全式金B(yǎng)L21(DE3)化學感受態(tài)細胞（CD601-03）是一種適用于高效外源基因蛋白表達的宿主菌株。它使用T7 RNA聚合酶作為表達系統(tǒng)，該酶的表達受λ噬菌體DE3區(qū)的lacUV5啟動子控制。這個啟動子整合到BL21的染色體上。全式金B(yǎng)L21(DE3)化學感受態(tài)細胞特別適用于非毒性蛋白的表達需求。它被廣泛應(yīng)用于蛋白表達領(lǐng)域，可實現(xiàn)快速、高效地產(chǎn)生大量外源蛋白。
Tans BL21(DE3)化學感受態(tài)細胞經(jīng)特殊工藝制作，可用于DNA的化學轉(zhuǎn)化。使用pUC19質(zhì)粒DNA檢測，轉(zhuǎn)化效率高達107cfu/μg DNA。使用Control PlasmidI(Amp+)用于檢測細胞是否具有表達功能，表達蛋白大小為25 kDa. 該菌株可在-70℃保存六個月，但不適合在液氮中保存。
產(chǎn)品特點：
全式金B(yǎng)L21(DE3)化學感受態(tài)細胞（CD601-03）是一種理想的宿主菌株，用于高效表達外源基因的蛋白。它采用T7 RNA聚合酶作為表達系統(tǒng)，并由λ噬菌體DE3區(qū)的lacUV5啟動子控制T7 RNA聚合酶基因的表達。這個啟動子整合在BL21染色體上。該菌株非常適合表達非毒性蛋白。它被廣泛應(yīng)用于T7 RNA聚合酶為表達系統(tǒng)的高效外源基因的蛋白表達領(lǐng)域。
操作方法：
· 取50 ml冰浴上融化的感受態(tài)細胞，加入目的DNA，輕輕混勻，在冰浴中放置30分鐘。
· 42℃水浴熱激45秒，然后快速將管轉(zhuǎn)移到冰浴中2分鐘，該過程不要搖動離心管。
· 向每個離心管中加入500 μ無菌的SOC或LB培養(yǎng)基(不含抗生素)，混勻后置于37℃，200rpm培養(yǎng)1小時使細菌復蘇。
· 根據(jù)實驗要求(質(zhì)粒，重組連接產(chǎn)物轉(zhuǎn)化)，吸取不同體積已轉(zhuǎn)化的感受態(tài)細胞加到含相應(yīng)抗生素的LB瓊脂培養(yǎng)基上，將細胞均勻涂開。將平板置于37℃至液體被吸收，倒置平板，37℃過夜培養(yǎng)。
注意事項：
· 避免反復凍融：盡量避免頻繁地凍融細胞。每次解凍后，盡可能立即進行轉(zhuǎn)化實驗，而不是將其再次冷凍。
· 避免使用移液槍吹吸：在操作過程中，盡量避免使用移液槍進行強力吸取和排放細胞。這樣可以減少對細胞的機械壓力和損傷。
· 輕柔操作：在整個操作過程中要注意輕柔處理細胞。避免過度搖動或震蕩細胞，以防止細胞破裂或損壞。
產(chǎn)品選購：
貨號 | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 |
CD601-03 | BL21(DE3) Chemically Competent Cell | 20×100 μl |
4
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