基 (MEM),能夠使胎牛血清添加量減少至少 50%,而生長(zhǎng)速率或形態(tài)無(wú)變化。還推薦 Opti-MEM™ I 培養(yǎng)基與陽(yáng)離子脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑(如 Lipofectamine™ 試劑)配套使用。Opti-MEM™ I 培養(yǎng)基可用于各種懸浮和貼壁的哺乳動(dòng)物細(xì)胞,包括 Sp2、AE-1、CHO、BHK-21、HEK 和原代成纖維細(xì)胞。針對(duì)廣泛的細(xì)胞培養(yǎng)應(yīng)用,提供了多種組分的 Opti-MEM™ I 改良培養(yǎng)基。
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