MLPA法是“多重連接依賴探針擴增的技術(shù)"的簡稱，是一種高通量、針對待測核酸中靶序列進行定性和定量分析的檢測技術(shù)。它的基本原理是利用簡單的探針和靶序列DNA進行雜交，之后通過連接、PCR擴增，產(chǎn)物通過毛細管電泳分離及數(shù)據(jù)收集，分析軟件對收集的數(shù)據(jù)進行分析最后得出結(jié)論。下面讓我們一起來看看MRC Holland探針SALSA MLPA Probemix P035 DMD-2(P035)的產(chǎn)品介紹吧！
一、產(chǎn)品簡介：
SALSA MLPA Probemixe P035 DMD-2是體外診斷（IVD）或僅用于研究的（RUO）半定量分析，（未培養(yǎng)的）沒有母體污染或胎兒血液的絨毛。P035 DMD-2旨在確認Duchenne肌營養(yǎng)不良或Becker肌營養(yǎng)不良的潛在病因和臨床診斷，用于高危家族成員的分子遺傳學檢測和攜帶者篩查。
用P035 DMD-2檢測到的拷貝數(shù)變化（CNV）應使用不同的技術(shù)進行確認。特別是，僅通過單個探針檢測到的CNV總是需要通過另一種方法進行確認。DMD基因中的大多數(shù)缺陷是CNVs，但可能發(fā)生點突變，MLPA無法檢測到。因此，建議將該測定法與序列分析結(jié)合使用。
化驗結(jié)果旨在與其他臨床和診斷結(jié)果結(jié)合使用，符合專業(yè)實踐標準，包括通過替代方法進行確認、父母評估、臨床基因評估和咨詢（視情況而定）。該測試的結(jié)果應由臨床分子遺傳學家或同等人員進行解釋。
二、產(chǎn)品組分：
SALSA MLPA Probemix P035-B1 DMD-2包含48個MLPA探針，擴增產(chǎn)物在130和500 nt之間。P035-B1探針包含一個用于轉(zhuǎn)錄物變體Dp427m中包括的79個DMD外顯子中的每一個的探針。此外，還存在一個探針在P035-B1中，用于在轉(zhuǎn)錄物變體Dp427c中發(fā)現(xiàn)的替代啟動子/外顯子。執(zhí)行兩次MLPA。因此，一個與P034-B2反應，一個具有P035-B1反應，就足以研究所有DMD的拷貝數(shù)外顯子。此外，P034-B2和P035-B1分別包含9個和8個參考探針，用于檢測X染色體上的位置。
該probemix含有9個質(zhì)量控制片段，產(chǎn)生64至105nt之間的擴增產(chǎn)物：四個DNA數(shù)量片段（Q片段），兩個DNA變性片段（D片段），一個基準片段，以及一個X染色體和一個Y染色體特異性片段。
長度（nt） | 名稱 |
64-70-76-82 | Q片段（僅在<100 ng樣本DNA中可見） |
88-96 | D-片段（低信號表示不wan全變性） |
92 | 基準片段 |
100 | X片段（X染色體特異性） |
105 | Y片段（Y染色體特異性） |
產(chǎn)品訂購：
貨號 | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 |
P035-025R | SALSA MLPA Probemix P035 DMD-2 | 25 rxn |
P035-050R | SALSA MLPA Probemix P035 DMD-2 | 50 rxn |
P035-100R | SALSA MLPA Probemix P035 DMD-2 | 100 rxn |
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